ClearLLab 10C - FI - Suomenkielinen versio

CE-VASTA-AINEYHDISTELMÄT LEUKEMIA-/LYMFOOMANALYYSEIHIN C LEAR LL AB 10C -P ANEELIT

TAPAUSKIRJA

Jokainen tapahtuma on merkitsevä * vain non-Hodgkinin lymfooma

1

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

SISÄLLYSLUETTELO

JOHDANTO..................................................................................3 TAUSTA.........................................................................................3 IMMUNOFENOTYYPITYSTÄ KOSKEVAT KONSENSUSSUOSITUKSET.....................................................4 CLEARLLAB 10C -PANEELIEN KÄYTTÖTARKOITUS.........4 CLEARLLAB 10C -PANEELIT...................................................4 CLEARLLAB-KOMPENSOINTISARJA....................................5 TAPAUSTEN VALINTA JA TULKINTA.....................................5 AIHEESEEN LIITTYVÄT ASIAKIRJAT.....................................6 LÄHTEET......................................................................................6 TAPAUKSET.................................................................................7 EI IMMUNOFENOTYYPIN POIKKEAVUUTTA.......................7 PERIFEERINEN KOKOVERI................................................... 7 Tapaus 1: Normaali kokoveri.............................................7 LUUYDIN....................................................................................32 Tapaus 2: Normaali luuydin...........................................32 IMUSOLMUKE.......................................................................... 56 Tapaus 3: Normaali imusolmuke.................................56 B-SOLUALKUPERÄN NEOPLASTINEN PROSESSI.......... 80 B-LYMFOBLASTINEN LEUKEMIA / LYMFOBLASTINEN LYMFOOMA...................................... 80 Tapaus 4: Akuutti b-lymfoblastinen leukemia / lymfoblastinen lymfooma............................................. 80 B-LYMFOBLASTINEN LEUKEMIA / LYMFOBLASTINEN LYMFOOMA.....................................105 Tapaus 5: Akuutti b-lymfoblastinen leukemia / lymfoblastinen lymfooma............................................105 KROONINEN LYMFOSYYTTILEUKEMIA / PIENILYMFOSYYTTINEN LYMFOOMA..........................130 Tapaus 6: Krooninen lymfosyyttileukemia / pienilymfosyyttinen lymfooma..................................130 KROONINEN LYMFOSYYTTILEUKEMIA / PIENILYMFOSYYTTINEN LYMFOOMA..........................154 Tapaus 7: Krooninen lymfosyyttileukemia / pienilymfosyyttinen lymfooma.................................. 154 MANTTELISOLULYMFOOMA........................................... 178 Tapaus 8: Manttelisolulymfooma...............................178 PLASMASOLUMYELOOMA..............................................202 Tapaus 9: Plasmasolumyelooma..............................202 FOLLIKULAARINEN LYMFOOMA.................................. 226 Tapaus 10: Follikulaarinen lymfooma..................... 226

ITUKESKUSPERÄINEN B-SOLULYMFOOMA............250 Tapaus 11: Itukeskusperäinen B-solulymfooma..............................................................250 KYPSÄ B-SOLULYMFOOMA............................................ 274 Tapaus 12: Kypsä B-solulymfooma...........................274 KYPSÄ B-SOLULYMFOOMA............................................298 Tapaus 13: Kypsä B-solulymfooma.......................... 298 T-SOLUALKUPERÄN NEOPLASTINEN PROSESSI................................................ 322 T-LYMFOBLASTINEN LEUKEMIA / LYMFOBLASTINEN LYMFOOMA.................................... 322 Tapaus 14: T-lymfoblastinen leukemia / t-lymfoblastinen lymfooma........................................ 322 T-LYMFOBLASTINEN LEUKEMIA / LYMFOBLASTINEN LYMFOOMA....................................346 Tapaus 15: T-lymfoblastinen leukemia / t-lymfoblastinen lymfooma........................................346 SUURI GRANULAARINEN T-LYMFOOMA..................370 Tapaus 16: T-solujen lymfoproliferatiivinen häiriö...................................................................................... 370 SUURI GRANULAARINEN T-LYMFOOMA..................394 Tapaus 17: T-solujen lymfoproliferatiivinen häiriö......................................................................................394 MYELOOISEN ALKUPERÄN NEOPLASTINEN PROSESSI.................................................418 AKUUTTI MYELOOINEN LEUKEMIA.............................418 Tapaus 18: Akuutti myelooinen leukemia.............. 418 AKUUTTI MYELOOINEN LEUKEMIA............................442 Tapaus 19: Akuutti monosyyttinen leukemia......442 AKUUTTI MYELOOINEN LEUKEMIA............................466 Tapaus 20: Akuutti myelooinen leukemia, NOS........................................................................................466 AKUUTTI MYELOOINEN LEUKEMIA........................... 490 Tapaus 21: Akuutti promyelosyyttinen leukemia.............................................................................. 490 AKUUTTI MYELOOINEN LEUKEMIA.............................514 Tapaus 22: Akuutti monosyyttinen leukemia...... 514 MYELODYSPLASTINEN OIREYHTYMÄ....................... 538 Tapaus 23: Myelodysplastinen oireyhtymä......... 538 MYELODYSPLASTINEN OIREYHTYMÄ.......................562 Tapaus 24: Myelodysplastinen oireyhtymä......... 562

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

2

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

JOHDANTO Tapauskirja on tarkoitettu avuksi analysoitaessa virtaussytometrisiä immunofenotyypitystietoja, jotka on saatu käyttämällä Beckman Coulterin ClearLLab 10C -paneelien CE- ja IVD-merkittyjä leukemia- ja lymfooma-analyysireagensseja Beckman Coulter Navios- ja Navios EX -virtaussytometreissa. Se sisältää esimerkkitapauksia, joiden löydökset ovat tyypillisiä erilaisille lymfaattisille ja myelooisille kasvaimille, ja tapauksia potilailta, joiden kliiniset löydökset ja/tai laboratoriolöydökset viittaavat piilevään neoplastiseen prosessiin, mutta joilla ei ole tunnistettu mitään immunofenotyypin poikkeavuutta. Näytetyyppejä ovat perifeerinen kokoveri, luuydin ja imusolmukkeet. Jokainen tapaus sisältää kliinisen kuvauksen potilaan demografisista tiedoista ja kliinisestä historiasta, tapauskohtaiset luettelotilatiedostot tämän tapauskirjan käyttäjän uudelleenanalysoitavaksi, ClearLLab 10C -kohtaiset analyysiprotokollat käytettäväksi luettelotilatietojen kanssa sekä raportin, johon kuuluu sekä analyysi että annetut protokollat. Jokaisessa raportissa on analyysihuomautuksia, joissa immunofenotyyppiset löydökset ja mahdolliset piilevät vaarat tuodaan esiin. HUOMAUTUS: Tapauskirjan esimerkit annetaan vain havainnollistamistarkoituksessa, ja siinä ei välttämättä esitellä kaikkia hematolymfaattisten kasvainten luokkia, eikä siinä välttämättä kuvailla tai havainnollisteta kaikkia mahdollisia immunofenotyyppisiä variantteja. TAUSTA Virtaussytometrinen immunofenotyypitys määrittää tiettyjen antigeenien esiintymistä tai puuttumista kaikista näytteen sisältämistä yksittäisistä soluista. Yhdessä nämä tulokset muodostavat kullekin solulle immunofenotyyppisen profiilin, joka joko vastaa näytetyypin odotustenmukaista populaatiota (eli on normaali) tai ei vastaa näytetyypin odotustenmukaista populaatiota (eli on poikkeava). Arvioitaessa näytteitä potilailta, joilla epäillään hematolymfaattisia syöpäsairauksia, prosessissa on useita vaiheita 1 :

• Kaikkien näytteen solupopulaatioiden analysointi.

• Kunkin solupopulaation määritys joko ”normaaliksi” tai ”poikkeavaksi”.

• Poikkeavan populaation tarkka luonnehdinta antigeenien esiintymisen tai puuttumisen sekä fluorokromileimatuilla vasta-aineilla toteutetun värjäyksen heikkouden tai voimakkuuden perusteella. • Poikkeavan immunofenotyypin tulkinta huomioiden mahdollisuuksien mukaan lisätiedot, kuten kliininen historia, histologia, sytologia, immunohistokemia sekä genotyypitystutkimusten, kuten in situ -hybridisaation, karyotyypityksen ja molekyylidiagnostiikan, tulokset.

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

3

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

IMMUNOFENOTYYPITYSTÄ KOSKEVAT KONSENSUSSUOSITUKSET Viimeisten kahdenkymmenen vuoden aikana on annettu konsensussuosituksia koskien potilasnäytteiden virtaussytometristä immunofenotyypitystä, kun potilaalla on todettu tai epäillään hematolymfaattisia syöpäsairauksia. Useita ohjeistuksia on ilmestynyt tieteellisissä julkaisuissa. Virtaussytometrinen immunofenotyypitys sisällytettiin WHO:n lymfohematopoieettisten malignoomien luokitukseen vuonna 2008 2 . Lääketieteellisiä indikaatioita ja virtaussytometrisenmäärityksen validointia, mukaan lukien testauksen analyysia edeltävät, analyysin aikaiset ja analyysin jälkeiset tiedot, käsitellään vuonna 2006 annetuissa Bethesdan konsensuskonferenssin suosituksissa 3,4,5 ja ICSH:n/ICCS:n solupohjaisia fluroresenssimäärityksiä koskevissa käytäntöohjeissa 6,7,8 . ClearLLab 10C -PANEELIEN KÄYTTÖTARKOITUS ClearLLab 10C -paneelit on tarkoitettu diagnostiseen in vitro -käyttöön solupopulaatioiden kvalitatiivisessa tunnistuksessa, jossa hyödynnetään Navios- ja Navios EX -virtaussytometreillä tehtävää moniparametrista immunofenotyypitystä. Näitä reagensseja käytetään erotusdiagnostiikan apuna hematologisesti poikkeavilla potilailla, joilla on tai joilla epäillään olevan seuraavia hematopoieettisia syöpäsairauksia: krooninen leukemia, akuutti leukemia, non‑Hodgkin-lymfooma, myelooma, myelodysplastinen oireyhtymä (MDS) ja/tai myeloproliferatiivisia kasvaimia (MPN). Reagensseja voidaan käyttää periferaalisten kokoverinäytteiden (kerätty K 2 EDTA-happoon, happo-sitraatti-dekstroosiin (ACD) tai hepariiniin), luuydinnäytteiden (kerätty K 2 EDTA-happoon, ACD:hen tai hepariiniin) ja imusolmukenäytteiden kanssa. Patologin tai vastaavan ammattilaisen tulee vahvistaa tulosten tulkinta sekä muut kliiniset löydökset ja laboratoriolöydökset.

Nämä reagenssit antavat multiparametrisia ja kvalitatiivisia tuloksia seuraavassa luetelluille pinta-antigeeneille:

ClearLLab 10C -paneelit

Sininen laser

Punainen laser

Violetti laser

APC- A750 PB KRO

Osanro Putki

FITC PE ECD PC5.5 PC7 APC APC- A700

B96805 B-soluputki

Kappa Lambda CD10 CD5 CD200 CD34 CD38 CD20 CD19 CD45

B96806 T-soluputki

CD4

CD2 CD56 CD5 CD34 CD7

CD8

CD3 CD45

TCR γδ

B96807 M1-soluputki

CD16

CD7

CD10 CD13 CD64 CD34 CD14 HLA‑DR CD11b CD45

B96808 M2-soluputki

CD15

CD123 CD117 CD13 CD33 CD34 CD38 HLA‑DR CD19 CD45

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

4

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

ClearLLab-KOMPENSOINTISARJA

Sininen laser

Punainen laser

Violetti laser

APC- A750 PB KRO

Osanro

FITC

PE

ECD PC5.5

PC7

APC APC- A700

B74074

CD4

CD4

CD3

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD8

Edellä mainittu reagenssi toimitetaan standardoidussa muodossa, ja se on tarkoitettu käytettäväksi näytteen valmistelureagenssien ja sytometrikokoonpanon sekä tiedonkeruu ja -analysointiohjelmiston kanssa. ClearLLab 10C -paneelit täyttävät Bethesda-ohjeistuksen standardointisuositukset 2 . Lisätietoja ClearLLab 10C -paneeleista on osoitteessa beckman.com/ClearLLab . TAPAUSTEN VALINTA JA TULKINTA Tässä tapauskirjassa esitetyt tiedot laadittiin noudattaen ClearLLab 10C Panel Instructions For Use (ClearLLab 10C -paneelin käyttöohjeet) -oppaan ohjeita. Opas on saatavilla osoitteessa beckman.com . Edustavat tapaukset valittiin kliinisten tutkimusten tiedoista, ja niiden läpikäynnistä, kommentoinnista ja tulkinnasta vastasivat

Brent Wood MD PhD laboratoriolääketieteen ja patologian professori hematopatologian laitoksen johtaja hematopatologisen laboratorion johtaja ja SCCA Pathologyn johtaja

lääketieteellinen johtaja, SCCA Laboratories University of Washington, Seattle, WA, USA Xueyan Chen, MD, PhD laboratoriolääketieteen apulaisprofessori hematopatologisen laboratorion apulaisjohtaja University of Washington, Seattle, WA

Yi Zhou, MD PhD apulaisprofessori laboratoriolääketieteen laitos University of Washington, Seattle, WA

Analyysiprotokollat: Lataa ClearLLab 10C -analyysiprotokolla. Analyysi: Lataa tapauskohtaiset Kaluza C -analyysitiedostot.

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

5

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

LÄHTEET 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms. F.E. Craig, K.A. Foon. Blood. 2008; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Swerdlow SH, et al. Blood. 2016;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Arber DA, et al. Blood 2016 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia. Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications. Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S5-13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia. Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues. Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):291-308. doi: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations. Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):309-14. doi: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria. Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):315-23. doi: 10.1002/cyto.b.2110 AIHEESEEN LIITTYVÄT ASIAKIRJAT • ClearLLab 10C Application System Guide (ClearLLab 10C -sovellusjärjestelmän opas), osanumero C28541AA • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use (Kaluza C ‑virtaussytometriaohjelmiston käyttöohjeet), osanumero C20153 • Navios Flow Cytometer Instructions For Use (Navios-virtaussytometrin käyttöohjeet), osanumero C28487AA • Navios EX Flow Cytometer Instructions For Use (Navios EX -virtaussytometrin käyttöohjeet), osanumero C28480AA • ClearLLab 10C Panels Instructions For Use (ClearLLab 10C -paneelien käyttöohjeet), osanumero C00197 • ClearLLab Compensation Beads Instructions For Use (ClearLLab-Compensation Beads käyttöohjeet), osanumero C00201 • ClearLLab Compensation Kit Instructions For Use (ClearLLab-kompensointisarjan käyttöohjeet), osanumero B74074 • ClearLLab Control Cells Instructions For use (ClearLLab Control Cells käyttöohjeet), osanumero B99884 • ClearLLab Control Cells QC Analysis Protocols Download Addendum (ClearLLab Control Cells laadunvalvonnan analyysiprotokollien latausliite), osanumero C33283AA

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

6

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

TAPAUKSET

Tapauksiin sovelletaan seuraavaa rajausten värikoodausta:

Lymfosyytit (rajaus Ly) / NK-solut: punainen CD19+-B-solut: oranssi CD3+-T-solut: vaaleansininen

Monosyytit (rajaus Mo): vihreä Granulosyytit (rajaus Gr): sininen

CD45dim (Himmeä CD45): purppura Muut poikkeavat populaatiot: sinivihreä CD45-negatiivinen populaatio: harmaa

EI IMMUNOFENOTYYPIN POIKKEAVUUTTA Virtaussytometria on leukosyyttipopulaatioiden erottelumenetelmä. Se voi edesauttaa erotusdiagnostiikkaa hematologisesti poikkeavilla potilailla, joilla on tai joilla epäillään olevan jokin hematopoieettinen syöpäsairaus, kuten krooninen leukemia, akuutti leukemia, non‑hodgkinin lymfooma, myelooma, myelodysplastinen oireyhtymä (MDS) ja/tai myeloproliferatiivisia kasvaimia (MPN). Tämänkaltaisissa kliinisissä tilanteissa poikkeavien populaatioiden tunnistamisen kannalta on ensisijaisen tärkeää tuntea kokoveri-, luuydin- ja imukudosnäytteiden sisältämät normaalit solupopulaatiot. Seuraavassa on esimerkkejä ClearLLab 10C -paneeleilla värjätyistä normaaleista näytteistä.

PERIFEERINEN KOKOVERI Tapaus 1: Normaali kokoveri

Kliininen kuvaus

Tällä 65-vuotiaalla miehellä on trombosytopenia. Perifeerinen kokoveren näyte toimitetaan ClearLLab 10C -paneeleilla tehtävään virtaussytometriseen immunofenotyypitykseen.

Virtaussytometrinen immunofenotyypitys

B-soluputki

Kuva 1: Time (Aika) vs. CD45 -pistekuvaaja on rajoittamaton ja näyttää kaikki peräkkäin kerätyt tapahtumat. Kuvaajan avulla voidaan arvioida nestemäinen perturbaatio näytteen keräämisen aikana. Tapahtumien yhdenmukainen kuvio ajan kuluessa osoittaa stabiilin keräyksen. Stabiilista kuviosta poikkeavat tapahtumat voidaan sulkea pois Time (Aika) -rajauksessa.

Kuva 2: FS INT (FS-INTEGRAALI) vs. FS PEAK (FS-HUIPPU) -pistekuvaaja näyttää Time (Aika) -rajauksen tapahtumat. Kuvaajasta on tarkoituksella jätetty pois solujen dupletit ja kasautumat. Singlettitapahtumat osoittavat lineaarisen INT (INTEGRAALI) vs. PEAK (HUIPPU) -suhteen. Ne sisältyvät Singlets (Singletit) -rajaukseen, mutta dupletit ovat lineaarisen suhteen ulkopuolella.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

7

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

B-soluputki

Kuva 3: Sivusironta vs. suorasironta -pistekuvaaja osoittaa Singlets (Singletit) -rajauksen tapahtumat. Kaavion tarkoituksena on sulkea pois solujen debris, joka yleensä pienentää suorasirontaa. Varhaiset apoptoottiset solut ovat myös suurentaneet hieman sivusirontaa, kun taas myöhäiset apoptoottiset ja nekroottiset solut on pienentäneet sivusirontaa vaihtelevasti. Elinkelpoiset solut sisältyvät Cells (Solut) -rajaukseen.

Kuva 4: CD45 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaaCells (Solut) -rajauksen tapahtumat. Kuvaajan tarkoituksena on osoittaa valkosolujen eri alijoukot, jotka on rajattu CD45-positiivisiksi. CD45-negatiivinen populaatio sisältää yleensä punasoluja, verihiutalekasautumia, kudosjätettä tai ei-hematopoieettisia soluja.

Kuva 5: CD45 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa CD45+-rajauksen tapahtumat. Pistekuvaajamahdollistaa perifeerisen veren, luuytimen ja imusolmukkeiden näytteistä tyypillisesti löytyvien useiden valkosolupopulaatioiden erottamisen, mukaan lukien lymfosyytit (Ly-rajaus, punainen/oranssi), monosyytit (Mo-rajaus, vihreä) ja granulosyytit (Gr-rajaus, sininen). CD45dim (Himmeä CD45) -rajaus (purppura) kattaa alueen, jossa on tyypillisesti varhaisia esisoluja, eli myeloblasteja ja epäkypsiä B-soluja. Tällä alueella voi esiintyä myös basofiileja, plasmasytoideja dendriittisoluja, plasmasoluja ja NK-soluja. Eri populaatiot voidaan tunnistaa analysoinnin aikana käyttämällä eri värejä kunkin rajauksen tapahtumiin.

Kuva 6: CD19 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa Cells (Solut) -rajauksen tapahtumat. CD19+-rajaus tunnistaa CD19-positiiviset solut. CD19 ilmenee kypsissä ja epäkypsissä B-soluissa sekä useimmissa plasmasoluissa. Näillä soluilla on tyypillisesti pieni tai kohtalainen sivusironta.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

8

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

B-soluputki

Kuva 7: Kappa vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. Pinnan kappa-kevytketju ilmenee kypsissä B-soluissa (oranssi) jamyöhäisen vaiheen epäkypsissä B-soluissa. Kappa-positiivisten B-solujen osuus on normaalisti suurempi kuin kappa-negatiivisten (lambda-positiivisten) B-solujen. Kappa-positiivisuus näkyy monosyyteissä (vihreä) Fc-reseptoriin perustuvan immunoglobuliinin sitoutumisen vuoksi. Kappa-kevytketjun positiiviset solut näkyvät kuvaajan oikeassa reunassa.

Kuva 8: Lambda vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. Pinnan lambda-kevytketju ilmenee kypsissä B-soluissa (oranssi) jamyöhäisen vaiheen epäkypsissä B-soluissa. Lambda-positiivisten B-solujen osuus on normaalisti pienempi kuin lambda-negatiivisten (kappa-positiivisten) B-solujen. Lambda-positiivisuus näkyy monosyyteissä (vihreä) Fc-reseptoriin perustuvan immunoglobuliinin sitoutumisen ansiosta. Lambda-kevytketjun positiiviset solut näkyvät kuvaajan oikeassa reunassa.

Kuva 9: CD10 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD10 ilmenee epäkypsissä B-soluissa, kypsissä itukeskusten B-soluissa ja kypsissä granulosyyteissä (sininen). Granulosyyteillä on suuri sivusironta, kun taas lymfoidisilla soluilla on pieni sivusironta.

Kuva 10: CD5 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD5 ilmenee epäkypsissä ja kypsissä T-soluissa (punainen, oikea alakulma) sekä himmeästi kypsien B-solujen alijoukossa (oranssi). Näillä lymfoidisilla soluilla on tyypillisesti pieni sivusironta.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

9

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

B-soluputki

Kuva 11: CD200 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD200 ilmenee tyypillisesti B-soluissa, mutta se on negatiivinen joissakin neoplastisissa B-soluissa. Se on erityisen hyödyllinen manttelisolulymfooman (yleensä CD200- negatiivinen) erottamisessa kroonisesta lymfosyyttileukemiasta / pienilymfosyyttisesta lymfoomasta (yleensä CD200-positiivinen).

Kuva 12: CD34 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD34 on varhaisten hematopoieettisten esisolujenmarkkeri. Se ilmenee hematopoieettisissa kantasoluissa, varhaisissa myelooisissa esisoluissa (myeloblasteissa) ja epäkypsissä B- ja T-soluissa (lymfoblasteissa). Kypsät granulosyytit, monosyytit ja lymfosyytit ovat CD34-negatiivisia. CD34-positiivisia esisoluja on normaalisti vähemmän kuin 0,01 % perifeerisen veren valkosoluista.

Kuva 13: CD38 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD38 on aktivoitumismarkkeri. Se ilmenee korkeimmalla tasolla plasmasoluissa, kohtalaisella tasolla epäkypsissä myelooisissa ja lymfoidisissa esisoluissa, alhaisella tasolla monosyyteissä (vihreä) ja vaihtelevalla tasolla aktivoituneissa kypsissä lymfosyyteissa.

Kuva 14: CD20 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD20 ilmenee kypsissä B-soluissa (oranssi) ja vaihtelevan matalalla tasolla kypsien T-solujen alijoukossa. Sitä ilmenee vaihtelevasti myöhemmän vaiheen epäkypsissä B-soluissa. CD20-positiiviset solut ovat yleensä lymfosyyttirajauksessa, ja niillä on pieni sivusironta.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

10

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

B-soluputki

Kuva 15 Lambda vs. kappa -pistekuvaaja osoittaa kaikki CD19+-solut. Varhaiset epäkypsät B-solut (purppura) eivät ilmennä pinnan immunoglobuliin kevytketjuja, eli niillä on negatiivinen kappa- tai lambda-kevytketju. Kypsät B-solut ovat polyklonaalisia ja ne ilmenevät joko kappa- tai lambda-kevytketjua. Normaali kappa-lambda-suhde on 1,4 alueella 1–2. Taustan lisääntymisen plasman immunoglobuliinin takertumisen vuoksi on yleistä.

Kuva 16 CD19 vs. CD20 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. Kypsät B-solut ilmentävät sekä CD19- että CD20-antigeenia (oranssi). Jotkin neoplastiset B-solut voivat osoittaa pienentynyttä CD19- tai CD20-ilmentymää.

Kuva 17 CD19 vs. CD10 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. B-solut ovat CD19-positiivisia (oranssi). CD10-positiiviset kypsät B-solut jaetaan imusolmukkeiden itukeskuksiin ja pieni myöhäisen vaiheen epäkypsien B-solujen alijoukko näkyy perifeerisen veren ja luuytimen aspiraatioissa.

Kuva 18 CD38 vs. CD10 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. CD38 ilmenee korkeimmalla tasolla plasmasoluissa, kohtalaisella tasolla epäkypsissä B-soluissa ja alhaisella tasolla itukeskusten B-soluissa. Useimmat kypsät B-solut (oranssi) näyttävät pienen tai puuttuvan CD38-ilmentymän. T-solut (punainen) näyttävät vaihtelevan CD38-ilmentymän aktivoitumistilan mukaan.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

11

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

B-soluputki

Kuva 19 CD20 vs. CD10 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. Useimmat kypsät B-solut ilmentävät yhdenmukaisen runsaasti CD20-antigeenia, mutta eivät lainkaan CD10-antigeenia.

Kuva 20 CD19 vs. CD5 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. CD5 ilmenee T-soluissa (punainen, vasen yläkulma), vaihtelevasti matalalla tasolla normaaleiden kypsien B-solujen alijoukossa (oranssi) ja joissakin neoplastisten B-solujen alityypeissä.

Kuva 21 CD20 vs. CD200 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. Useimmat kypsät B-solut (oranssi) ilmentävät CD200-antigeenia matalalla tai kohtalaisella tasolla.

Kuva 22 CD5 vs. CD200 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. Useimmat kypsät B-solut ilmentävät normaalisti CD200-antigeenia, ja alijoukko ilmentää vaihtelevasti CD5-antigeenia. Kroonisessa lymfosyyttileukemiassa / pienilymfosyyttisessa lymfoomassa neoplastiset B-solut ilmentävät tyypillisesti CD5- ja CD200-antigeenia, kun taas manttelisolulymfooma ilmentää tyypillisesti CD5-antigeenia, mutta ei CD200-antigeenia.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

12

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

T-soluputki

Kuva 1: Time (Aika) vs. CD45 -pistekuvaaja on rajoittamaton ja näyttää kaikki peräkkäin kerätyt tapahtumat. Kuvaajan avulla voidaan arvioida nestemäinen perturbaatio näytteen keräämisen aikana. Tapahtumien yhdenmukainen kuvio ajan kuluessa osoittaa stabiilin keräyksen. Stabiilista kuviosta poikkeavat tapahtumat voidaan sulkea pois Time (Aika) -rajauksessa.

Kuva 2: FS INT (FS-INTEGRAALI) vs. FS PEAK (FS-HUIPPU) -pistekuvaaja näyttää Time (Aika) -rajauksen tapahtumat. Kuvaajasta on tarkoituksella jätetty pois solujen dupletit ja kasautumat. Singlettitapahtumat osoittavat lineaarisen INT (INTEGRAALI) vs. PEAK (HUIPPU) -suhteen. Ne sisältyvät Singlets (Singletit) -rajaukseen, mutta dupletit ovat lineaarisen suhteen ulkopuolella.

Kuva 3: Sivusironta vs. suorasironta -pistekuvaaja osoittaa Singlets (Singletit) -rajauksen tapahtumat. Kaavion tarkoituksena on sulkea pois solujäte, joka yleensä pienentää suorasirontaa ja suurentaa sivusirontaa. Varhaiset apoptoottiset solut ovat myös suurentaneet hieman sivusirontaa, kun taas myöhäiset apoptoottiset ja nekroottiset solut on pienentäneet sivusirontaa vaihtelevasti. Elinkelpoiset solut sisältyvät Cells (Solut) -rajaukseen.

Kuva 4: CD45 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaaCells (Solut) -rajauksen tapahtumat. Kuvaajan tarkoituksena on osoittaa eri valkosolutyypit, jotka ovat CD45-positiivisia. CD45-negatiivinen populaatio sisältää yleensä punasoluja, verihiutalekasautumia tai ei-hematopoieettisia soluja.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

13

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

T-soluputki

Kuva 5: CD45 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa CD45+-rajauksen tapahtumat. Pistekuvaajamahdollistaa perifeerisen veren, luuytimen ja imusolmukkeiden näytteistä tyypillisesti löytyvien erilaisten valkosolupopulaatioiden erottamisen, mukaan lukien lymfosyytit (Ly-rajaus, punainen/vaaleansininen), monosyytit (Mo-rajaus, vihreä) ja granulosyytit (Gr-rajaus, sininen). CD45dim (Himmeä CD45) -rajaus (purppura) kattaa alueen, jossa on tyypillisesti myeloblasteja ja epäkypsiä B-soluja. Tällä alueella voi esiintyä myös basofiileja, plasmasytoideja dendriittisoluja, plasmasoluja ja NK- soluja. Eri populaatioita voidaan seurata analysoinnin aikana käyttämällä eri värejä kunkin rajauksen tapahtumiin.

Kuva 6: CD3 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD3+-rajaus tunnistaa solut, joiden pinnassa on CD3-ilmentymä (vaaleansininen). CD3 koskee spesifisesti T-soluja. Sitä ilmenee vain kypsien T-solujen ja myöhemmän vaiheen epäkypsien T-solujen pinnalla. Näillä soluilla on tyypillisesti pieni tai kohtalainen sivusironta.

Kuva 8: CD4 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD4 ilmenee epäkypsien ja kypsien T-solujen alijoukossa korkealla tasolla (vaaleansininen). CD4-antigeenia ilmenee myös monosyyttisissa soluissa (vihreä) alemmalla tasolla kuin CD4-positiivissa T-soluissa.

Kuva 7: TCR γδ vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. TCR γδ on T-solureseptorin alayksikkö ja se ilmenee pienessä sytotoksisten T-solujen alijoukossa. Näillä soluilla on tyypillisesti pieni sivusironta (vaaleansininen).

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

14

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

T-soluputki

Kuva 9: CD2 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD2 on antigeeni, jota ilmentävät lähes kaikki epäkypsät ja kypsät T-solut (vaaleansininen). CD2 ilmenee myös NK-soluissa (punainen, oikea alakulma) ja alhaisella tasolla on monosyyteissä (vihreä).

Kuva 10: CD56 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD56 ilmenee normaalisti merkittävässä NK-solujen alijoukossa (punainen), T-soluissa, jotka toimivat luonnollisina tappajasoluina (NK/T-solut), sekä useissa gamma/delta- T-soluissa (vaaleansininen). CD56-antigeenia ilmenee osittainmyös monosyyttisissa soluissa (vihreä) sekä reaktiivisissa että neoplastisissa olosuhteissa.

Kuva 11: CD5 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD5 ilmenee useimmissa epäkypsissä ja kypsissä T-soluissa (vaaleansininen) ja matalalla tasolla kypsien B-solujen alijoukossa. Hyvin varhaisissa epäkypsissä T-soluissa ja gamma/delta-T-soluissa on tyypillisesti vain pieni CD5-ilmentymä tai sitä ei ole lainkaan. Pieni NK-solujen alijoukko ilmentää CD5-antigeenia.

Kuva 12: CD34 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD34 on varhaisten hematopoieettisten esisolujenmarkkeri. Se ilmenee hematopoieettisissa kantasoluissa, varhaisissa myelooisissa esisoluissa (myeloblasteissa) ja epäkypsissä B- ja T-soluissa (lymfoblasteissa). Kypsät granulosyytit, monosyytit ja lymfosyytit ovat CD34-negatiivisia. CD34-positiivisia esisoluja on normaalisti vähemmän kuin 0,01 % perifeerisen veren valkosoluista.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

15

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

T-soluputki

Kuva 13: CD7 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD7 ilmenee epäkypsissä T-soluissa niiden varhaisimmasta kehitysvaiheesta koko niiden kypsymisen ajan, ja se ilmenee vaihtelevasti kypsissä T-soluissa (vaaleansininen). Se ilmenee yhdenmukaisesti myös NK-soluissa (punainen, oikea alakulma) ja himmeästi plasmasytoidisten dendriittisolujen alijoukossa ja solulinjakohtaisten CD34-positiivisten esisolujen alijoukossa.

Kuva 14: CD8 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD8 ilmenee epäkypsien ja kypsien T-solujen alijoukossa (vaaleansininen) ja se määrittää sytotoksisten kypsien T-solujen populaation. Se ilmenee vaihtelevasti matalla tasolla NK-soluissa ja gamma-delta-T-soluissa.

Kuva 15 CD3 vs. CD56 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. CD3-ilmentymä määrittää T-solut, sillä sitä esiintyy kaikissa kypsissä T-soluissa, ja sitä ei esiinny muissa solulinjoissa. NK-solut eivät itsessään ilmennä pinnallaan CD3-antigeenia, mutta ne ilmentävät CD56-antigeenia merkittävässä alijoukossa (punainen, vasen yläkulma). Kypsien T-solujen pienet alijoukot ilmentävät myös CD56-antigeenia, erityisesti T-solut, jotka toimivat luonnollisina tappajasoluina (NK/T-solut), sekä gamma/delta-T-solut.

Kuva 16CD5 vs. CD3 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. CD3 ja CD5 ilmenevät yhdessä useimmissa kypsissä T-soluissa (vaaleansininen), vaikka pieni sytotoksisten T-solujen alijoukko, joilla on suuri granulaarinen lymfosyyttien morfologia, ilmentää usein CD5-antigeenia heikosti tai ei lainkaan. CD5 ei ilmene useimmissa NK-soluissa.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

16

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

T-soluputki

Kuva 17 CD7 vs. CD2 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. CD2 ja CD7 ilmenevät yhdessä useimmissa kypsissä T-soluissa (vaaleansininen) ja NK-soluissa (punainen, oikea yläkulma).

Kuva 18 CD8 vs. CD4 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. CD3-positiiviset T-solut (vaaleansininen) sisältävät CD4-positiiviset (auttaja) ja CD8-positiiviset (tappaja) alijoukot. CD4-positiivisia T-soluja on yleensä enemmän kuin CD8-positiivisia T-soluja. Perifeerisen veren CD4:CD8-suhde on 1:1–4:1. CD4- ja CD8-kaksoisnegatiivisia ja -kaksoispositiivisia T-soluja esiintyy myös satunnaisesti. Kaksoisnegatiiviset T-solut koostuvat tyypillisesti pääasiassa gamma/delta-T- soluista. Huomaa, että CD4-positiiviset mutta CD3-negatiiviset solut (punainen, keskellä vasemmassa reunassa) ovat lymphocyte (lymfosyytti) -rajaukseen sisältyviä monosyyttejä. Tämä osoittaa, että CD45 vs. sivusironta -rajaus ei yksin mahdollista puhdasta lymfosyyttien tunnistamista.

Kuva 19 CD3 vs. CD4 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. Kaikki CD4-positiiviset T-solut ilmentävät CD3-antigeenia. Monosyytit ja plasmasytoidiset dendriittisolut ilmentävät CD4-antigeenia alemmalla tasolla kuin CD4-positiiviset T-solut. Niillä ei ole CD3-ilmentymää. NK-soluilla ei ole CD3- eikä CD4-ilmentymää.

Kuva 20 CD3 vs. CD8 -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. Kaikki CD8-positiiviset T-solut ilmentävät CD3-antigeenia (vaaleansininen). Pieni NK-solujen alijoukko ilmentää myös CD8-antigeenia (punainen, vasen yläkulma), mutta ei CD3-antigeenia.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

17

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

T-soluputki

Kuva 21 CD3 vs. TCR γδ -pistekuvaaja osoittaa kaikki lymfosyyttirajauksen (Ly) solut. Pieni T-solujen alijoukko ilmentää T-solureseptorin gamma-/deltaketjua, joka ilmenee yhdessäCD3-antigeenin kanssa. CD3-antigeenin ja T-solureseptorin erittäin lineaarinen suhde johtuu niiden esiintymisestä heterodimeerisena kokonaisuutena, jolla on kiinteä 1:1-suhde. Täten toisen ilmentymän kasvu näkyy myös toisen ilmentymän kasvuna.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

18

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M1-soluputki

Kuva 1: Time (Aika) vs. CD45 -pistekuvaaja on rajoittamaton ja näyttää kaikki peräkkäin kerätyt tapahtumat. Kuvaajan avulla voidaan arvioida nestemäinen perturbaatio näytteen keräämisen aikana. Tapahtumien yhdenmukainen kuvio ajan kuluessa osoittaa stabiilin keräyksen. Stabiilista kuviosta poikkeavat tapahtumat voidaan sulkea pois Time (Aika) -rajauksessa.

Kuva 2: FS INT (FS-INTEGRAALI) vs. FS PEAK (FS-HUIPPU) -pistekuvaaja näyttää Time (Aika) -rajauksen tapahtumat. Kuvaajasta on tarkoituksella jätetty pois solujen dupletit ja kasautumat. Singlettitapahtumat osoittavat lineaarisen INT (INTEGRAALI) vs. PEAK (HUIPPU) -suhteen. Ne sisältyvät Singlets (Singletit) -rajaukseen, mutta dupletit ovat lineaarisen suhteen ulkopuolella.

Kuva 3: Sivusironta vs. suorasironta -pistekuvaaja osoittaa Singlets (Singletit) -rajauksen tapahtumat. Kaavion tarkoituksena on sulkea pois solujäte, joka yleensä pienentää suorasirontaa ja suurentaa sivusirontaa. Varhaiset apoptoottiset solut ovat myös suurentaneet hieman sivusirontaa, kun taas myöhäiset apoptoottiset ja nekroottiset solut on pienentäneet sivusirontaa vaihtelevasti. Elinkelpoiset solut sisältyvät Cells (Solut) -rajaukseen.

Kuva 4: CD45 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaaCells (Solut) -rajauksen tapahtumat. Kuvaajan tarkoituksena on osoittaa valkosolujen eri alijoukot, jotka on rajattu CD45-positiivisiksi. CD45-negatiivinen populaatio sisältää yleensä punasoluja, verihiutalekasautumia, kudosjätettä tai ei-hematopoieettisia soluja.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

19

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M1-soluputki

Kuva 5: CD45 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa CD45+-rajauksen tapahtumat. Pistekuvaajamahdollistaa perifeerisen veren, luuytimen ja imusolmukkeiden näytteistä tyypillisesti löytyvien erilaisten valkosolupopulaatioiden erottamisen, mukaan lukien lymfosyytit (Ly-rajaus, punainen), monosyytit (Mo-rajaus, vihreä) ja granulosyytit (Gr-rajaus, sininen). CD45dim (Himmeä CD45) -rajaus (purppura) kattaa alueen, jossa on tyypillisesti myeloblasteja ja epäkypsiä B-soluja. Tällä alueella voi esiintyä myös basofiileja, plasmasytoideja dendriittisoluja, plasmasoluja ja NK-soluja. Eri populaatioita voidaan seurata analysoinnin aikana käyttämällä eri värejä kunkin rajauksen tapahtumiin.

Kuva 6: CD16 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD16 ilmenee korkeimmalla tasolla kypsissä granulosyyteissä (sininen). Useimmat NK-solut ilmentävät CD16-antigeenia (punainen, oikea alakulma), kuten myös aktivoituneiden monosyyttien alijoukko (vihreä).

Kuva 7: CD7 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD7 ilmenee epäkypsissä T-soluissa niiden varhaisimmasta kehitysvaiheesta koko niiden kypsymisen ajan, ja se ilmenee vaihtelevasti kypsissä T-soluissa (punainen, oikea alakulma). Sitä ilmenee myös NK-soluissa ja himmeästi plasmasytoidisten dendriittisolujen alijoukossa ja solulinjakohtaisten esisolujen alijoukossa.

Kuva 8: CD10 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD10 ilmenee epäkypsissä B-soluissa, kypsissä itukeskusten B-soluissa ja kypsissä granulosyyteissä (sininen). Granulosyyteillä on suuri sivusironta, kun taas lymfoidisilla soluilla on pieni sivusironta.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

20

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M1-soluputki

Kuva 9: CD13 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD13 ilmenee kypsyvissä granulosyyteissä (sininen), kypsissä monosyyteissä (vihreä) ja myelooisissa esisoluissa (purppura).

Kuva 10: CD64 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD64 ilmenee korkeimmalla tasolla kypsissä monosyyteissä (vihreä). CD64 ei ilmene hyvin lepotilaisissa kypsissä granulosyyteissä (sininen), mutta sen ilmentymä kasvaa granulosyyttien aktivoituessa. CD64 ei ilmene lymfosyyteissä (punainen) eikä useimmissa CD34-positiivisissa esisoluissa. Aktivoituneet kypsät monosyytit ilmentävät CD64-antigeenia alemmalla tasolla, ja niiden sivusironta on vähäisempää.

Kuva 11: CD34 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD34 on varhaisten hematopoieettisten esisolujen markkeri. Se ilmenee hematopoieettisissa kantasoluissa, varhaisissa myelooisissa esisoluissa (myeloblasteissa) ja epäkypsissä B- ja T-soluissa (lymfoblasteissa). Kypsät granulosyytit, monosyytit ja lymfosyytit ovat CD34-negatiivisia. CD34-positiivisia esisoluja on normaalisti vähemmän kuin 0,01 % perifeerisen veren valkosoluista.

Kuva 12: CD14 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD14 ilmenee korkealla tasolla kypsissä monosyyteissä (vihreä) ja alhaisella tasolla kypsissä granulosyyteissä (sininen). Aktivoituneet kypsät monosyytit ilmentävät CD14-antigeenia alemmalla tasolla, ja niiden sivusironta on vähäisempää.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

21

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M1-soluputki

Kuva 13: HLA-DR vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. HLA-DR ilmenee antigeenia esittelevissä soluissa, kuten monosyyteissä (vihreä) ja plasmasytoidisissa dendriittisoluissa. Sitä ilmeneemyös CD34-positiivissa esisoluissa, epäkypsissä ja kypsissä B-soluissa sekä aktivoituneissa T-soluissa.

Kuva 14: CD11b vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD11b ilmenee granulosyyteissä (sininen) ja monosyyteissä (vihreä). CD11b ilmenee myös NK-soluissa ja basofiileissa.

Kuva 15 CD11b vs. CD16 -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD11b ilmenee monosyyteissä (vihreä), epäkypsissä ja kypsissä granulosyyteissä (sininen) sekä NK- soluissa (punainen). CD16 ilmenee epäkypsissä ja kypsissä granulosyyteissä (sininen) jaNK-solujen alijoukossa (punainen, oikea yläkulma). Aktivoituneet kypsät monosyytit ilmentävät CD16-antigeenia vaihtelevassa määrin, ja ne ovat CD11b-positiivisia.

Kuva 16 CD16 vs. CD13 -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD13 ilmenee granulosyyteissä (sininen), monosyyteissä (vihreä), basofiileissa ja CD34-positiivisissa esisoluissa. CD16 ilmenee kypsyvissä granulosyyteissä (sininen) ja NK-solujen alijoukossa (punainen, oikea alakulma).

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

22

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M1-soluputki

Kuva 17 CD13 vs. CD34 -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD13 ilmenee granulosyyteissä (sininen), monosyyteissä (vihreä), basofiileissa ja CD34- positiivisissa esisoluissa. CD34 ilmenee varhaisissa hematopoieettisissa esisoluissa. Kypsät granulosyytit, monosyytit ja lymfosyytit ovat CD34-negatiivisia.

Kuva 18 CD14 vs. CD64 -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD64 ilmenee korkealla tasollamonosyyteissä (vihreä) ja alemmalla tasolla granulosyyteissä (sininen). CD14 ilmenee korkealla tasolla monosyyteissä ja alemmalla tasolla granulosyyteissä (sininen). Aktivoituneet kypsät monosyytit ilmentävät CD14- ja CD64-antigeenia vaihtelevasti alemmalla tasolla.

Kuva 19 CD14 vs. CD16 -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD14 ilmenee korkealla tasollamonosyyteissä (vihreä) ja alemmalla tasolla granulosyyteissä (sininen, vasen yläkulma). CD16 ilmenee granulosyyteissä ja NK-solujen alijoukossa (punainen, keskellä vasemmassa reunassa). Aktivoituneet kypsät monosyytit ilmentävät CD14- ja CD16-antigeenia vaihtelevasti alemmalla tasolla.

Kuva 20 HLA-DR vs. CD10 -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. HLA-DR ilmenee monosyyteissä (vihreä), B-soluissa, plasmasytoidisissa dendriittisoluissa ja CD34-positiivisissa esisoluissa. CD10 ilmenee kypsissä granulosyyteissä (sininen).

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

23

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M1-soluputki

Kuva 21 CD7 vs. CD13 -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD7 ilmenee T-soluissa ja NK-soluissa (punainen, oikea alakulma). CD13 ilmenee granulosyyteissä (sininen), monosyyteissä (vihreä), basofiileissa ja CD34-positiivisissa esisoluissa. CD13 ja CD7 eivät yleensä ilmene yhdessä.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

24

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M2-soluputki

Kuva 1: Time (Aika) vs. CD45 -pistekuvaaja on rajoittamaton ja näyttää kaikki peräkkäin kerätyt tapahtumat. Kuvaajan avulla voidaan arvioida nestemäinen perturbaatio näytteen keräämisen aikana. Tapahtumien yhdenmukainen kuvio ajan kuluessa osoittaa stabiilin keräyksen. Stabiilista kuviosta poikkeavat tapahtumat voidaan sulkea pois Time (Aika) -rajauksessa.

Kuva 2: FS INT (FS-INTEGRAALI) vs. FS PEAK (FS-HUIPPU) -pistekuvaaja näyttää Time (Aika) -rajauksen tapahtumat. Kuvaajasta on tarkoituksella jätetty pois solujen dupletit ja kasautumat. Singlettitapahtumat osoittavat lineaarisen INT (INTEGRAALI) vs. PEAK (HUIPPU) -suhteen. Ne sisältyvät Singlets (Singletit) -rajaukseen, mutta dupletit ovat lineaarisen suhteen ulkopuolella.

Kuva 3: Sivusironta vs. suorasironta -pistekuvaaja osoittaa Singlets (Singletit) -rajauksen tapahtumat. Kaavion tarkoituksena on sulkea pois solujen debris, joka yleensä pienentää suorasirontaa. Varhaiset apoptoottiset solut ovat myös suurentaneet hieman sivusirontaa, kun taas myöhäiset apoptoottiset ja nekroottiset solut on pienentäneet sivusirontaa vaihtelevasti. Elinkelpoiset solut sisältyvät Cells (Solut) -rajaukseen.

Kuva 4: CD45 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaaCells (Solut) -rajauksen tapahtumat. Kuvaajan tarkoituksena on osoittaa valkosolujen eri alijoukot, jotka on rajattu CD45-positiivisiksi. CD45-negatiivinen populaatio sisältää yleensä punasoluja, verihiutalekasautumia, kudosjätettä tai ei-hematopoieettisia soluja.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

25

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M2-soluputki

Kuva 5: CD45 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa CD45+-rajauksen tapahtumat. Pistekuvaajamahdollistaa perifeerisen veren, luuytimen ja imusolmukkeiden näytteistä tyypillisesti löytyvien erilaisten valkosolupopulaatioiden erottamisen, mukaan lukien lymfosyytit (Ly-rajaus, punainen), monosyytit (Mo-rajaus, vihreä) ja granulosyytit (Gr-rajaus, sininen). CD45dim (Himmeä CD45) -rajaus (purppura) kattaa alueen, jossa on tyypillisesti myeloblasteja ja epäkypsiä B-soluja. Tällä alueella voi esiintyä myös basofiileja, plasmasytoideja dendriittisoluja, plasmasoluja ja NK-soluja. Eri populaatioita voidaan seurata analysoinnin aikana käyttämällä eri värejä kunkin rajauksen tapahtumiin.

Kuva 6: CD15 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD15 ilmenee granulosyyteissä (sininen) ja alemmalla tasolla monosyyteissä (vihreä).

Kuva 7: CD123 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD123 ilmenee korkealla tasolla basofiileissa ja plasmasytoidisissa dendriittisoluissa ja alemmalla tasolla CD34-positiivisissa myelooisissa esisoluissa ja monosyyteissä (vihreä).

Kuva 8: CD117 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD117 ilmenee vaihtelevasti CD34-positiivisissa myelooisissa esisoluissa, varhaisissa promyelosyyteissa, varhaisissa erytroidisissa esiasteissa ja korkealla tasolla syöttösoluissa. CD117 ilmenee myös reaktiivisten NK-solujen alijoukoissa ja neoplastisissa plasmasoluissa. Kypsät granulosyytit, monosyytit ja lymfosyytit ovat CD117-negatiivisia.

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

26

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB

M2-soluputki

Kuva 9: CD13 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD13 ilmenee granulosyyteissä (sininen) ja kypsissämonosyyteissä (vihreä) ja vaihtelevasti myelooisissa esisoluissa.

Kuva 10: CD33 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD33 ilmenee korkealla tasollamonosyyteissä (vihreä) ja alemmalla tasolla granulosyyteissä (sininen). CD33 ilmenee myös basofiileissa, NK-solujen alijoukossa (punainen) ja CD34-positiivisten myelooisten esisolujen alijoukossa.

Kuva 11: CD34 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD34 on varhaisten hematopoieettisten esisolujen markkeri. Se ilmenee tyypillisesti myeloblasteissa, epäkypsissä B- ja T-soluissa (lymfoblasteissa). Kypsät granulosyytit, monosyytit ja lymfosyytit ovat CD34-negatiivisia. CD34-positiivisia esisoluja on normaalisti vähemmän kuin 0,01 % perifeerisen veren valkosoluista.

Kuva 12: CD38 vs. sivusironta -pistekuvaaja osoittaa kaikki elinkelpoiset solut. CD38 on aktivoitumismarkkeri. Se ilmenee korkeimmalla tasolla plasmasoluissa, kohtalaisella tasolla epäkypsissä myelooisissa ja lymfoidisissa esisoluissa, alhaisella tasolla monosyyteissä (vihreä) ja vaihtelevasti matalalla tasolla aktivoituneissa kypsissä lymfosyyteissa (punainen).

Sisällysluettelo > Ei immunofenotyypin poikkeavuutta > Tapaus 1: Normaali kokoveri

Jokainen tapahtuma on merkitsevä

27

Beckman Coulter • ClearLLab 10C -paneelit • C33375 AB