Diagnóstico microbiológico

Espectro clínico y patológico de la legionelosis   597

el medio aporta los nutrientes necesarios. El carbón activado elimina los radicales de oxígeno producidos por la exposición a muchos medios a la luz. 80 El amortiguador ( buffer ) de ácido N -(2-acetamido)-aminoetanesulfónico (ACES) tiene un p K de 6.9, óptimo para el crecimiento de las especies de Legionella . La adición del amortiguador ACES y α-cetoglutarato produce un agar amortiguado con carbón y extracto de levadura (BCYE, buffered charcoal yeast extract ). 41 El crecimiento en agar BCYE sin desarrollo en agar san- gre es uno de los indicios presuntivos más útiles de que una cepa podría ser una especie de Legionella . Francisella tularensis es otro microorganismo gramnegativo que también crece en BCYE, pero no así en agar sangre. A diferencia de las espe- cies de Francisella , las cuales producen ácido a partir de hi- dratos de carbono, las de Legionella no fermentan ni oxidan estos compuestos. Ciertos bacilos esporulados termófilos y Bordetella pertussis también pueden crecer en agar BCYE; las diferencias en morfología, características serológicas y ácidos grasos celulares ayudan a diferenciarlos. Las especies de Le- gionella sintetizan ácidos grasos ramificados en sus paredes celulares. 173 La mayoría de las especies son catalasa positi- vas y peroxidasa positivas débiles. La prueba de hidrólisis de hipurato de sodio, la cual es positiva para L. pneumophila y negativa para la mayoría de las otras especies de Legionella ais- ladas a partir de muestras clínicas, ofrece un procedimiento presuntivo útil para la diferenciación entre L. pneumophila y otras especies de Legionella . La caracterización fenotípica de las cepas de Legionella utilizando pruebas bioquímicas tiene un valor limitado para la identificación presuntiva de especies. Sin embargo, la serotipificación de cepas mediante pruebas de anticuerpos inmunofluorescentes es un método práctico para diferenciar presuntivamente las especies de Legionella . La iden- tificación definitiva de estas especies puede requerir estudios de ácidos nucleicos y otros procedimientos quimiotaxonómi- cos de referencia. 49,147 La enfermedad de los legionarios puede presentarse tanto de manera esporádica en forma de neumonía adquirida en la co- munidad, como de manera epidémica. 23,57,56 Además de la en- fermedad de los legionarios, hay una variante leve denominada fiebre de Pontiac . 72 La enfermedad también puede involucrar regiones anatómicas extratorácicas. Por lo tanto, en este capí- tulo se utiliza el término legionelosis , que incluye la enfermedad de los legionarios, la fiebre de Pontiac y la afectación extrapul- monar de las especies de Legionella , para referirse a cualquier infección causada por bacterias de la familia Legionellaceae . Alrededor del 85% de los casos documentados de legionelosis fueron causados por L. pneumophila . Los serogrupos 1 y 6 de L. pneumophila representan el 75% de los casos informados de le- gionelosis. 127 Además de L. pneumophila , se han aislado mu- chas otras especies a partir de muestras clínicas obtenidas de humanos (tabla 10-1). Un estudio de vigilancia internacional de casos de infección confirmados con cultivo reveló que las es- pecies más frecuentes distintas a L. pneumophila fueron L. lon- gbeachae y L. boemanii . 174 L. micdadei 92,36 y L. dumoffii 1 56,85 también han sido responsables de casos de enfermedad espo- rádica y epidémica en algunos lugares. Existen numerosas es- pecies o serogrupos en sistemas acuáticos, ya sea ambientales o Espectro clínico y patológico de la legionelosis

TABLA 10-1  Especies del género Legionella (cantidad de serogrupos)

Especies aisladas de humanos y del ambiente

Especies aisladas únicamente del ambiente

L. anisa

L. adelaidensis L. beliardensis L. brunensis L. busanensis L. drancourtii L. drozanskii L. fairfieldensis L. geestiana L. gratiana L. gresilensis L. israelensis L. cherrii L. fallonii

L. bozemanii (2)

L. birminghamensis L. cincinnatiensis

L. dumoffii L. erythra (2) L. feelei (2) L. gormanii L. hackeliae (2)

L. jordanis

L. lansingensis

L. longbeachae (2)

L. londiniensis

L. lytica

L. jamestowniensis

L. maceachernii

L. moravica L. nautarum

L. micdadei

L. pittsburghensis a L. quateirensis L. quinlivanii (2) L. rowbothamii L. rubrilucensa L. shakespearei

L. oakridgensis L. parisiensis

L. pneumophila-pneumophila (15)

L. pneumophila-fraseri L. pneumophila-pascullei

L. santicrucis

L. sainthelensi (2) L. tucsonensis L. wadsworthii

L. spiritensis L. steigerwaltii L. taurinensis L. waltersii a L. worsleiensis

el procedimiento de Gram da lugar a una mejor tinción de las especies de Legionella y de otros numerosos bacilos gramnega- tivos que se tiñen poco. A excepción de tres especies que son inmóviles ( L. oakrid- gensis , L. nautarum y L. londinensis ), el resto de las especies de Legionella se mueven mediante uno o más flagelos polares o sub- polares. 173 Las legionelas son aerobias y tienen requerimientos nutricionales especiales. Necesitan l-cisteína y sales de hierro para crecer. R. E. Weaver cultivó por primera vez L. pneumo- phila en agar de Müeller-Hinton complementado con IsoVitalex® al 1% y hemoglobina al 1%. Las cepas pueden crecer de forma muy lenta en agar chocolate, el cual también se utiliza para el aislamiento de gonococos. 38 El medio de crecimiento óptimo es una variación de agar carbón y extracto de levadura que de- sarrolló el difunto James Feeley. 58 El extracto de levadura en a La patogenia de este microorganismo en humanos no es clara. AMPLE