ClearLLab 10C - NO - norvégienne versjon

CE-ANTISTOFFKOMBINASJONER FOR LEUKEMI-/LYMFOM*-ANALYSE C LEAR LL AB 10C - P ANELER

CASEDOKUMENT

Hver hendelse teller * Bare non-Hodgkins-lymfom

1

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

INNHOLDSFORTEGNELSE

INNLEDNING...................................................................................3 BAKGRUNN.....................................................................................3 KONSENSUSANBEFALINGER FOR IMMUNFENOTYPING...........................................................4 TILTENKT BRUK AV CLEARLLAB 10C-PANELER.................4 CLEARLLAB 10C-PANELER........................................................4 CLEARLLAB KOMPENSASJONSSETT.....................................5 CASEVALG OG -TOLKNING........................................................5 RELATERTE DOKUMENTER.......................................................6 REFERANSER.................................................................................6 CASER..............................................................................................7 INGEN IMMUNFENOTYPISK ABNORMITET...........................7 PERIFERT FULLBLOD................................................................7 Case nr. 1: Normalt fullblod.................................................. 7 BEINMARG................................................................................... 32 Case nr. 2: Normal beinmarg........................................... 32 LYMFEKNUTE.............................................................................. 56 Case nr. 3: Normal lymfeknute....................................... 56 NEOPLASTISK PROSESS AV B-CELLEOPPRINNELSE............................................................ 80 B-LYMFOBLASTISK LEUKEMI / LYMFOBLASTISK LYMFOM...................................................80 Case nr. 4: B-akutt lymfoblastisk leukemi / lymfoblastisk lymfom..........................................................80 B-LYMFOBLASTISK LEUKEMI / LYMFOBLASTISK LYMFOM................................................. 105 Case nr. 5: B-akutt lymfoblastisk leukemi / lymfoblastisk lymfom........................................................ 105 KRONISK LYMFOCYTTISK LEUKEMI / SMÅCELLET LYMFOCYTTISK LYMFOM........................ 130 Case nr. 6: Kronisk lymfocyttisk leukemi / småcellet lymfocyttisk lymfom.................................... 130 KRONISK LYMFOCYTTISK LEUKEMI / SMÅCELLET LYMFOCYTTISK LYMFOM.........................154 Case nr. 7: Kronisk lymfocyttisk leukemi / småcellet lymfocyttisk lymfom.....................................154 MANTELCELLELYMFOM.......................................................178 Case nr. 8: Mantelcellelymfom.......................................178 PLASMACELLEMYELOM......................................................202 Case nr. 9: Plasmacellemyelom................................... 202

FOLLIKULÆRT LYMFOM......................................................226 Case nr. 10: Follikulært lymfom....................................226 B-CELLELYMFOM AV GERMINALT SENTER-OPPRINNELSE...................................................... 250 Case nr. 11: B-cellelymfom av germinalt senter-opprinnelse............................................................. 250 MODENT B-CELLELYMFOM............................................... 274 Case nr. 12: Modent B-cellelymfom............................274 MODENT B-CELLELYMFOM...............................................298 Case nr. 13: Modent B-cellelymfom............................298 NEOPLASTISK PROSESS AV T-CELLEOPPRINNELSE........................................................... 322 T-LYMFOBLASTISK LEUKEMI / LYMFOBLASTISK LYMFOM.................................................322 Case nr. 14: T-lymfoblastisk leukemi / T-lymfoblastisk lymfom....................................................322 T-LYMFOBLASTISK LEUKEMI / LYMFOBLASTISK LYMFOM................................................ 346 Case nr. 15: T-lymfoblastisk leukemi / T-lymfoblastisk lymfom................................................... 346 T-STORCELLET GRANULÆRT LYMFOM.......................370 Case nr. 16: T-cellet lymfoproliferativ sykdom......370 T-STORCELLET GRANULÆRT LYMFOM...................... 394 Case nr. 17: T-cellet lymfoproliferativ sykdom..... 394 NEOPLASTISK PROSESS AV MYELOID OPPRINNELSE.........................................................418 AKUTT MYELOID LEUKEMI.................................................418 Case nr. 18: Akutt myeloid leukemi..............................418 AKUTT MYELOID LEUKEMI............................................... 442 Case nr. 19: Akutt monocyttisk leukemi.................. 442 AKUTT MYELOID LEUKEMI............................................... 466 Case nr. 20: Akutt myeloid leukemi-NOS..............466 AKUTT MYELOID LEUKEMI...............................................490 Case nr. 21: Akutt promyeolocyttisk leukemi.......490 AKUTT MYELOID LEUKEMI.................................................514 Case nr. 22: Akutt monocyttisk leukemi...................514 MYELODYSPLASTISK SYNDROM....................................538 Case nr. 23: Myelodysplastisk syndrom...................538 MYELODYSPLASTISK SYNDROM....................................562 Case nr. 24: Myelodysplastisk syndrom...................562

Hver hendelse teller

2

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

INNLEDNING Dette casedokument er utarbeidet som hjelp for analyse av flowcytometriske immunfenotypingsdata generert ved hjelp av CE-IVD-merket reagens fra Beckman Coulters ClearLLab 10C-paneler for leukemi- og lymfomanalyse på Beckman Coulters Navios- og Navios EX-flowcytometere. Prøvecaser med karakteristiske funn typisk for forskjellige lymfoide og myeloide neoplasmer er inkludert, og også caser fra pasienter med kliniske funn og/eller laboratoriefunn som antyder en underliggende neoplastisk prosess, men der ingen immunfenotypisk abnormitet er identifisert. Prøvetyper omfatter perifert fullblod, benmarg og lymfeknuter. Hver case omfatter en klinisk vignett som beskriver pasientdemografi og klinisk historie, casespesifikke datafiler i listemodus for reanalyse av brukeren av dette casedokumentet, ClearLLab 10C-spesifikke analyseprotokoller som skal brukes med dataene i listemodus og en rapport som viser analysen med leverte protokoller. Hver rapport omfatter analysenotater som fremhever de immunfenotype funnene, samt potensielle fallgruver. MERK: Eksempler i casedokumentet er kun ment som illustrasjon, og det kan hende at ikke alle kategorier av hematolymfoide neoplasmer er representert, og heller ikke alle mulige immunfenotypiske varianter beskrives eller demonstreres. BAKGRUNN Flowcytometrisk immunfenotyping evaluerer nærvær og fravær av spesifikke antigener for hver individuell celle som finnes i prøven. Samlet sett genererer disse resultatene en immunfenotypisk profil for hver celle som er enten i samsvar med en forventet populasjon (dvs. normal) eller i uoverensstemmelse med en forventet populasjon (dvs. avvikende) for den prøvetypen. Ved evaluering av prøver fra pasienter med mistenkte hematolymfoide ondartetheter er flere trinn involvert 1 :

• Vurdering av alle cellepopulasjonene i prøven.

• Tilordning av hver cellepopulasjon til enten «normal» eller «avvikende».

• Detaljert karakterisering av den avvikende populasjonen ifølge nærvær eller fravær av antigener, så vel som økt eller redusert intensitet av farging ved fluorokrommerkede antistoffer. • Tolking av den avvikende immunfenotypen, som der det er tilgjengelig omfatter tilleggsinformasjon f.eks. klinisk historie, histologi, cytologi, immunhistokjemi og genotypingstudier, f.eks. hybridisering, karyotyping og molekylær diagnostikk på stedet.

Hver hendelse teller

3

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

KONSENSUSANBEFALINGER FOR IMMUNFENOTYPING Konsensusanbefalinger for flowcytometrisk immunfenotyping av prøver fra pasienter med kjente eller mistenkte hematolymfoide ondartetheter har oppstått de siste to tiårene, og flere retningslinjer har blitt publisert i den vitenskapelige litteraturen. Flowcytometrisk immunfenotyping har blitt inkludert i WHOs klassifisering av svulster av hematopoetisk og lymfoid vev siden 2008 2 . Medisinske indikasjoner og flowcytometrisk analysevalidering, herunder preanalytiske, analytiske og postanalytiske detaljer om testing diskuteres i anbefalingene fra Bethesda International Consensus Conference fra 2006 3,4,5 og de praktiske retningslinjene fra ICSH/ICCS for cellebaserte fluorescensanalyser 6,7,8 . TILTENKT BRUK AV ClearLLab 10C-PANELER ClearLLab 10C-panelene er ment for in vitro-diagnostisk bruk for kvalitativ identifisering av cellepopulasjoner ved immunfenotyping med flere parametere på Navios- og Navios EX-flowcytometerne. Disse reagensene brukes som et hjelpemiddel i differensialdiagnosen av hematologisk unormale pasienter som har, eller mistenkes å ha, følgende hematopoietiske neoplasmer: kronisk leukemi, akutt leukemi, non-Hodgkins lymfom, myelom, myelodysplastisk syndrom (MDS) og/eller myeloproliferative neoplasmer (MPN). Reagensene kan brukes med perifert fullblod (samlet inn i K 2 EDTA, syresitratdekstrose (ACD) eller heparin), beinmarg (samlet inn i K 2 EDTA, ACD eller heparin) og lymfeknuteprøver. Tolkning av resultatene skal bekreftes av en patolog eller tilsvarende fagperson sammen med andre kliniske funn og laboratoriefunn.

Disse reagensene gir kvalitative resultater med flere parameterne for overflateantigener som er oppgitt nedenfor:

ClearLLab 10C-paneler

Blå laser

Rød laser

Fiolett laser

APC- A750 PB KRO

Art.nr.

Rør

FITC PE ECD PC5.5 PC7 APC APC- A700

B96805 B-cellerør

Kappa Lambda CD10 CD5 CD200 CD34 CD38 CD20 CD19 CD45

B96806 T-cellerør

CD4

CD2 CD56 CD5 CD34 CD7

CD8

CD3 CD45

TCR γδ

B96807 M1-cellerør

CD16

CD7

CD10 CD13 CD64 CD34 CD14 HLA-DR CD11b CD45

B96808 M2-cellerør

CD15

CD123 CD117 CD13 CD33 CD34 CD38 HLA-DR CD19 CD45

Hver hendelse teller

4

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

ClearLLab KOMPENSASJONSSETT

Blå laser

Rød laser

Fiolett laser

APC- A750 PB KRO

Art.nr.

FITC

PE

ECD PC5.5

PC7

APC APC- A700

B74074

CD4

CD4

CD3

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD8

Ovenstående reagens leveres i et standardisert format som skal brukes med reagenser for prøveklargjøring og cytometeroppsett, sammen med programvare for dataregistrering og analyse. ClearLLab 10C-paneler oppfyller anbefalinger for standardisering som beskrevet i Bethesda-retningslinjene 2 . Tilleggsinformasjon vedrørende ClearLLab 10C-paneler er tilgjengelig på beckman.com/ClearLLab . CASEVALG OG -TOLKNING

Dataene presentert i dette casedokumentet ble generert etter prosedyren beskrevet i ClearLLab 10C Panel Instructions For Use (IFU) (Bruksanvisning for ClearLLab 10C-paneler) som finnes på beckman.com .

Representative caser ble valgt fra kliniske studiedata og ble gjennomgått, kommentert og tolket av:

Brent Wood MD PhD Professor, Laboratory Medicine and Pathology Division Head, Hematopathology Director, Hematopathology Laboratory and SCCA Pathology Medical Director, SCCA Laboratories University of Washington, Seattle, WA, USA

Xueyan Chen, MD, PhD Assistant Professor, Laboratory Medicine Associate Director, Hematopathology Laboratory University of Washington, Seattle, WA

Yi Zhou, MD PhD Assistant Professor

Department of Laboratory Medicine University of Washington, Seattle, WA

Analyseprotokoller: Last ned ClearLLab 10C-analyseprotokollen. Analyse: Last ned casespesifikke Kaluza C-analysefiler.

Hver hendelse teller

5

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

RELATERTE DOKUMENTER

REFERANSER 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms. F.E. Craig, K.A. Foon. Blood. 2008; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Swerdlow SH, et al. Blood. 2016;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Arber DA, et al. Blood 2016 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia. Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications. Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S5-13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia. Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues. Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):291-308. doi: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations. Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):309-14. doi: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria. Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):315-23. doi: 10.1002/cyto.b.2110 • ClearLLab 10C Application System Guide (Systemveiledning for ClearLLab 10C), art.nr. C28530AA • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use (Bruksanvisning for Kaluza C flowcytometriprogramvare), art.nr. C20164 • Navios Flow Cytometer Instructions For Use (Bruksanvisning for Navios flowcytometer), art.nr. 774538AG • Navios EX Flow Cytometer Instructions For Use (Bruksanvsining for Navios EX flowcytometer), art.nr. B77122AB • ClearLLab 10C Panels Instructions For Use (Bruksanvisning for ClearLLab 10C), art.nr. C00197 • ClearLLab Compensation Beads Instructions For Use (Bruksanvisning for ClearLLab Compensation Beads), art. nr. C00201 • ClearLLab Compensation Kit Instructions For Use (Bruksanvisning for ClearLLab kompensasjonssett), art.nr. B74074 • ClearLLab Control Cells Instructions For use (Bruksanvisning for ClearLLab Control Cells), art.nr. B99884 • ClearLLab Control Cells QC Analysis Protocols Download Addendum (Nedlastbart tillegg til ClearLLab Control Cells kvalitetskontrollprotokoller), art.nr. C33272AA

Hver hendelse teller

6

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

CASER

Følgende fargeprioritetsgating brukes på casene:

Lymfocytter (Gate Ly)/NK-celler: rød CD19+ B-celler: oransje CD3+ T-celler: aqua

Monocytter (Gate Mo): grønn

CD45dim: lilla Ytterligere avvikende populasjoner: teal CD45-negativ populasjon: grå

Granulocytter (Gate Gr): blå

INGEN IMMUNFENOTYPISK ABNORMITET Flowcytometri er en måte å karakterisere leukocyttpopulasjoner på. Det kan brukes som et hjelpemiddel i differensialdiagnose av hematologisk unormale pasienter som har, eller mistenkes å ha, hematopoietisk neoplasi, herunder kronisk leukemi, akutt leukemi, non-Hodgkins-lymfom, myelom, myelodysplastisk syndrom (MDS) og/eller myeloproliferative neoplasmer (MPN). Avgjørende for identifiseringen av avvikende populasjoner i disse kliniske situasjonene er kjennskap til normale cellepopulasjoner som finnes i fullblods-, benmargs- og lymfeknutevevsprøver. Følgende er eksempler på normale prøver farget med ClearLLab 10C-paneler.

PERIFERT FULLBLOD Case nr. 1: Normalt fullblod

Klinisk vignett

Denne 65 år gamlemannen har fått trombocytopeni. En perifert fullblod-prøve sendes til flowcytometrisk immunfenotyping ved hjelp av ClearLLab 10C-paneler.

Flowcytometrisk immunfenotyping

B-cellerør

Figur 1: Dette punktplottet Time (Tid) kontra CD45 er ikke-gatet og viser alle hendelser samlet inn suksessivt. Dette plottet er ment å evaluere for fluidisk perturbasjon under prøvetaking. Stabil registrering representeres av et ensartet mønster av hendelser over tid. Hendelser som avviker fra det stabile mønsteret, kan utelukkes i gaten Time (Tid).

Figur 2: Dette punktplottet FS INT kontra FS PEAK viser hendelser i gaten Time (Tid). Dette plottet erment å utelukke celledubletter eller -aggregater. Singletthendelser viser et lineært forhold for INT kontra PEAK og er inkludert i gaten Singlets (Singletter), mens dubletter ligger utenfor det lineære forholdet.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

7

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

B-cellerør

Figur 3: Dette punktplottet Side Scatter (Sidespredning) kontra Forward Scatter (Foroverspredning) viser hendelser i gaten Singlets (Singletter). Dette plottet er ment å utelukke celledebris, som vanligvis har redusert foroverspredning. Tidlige apoptotiske celler har også mildt økt sidespredning, mens sene apoptotiske og nekrotiske celler har variabelt redusert sidespredning. Levedyktige celler er inkludert i gaten Cells (Celler).

Figur 4: Dette punktplottet CD45 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten Cells (Celler). Dette plottet er ment å fremheve forskjellige delsett av hvite blodlegemer, som er gatet som CD45-positive. Den CD45-negative populasjonen omfatter vanligvis røde blodceller, blodplateaggregater, vevsdebris eller ikke- hematopoietiske celler.

Figur 5: Dette punktplottet CD45 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten CD45+ (CD45+). Dette punktplottet tillater skille av flere hvitcellepopulasjoner somtypisk finnes i perifert blod, beinmarg og lymfeknuteprøver, herunder lymfocytter (Gate Ly, røde/oransje), monocytter (Gate Mo, grønne), og granulocytter (Gate Gr, blå). Gaten CD45dim (CD45-svak) (lilla) dekker området typisk opptatt av tidlige progenitorer, dvs. myeloblaster og umodne B-celler. Basofiler, plasmacytoide dendrittiske celler, plasmaceller og NK-celler kan også vises i dette området. Ved å bruke forskjellige farger på hendelsene omfattet av hver gate, kan de forskjellige populasjonene identifiseres gjennom hele analysen.

Figur 6: Dette punktplottet CD19 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten Cells (Celler). Gaten CD19+ (CD19+) identifiserer CD19-positive celler. CD19 uttrykkes på modne og umodne B-celler, så vel som de fleste plasmaceller. Disse cellene har typisk lav til moderat sidespredning.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

8

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

B-cellerør

Figur 7: Dette punktplottet Kappa kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. Overflate-kappa-lettkjede uttrykkes på modne B-celler (oransje) og umodne B-celler i sen fase. Andelen av kappa-positive B-celler er normalt større enn kappa-negative (lambda-positive) B-celler. Synlig kappa-positivitet observeres påmonocytter (grønne) på grunn av Fc-reseptormediert binding av immunglobulin. Kappa-lettkjede-positive celler er vist på høyre side av plottet.

Figur 8: Dette punktplottet Lambda kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. Overflate-lambda-lettkjede uttrykkes på modne B-celler (oransje) og umodne B-celler i sen fase. Andelen av lambda-positive B-celler er normalt mindre enn lambda-negative (kappa-positive) B-celler. Synlig lambda-positivitet observeres på monocytter (grønne) på grunn av Fc-reseptormediert binding av immunglobulin. De lambda-lettkjede-positive cellene vises på høyre side av plottet.

Figur 9: Dette punktplottet CD10 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD10 uttrykkes på umodne B-celler, modne B-celler i germinalt senter og modne granulocytter (blå). Granulocyttene har høy sidespredning, i motsetning til lymfoide celler som har lav sidespredning.

Figur 10: Dette punktplottet CD5 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD5 uttrykkes på umodne og modne T-celler (rød, nedre høyre), samt svakt i et delsett av modne B-celler (oransje). Disse lymfoide cellene har typisk lav sidespredning.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

9

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

B-cellerør

Figur 11: Dette punktplottet CD200 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD200 uttrykkes typisk på B-celler, men er negativ i noen neoplastiske B-celler. Det er spesielt nyttig for å skille mantelcellelymfom (vanligvis CD200-negativ) fra kronisk lymfocyttisk leukemi / småcellet lymfocyttisk lymfom (vanligvis CD200-positiv).

Figur 12: Dette punktplottet CD34 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD34 er en markør av tidlige hematopoietiske progenitorer. Det uttrykkes på hematopoietiske stamceller, tidligemyeloide progenitorer (myeloblaster) og umodne B- og T-celler (lymfoblaster). Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34. CD34-positive progenitorer representerer normalt mindre enn 0,01 % av de hvite cellene i perifert blod.

Figur 13: Dette punktplottet CD38 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD38 er en aktiveringsmarkør. Det uttrykkes ved det høyeste nivået på plasmaceller, ved et moderat nivå på umodne myeloide og lymfoide progenitorer, ved et lavt nivå på monocytter (grønne) og ved et variabelt nivå på aktiverte modne lymfocytter.

Figur 14: Dette punktplottet CD20 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD20 uttrykkes på modne B-celler (oransje) og ved et variabelt lavt nivå på et delsett av modne T-celler. Det uttrykkes variabelt på umodne B-celler i senere fase. CD20-positive celler er vanligvis i gaten lymphocyte (lymfocytt) med lav sidespredning.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

10

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

B-cellerør

Figur 15. Dette punktplottet Lambda kontra Kappa viser alle CD19+-celler. De tidlige umodne B-cellene (lilla) uttrykker ikke overflate-immunglobulin-lettkjeder, dvs. negative for enten kappa- eller lambda-lettkjede. De modne B-cellene er polyklonale og uttrykker enten kappa- eller lambda-lettkjede. Det normale kappa/ lambda-forholdet er 1,4 med et område mellom 1 til 2. Økt bakgrunn på grunn av forbundet plasmaimmunglobulin er vanlig.

Figur 16. Dette punktplottet CD19 kontra CD20 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). Modne B-celler uttrykker både CD19 og CD20 (oransje). Noen neoplastiske B-celler kan vise redusert CD19- eller CD20-uttrykk.

Figur 17. Dette punktplottet CD19 kontra CD10 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). B-celler er CD19-positive (oransje). CD10-positive modne B-celler distribueres i germinale sentre i lymfeknuter, og et lite delsett av umodne B-celler i sen fase er til stede i perifert blod og beinmargaspirater.

Figur 18. Dette punktplottet CD38 kontra CD10 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). CD38 uttrykkes ved det høyeste nivået på plasmaceller, ved et moderat nivå på umodne B-celler og ved et lavt nivå på B-celler i germinalt senter. De fleste modne B-celler (oransje) viser lavt til fraværende uttrykk av CD38. T-celler (røde) viser variabelt CD38-uttrykk avhengig av aktiveringstilstand.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

11

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

B-cellerør

Figur 19. Dette punktplottet CD20 kontra CD10 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). De fleste modne B-celler uttrykker ensartet CD20 på høyt nivå uten CD10.

Figur 20. Dette punktplottet CD19 kontra CD5 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). CD5 uttrykkes på T-celler (røde, øvre venstre), uttrykkes variabelt ved et lavt nivå på et delsett av normale modne B-celler (oransje) og uttrykkes på noen undertyper av neoplastiske B-celler.

Figur 21. Dette punktplottet CD20 kontra CD200 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). De fleste modne B-celler (oransje) uttrykker CD200 ved et lavt til moderat nivå.

Figur 22. Dette punktplottet CD5 kontra CD200 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). De fleste modne B-celler uttrykker normalt CD200, mens et delsett uttrykker variabelt CD5. NeoplastiskeB-celler i kronisk lymfocyttisk leukemi / småcellet lymfocyttisk lymfom uttrykker typisk CD5 og CD200, mens mantelcellelymfom typisk uttrykker CD5, men ikke CD200.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

12

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

T-cellerør

Figur 1: Dette punktplottet Time (Tid) kontra CD45 er ikke-gatet og viser alle hendelser samlet inn suksessivt. Dette plottet er ment å evaluere for fluidisk perturbasjon under prøvetaking. Stabil registrering representeres av et ensartet mønster av hendelser over tid. Hendelser som avviker fra det stabile mønsteret, kan utelukkes i gaten Time (Tid).

Figur 2: Dette punktplottet FS INT kontra FS PEAK viser hendelser i gaten Time (Tid). Dette plottet erment å utelukke celledubletter eller -aggregater. Singletthendelser viser et lineært forhold for INT kontra PEAK og er inkludert i gaten Singlets (Singletter), mens dubletter ligger utenfor det lineære forholdet.

Figur 3: Dette punktplottet Side Scatter (Sidespredning) kontra Forward Scatter (Foroverspredning) viser hendelser i gaten Singlets (Singletter). Dette plottet er ment å utelukke celledebris, som vanligvis har redusert foroverspredning med økt sidespredning. Tidlige apoptotiske celler har ogsåmildt økt sidespredning, mens sene apoptotiske og nekrotiske celler har variabelt redusert sidespredning. Levedyktige celler er inkludert i gaten Cells (Celler).

Figur 4: Dette punktplottet CD45 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten Cells (Celler). Dette plottet er ment å fremheve forskjellige typer hvite blodlegemer, som er CD45-positive. Den CD45-negative populasjonen omfatter vanligvis røde blodceller, blodplateaggregater eller ikke-hematopoietiske celler.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

13

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

T-cellerør

Figur 5: Dette punktplottet CD45 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten CD45+ (CD45+). Dette punktplottet tillater skille av flere hvitcellepopulasjoner somtypisk finnes i perifert blod, beinmarg og lymfeknuteprøver, herunder lymfocytter (Gate Ly, røde/aqua), monocytter (Gate Mo, grønne), og granulocytter (Gate Gr, blå). Gaten CD45dim (CD45-svak) (lilla) dekker området typisk opptatt av myeloblaster og umodne B-celler. Basofiler, plasmacytoide dendrittiske celler, plasmaceller og NK-celler kan også falle inn i dette området. Ved å bruke forskjellige farger på hendelsene omfattet av hver gate kan de forskjellige populasjonene følges gjennom hele analysen.

Figur 6: Dette punktplottet CD3 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. Gaten CD3+ (CD3+) identifiserer celler med overflate-CD3- uttrykk (aqua). CD3 er svært spesifikk for T-celler og uttrykkes bare på overflaten av modne T-celler og umodne T-celler i senere fase. Disse cellene har typisk lav til moderat sidespredning.

Figur 8: Dette punktplottet CD4 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD4 uttrykkes på et delsett av umodne og modne T-celler ved et høyt nivå (aqua). CD4 uttrykkes også på monocyttiske celler (grønne) ved et nivå lavere enn CD4-positive T-celler.

Figur 7: Dette punktplottet TCR γδ kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. TCR γδ er en underenhet av T-celle-reseptor og uttrykkes på et lite delsett av cytotoksiske T-celler. Disse cellene har typisk lav sidespredning (aqua).

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

14

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

T-cellerør

Figur 9: Dette punktplottet CD2 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD2 er et antigen uttrykt av nesten alle umodne og modne T-celler (aqua). CD2 uttrykkes også på NK-celler (røde, nedre høyre) og ved et lavt nivå på monocytter (grønne).

Figur 10: Dette punktplottet CD56 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD56 uttrykkes normalt på et viktig delsett av NK-celler (røde), T-celler med naturlig drapsaktivitet (NK/T-celler) og mange gamma/delta-T-celler (aqua). CD56 uttrykkes også delvis på monocyttiske celler (grønne) under både reaktive og neoplastiske betingelser.

Figur 11: Dette punktplottet CD5 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD5 uttrykkes på de fleste umodne og modne T-celler (aqua) og ved et lavt nivå på et delsett av modne B-celler. Svært tidlige umodne T-celler og gamma/delta-T-celler har typisk lite til ikke noe CD5-uttrykk. Et lite delsett av NK-celler uttrykker CD5.

Figur 12: Dette punktplottet CD34 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD34 er en markør av tidlige hematopoietiske progenitorer. Det uttrykkes på hematopoietiske stamceller, tidligemyeloide progenitorer (myeloblaster) og umodne B- og T-celler (lymfoblaster). Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34. CD34-positive progenitorer representerer normalt mindre enn 0,01 % av de hvite cellene i perifert blod.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

15

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

T-cellerør

Figur 13: Dette punktplottet CD7 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD7 uttrykkes på umodne T-celler ved den tidligste fasen av T-celleutvikling og vedvarer gjennom hele T-cellemodning for å uttrykkes variabelt på modne T-celler (aqua). Det uttrykkes også ensartet på NK-celler (røde, nedre høyre) og uttrykkes svakt på et delsett av plasmacytoide dendrittiske celler og et delsett av de seriebundne CD34-positive progenitorene.

Figur 14: Dette punktplottet CD8 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD8 uttrykkes på et delsett av umodne ogmodne T-celler (aqua) og definerer den cytotoksiske modne T-cellepopulasjonen. Det uttrykkes variabelt ved et lavt nivå på NK-celler og gamma-delta-T-celler.

Figur 15. Dette punktplottet CD3 kontra CD56 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). T-celler defineres av CD3-uttrykk, siden det er til stede på alle modne T-celler og uttrykkes ikke av celler av andre serier. NK-celler uttrykker per definisjon ikke overflate-CD3, men uttrykker CD56 på et viktig delsett (røde, øvre venstre). Små delsett av modne T-celler uttrykker også CD56, særlig T-celler med naturlig drapsaktivitet (NK/T-celler) og gamma-delta-T-celler.

Figur 16. Dette punktplottet CD5 kontra CD3 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). CD3 og CD5 uttrykkes samtidig på de fleste modne T-celler (aqua), selv om et lite delsett av cytotoksiske T-celler som har en storcellet granulær lymfocyttmorfologi, ofte viser redusert til fraværende uttrykk av CD5. CD5 uttrykkes ikke på de fleste NK-celler.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

16

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

T-cellerør

Figur 17. Dette punktplottet CD7 kontra CD2 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). CD2 og CD7 uttrykkes samtidig på de fleste av modne T-celler (aqua) og NK-celler (røde, øvre høyre).

Figur 18. Dette punktplottet CD8 kontra CD4 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). CD3-positive T-celler (aqua) inneholder CD4-positive (hjelper) og CD8-positive (cytotoksiske) delsett. CD4-positive T-celler er vanligvis flere enn CD8-positive T-celler med et CD4:CD8-forhold på 1:1 til 4:1 i perifert blod. Tidvise CD4- og CD8-doble negative eller doble positive T-celler er også til stede. De doble negative T-cellene består typisk for det meste av gamma/delta-T-celler. Nevneverdig er det at de CD4-positive, men CD3-negative, cellene (røde, midtre venstre) er monocytter inkludert i gaten lymphocyte (lymfocytt). Det viser at gatingen CD45 kontra Side scatter (Sidespredning) alene ikke tillater ren lymfocyttidentifisering.

Figur 19. Dette punktplottet CD3 kontra CD4 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). Alle CD4-positive T-celler uttrykker CD3. Monocytter og plasmacytoide dendrittiske celler uttrykker CD4 ved et lavere nivå enn CD4-positive T-celler og mangler CD3-uttrykk. NK-celler mangler uttrykk av både CD3 og CD4.

Figur 20. Dette punktplottet CD3 kontra CD8 viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). Alle CD8-positive T-celler uttrykker CD3 (aqua). Et lite delsett av NK-celler uttrykker også CD8 (røde, øvre venstre) uten CD3.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

17

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

T-cellerør

Figur 21. Dette punktplottet CD3 kontra TCR γδ viser alle celler i gaten lymphocyte (lymfocytt) (Ly). Et lite delsett av T-celler uttrykker TCR-gamma/delta, som er samtidig uttrykt med CD3. Det svært lineære forholdet mellomCD3 og TCR skyldes deres nærvær som heterodimerisk kompleks som har et fast 1:1-forhold, så økt uttrykk av den ene viser økt uttrykk av den andre.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

18

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M1-cellerør

Figur 1: Dette punktplottet Time (Tid) kontra CD45 er ikke-gatet og viser alle hendelser samlet inn suksessivt. Dette plottet er ment å evaluere for fluidisk perturbasjon under prøvetaking. Stabil registrering representeres av et ensartet mønster av hendelser over tid. Hendelser som avviker fra det stabile mønsteret, kan utelukkes i gaten Time (Tid).

Figur 2: Dette punktplottet FS INT kontra FS PEAK viser hendelser i gaten Time (Tid). Dette plottet erment å utelukke celledubletter eller -aggregater. Singletthendelser viser et lineært forhold for INT kontra PEAK og er inkludert i gaten Singlets (Singletter), mens dubletter ligger utenfor det lineære forholdet.

Figur 3: Dette punktplottet Side Scatter (Sidespredning) kontra Forward Scatter (Foroverspredning) viser hendelser i gaten Singlets (Singletter). Dette plottet er ment å utelukke celledebris, som vanligvis har redusert foroverspredning med økt sidespredning. Tidlige apoptotiske celler har ogsåmildt økt sidespredning, mens sene apoptotiske og nekrotiske celler har variabelt redusert sidespredning. Levedyktige celler er inkludert i gaten Cells (Celler).

Figur 4: Dette punktplottet CD45 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten Cells (Celler). Dette plottet er ment å fremheve forskjellige delsett av hvite blodlegemer, som er gatet som CD45-positive. Den CD45-negative populasjonen omfatter vanligvis røde blodceller, blodplateaggregater, vevsdebris eller ikke- hematopoietiske celler.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

19

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M1-cellerør

Figur 5: Dette punktplottet CD45 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten CD45+ (CD45+). Dette punktplottet tillater skille av flere hvitcellepopulasjoner somtypisk finnes i perifert blod, beinmarg og lymfeknuteprøver, herunder lymfocytter (Gate Ly, røde), monocytter (Gate Mo, grønne) og granulocytter (Gate Gr, blå). Gaten CD45dim (CD45-svak) (lilla) dekker området typisk opptatt av myeloblaster og umodne B-celler. Basofiler, plasmacytoide dendrittiske celler, plasmaceller og NK-celler kan også falle inn i dette området. Ved å bruke forskjellige farger på hendelsene omfattet av hver gate kan de forskjellige populasjonene følges gjennom hele analysen.

Figur 6: Dette punktplottet CD16 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD16 uttrykkes ved sitt høyeste nivå påmodne granulocytter (blå). De fleste NK-celler uttrykker CD16 (røde, nedre høyre), slik et delsett av aktiverte monocytter (grønne) gjør.

Figur 7: Dette punktplottet CD7 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD7 uttrykkes på umodne T-celler ved den tidligste fasen av T-celleutvikling og vedvarer gjennom hele T-cellemodningen for å uttrykkes variabelt på modne T-celler (røde, nedre høyre). Det uttrykkes også på NK-celler og uttrykkes svakt på et delsett av plasmacytoide dendrittiske celler og et delsett av de seriebundne progenitorene.

Figur 8: Dette punktplottet CD10 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD10 uttrykkes på umodne B-celler, modne B-celler i germinalt senter og modne granulocytter (blå). Granulocyttene har høy sidespredning, i motsetning til lymfoide celler som har lav sidespredning.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

20

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M1-cellerør

Figur 9: Dette punktplottet CD13 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD13 uttrykkes på modnende granulocytter (blå), modne monocytter (grønne) og myeloide progenitorer (lilla).

Figur 10: Dette punktplottet CD64 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD64 uttrykkes ved sitt høyeste nivå på modne monocytter (grønne). CD64 uttrykkes ikke vel på hvilende modne granulocytter (blå), men øker i uttrykk med granulocyttaktivering. CD64 uttrykkes ikke på lymfocytter (røde) eller de fleste CD34-positive progenitorer. Aktiverte modne monocytter uttrykker CD64 i lavere nivåer og har lavere sidespredning.

Figur 11: Dette punktplottet CD34 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD34 er en markør av tidlige hematopoietiske progenitorer. Det uttrykkes på hematopoietiske stamceller, tidligemyeloide progenitorer (myeloblaster) og umodne B- og T-celler (lymfoblaster). Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34. CD34-positive progenitorer representerer normalt mindre enn 0,01 % av de hvite cellene i perifert blod.

Figur 12: Dette punktplottet CD14 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD14 uttrykkes ved et høyt nivå på modne monocytter (grønne) og ved et lavt nivå på modne granulocytter (blå). Aktiverte modne monocytter uttrykker CD14 i lavere nivåer og har lavere sidespredning.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

21

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M1-cellerør

Figur 13: Dette punktplottet HLA-DR kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. HLA-DR uttrykkes på antigenpresenterende celler, herunder monocytter (grønne) og plasmacytoide dendrittiske celler. Det uttrykkes også på CD34-positive progenitorer, umodne og modne B-celler og aktiverte T-celler.

Figur 14: Dette punktplottet CD11b kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD11b uttrykkes på granulocytter (blå) og påmonocytter (grønne). CD11b uttrykkes også på NK-celler og basofiler.

Figur 15. Dette punktplottet CD11b kontra CD16 viser alle levedyktige celler. CD11b uttrykkes på monocytter (grønne), umodne og modne granulocytter (blå) og NK- celler (røde). CD16 uttrykkes på umodne ogmodne granulocytter (blå) og et delsett av NK-celler (røde, øvre høyre). Aktiverte modne monocytter uttrykker CD16 ved et variabelt nivå og er CD11b-positive.

Figur 16. Dette punktplottet CD16 kontra CD13 viser alle levedyktige celler. CD13 uttrykkes på granulocytter (blå), monocytter (grønne), basofiler og CD34-positive progenitorer. CD16 uttrykkes på modnende granulocytter (blå) og et delsett av NK-celler (røde, nedre høyre).

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

22

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M1-cellerør

Figur 17. Dette punktplottet CD13 kontra CD34 viser alle levedyktige celler. CD13 uttrykkes på granulocytter (blå), monocytter (grønne), basofiler og CD34-positive progenitorer. CD34 uttrykkes på tidlige hematopoietiske progenitorer. Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34.

Figur 18. Dette punktplottet CD14 kontra CD64 viser alle levedyktige celler. CD64 uttrykkes ved et høyt nivå på monocytter (grønne) og ved et lavere nivå på granulocytter (blå). CD14 uttrykkes ved et høyt nivå på monocytter og et lavere nivå på granulocytter (blå). Aktiverte modne monocytter uttrykker CD14 og CD64 ved et variabelt lavere nivå.

Figur 19. Dette punktplottet CD14 kontra CD16 viser alle levedyktige celler. CD14 uttrykkes ved et høyt nivå påmonocytter (grønne) og et lavere nivå på granulocytter (blå, øvre venstre). CD16 uttrykkes på granulocytter og et delsett av NK-celler (røde, midt venstre). Aktiverte modne monocytter uttrykker CD14 og CD16 ved et variabelt lavere nivå.

Figur 20. Dette punktplottet HLA-DR kontra CD10 viser alle levedyktige celler. HLA-DR uttrykkes på monocytter (grønne), B-celler, plasmacytoide dendrittiske celler og CD34-positive progenitorer. CD10 uttrykkes av modne granulocytter (blå).

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

23

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M1-cellerør

Figur 21. Dette punktplottet CD7 kontraCD13 viser alle levedyktige celler. CD7 uttrykkes på T-celler og NK-celler (røde, nedre høyre). CD13 uttrykkes på granulocytter (blå), monocytter (grønne), basofiler og CD34-positive progenitorer. Samtidig uttrykk av CD13 og CD7 ses generelt ikke.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

24

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M2-cellerør

Figur 1: Dette punktplottet Time (Tid) kontra CD45 er ikke-gatet og viser alle hendelser samlet inn suksessivt. Dette plottet er ment å evaluere for fluidisk perturbasjon under prøvetaking. Stabil registrering representeres av et ensartet mønster av hendelser over tid. Hendelser som avviker fra det stabile mønsteret, kan utelukkes i gaten Time (Tid).

Figur 2: Dette punktplottet FS INT kontra FS PEAK viser hendelser i gaten Time (Tid). Dette plottet erment å utelukke celledubletter eller -aggregater. Singletthendelser viser et lineært forhold for INT kontra PEAK og er inkludert i gaten Singlets (Singletter), mens dubletter ligger utenfor det lineære forholdet.

Figur 3: Dette punktplottet Side Scatter (Sidespredning) kontra Forward Scatter (Foroverspredning) viser hendelser i gaten Singlets (Singletter). Dette plottet er ment å utelukke celledebris, som vanligvis har redusert foroverspredning. Tidlige apoptotiske celler har også mildt økt sidespredning, mens sene apoptotiske og nekrotiske celler har variabelt redusert sidespredning. Levedyktige celler er inkludert i gaten Cells (Celler).

Figur 4: Dette punktplottet CD45 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten Cells (Celler). Dette plottet er ment å fremheve forskjellige delsett av hvite blodlegemer, som er gatet som CD45-positive. Den CD45-negative populasjonen omfatter vanligvis røde blodceller, blodplateaggregater, vevsdebris eller ikke- hematopoietiske celler.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

25

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M2-cellerør

Figur 5: Dette punktplottet CD45 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser hendelser i gaten CD45+ (CD45+). Dette punktplottet tillater skille av flere hvitcellepopulasjoner somtypisk finnes i perifert blod, beinmarg og lymfeknuteprøver, herunder lymfocytter (Gate Ly, røde), monocytter (Gate Mo, grønne) og granulocytter (Gate Gr, blå). Gaten CD45dim (CD45-svak) (lilla) dekker området typisk opptatt av myeloblaster og umodne B-celler. Basofiler, plasmacytoide dendrittiske celler, plasmaceller og NK-celler kan også falle inn i dette området. Ved å bruke forskjellige farger på hendelsene omfattet av hver gate kan de forskjellige populasjonene følges gjennom hele analysen.

Figur 6: Dette punktplottet CD15 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD15 uttrykkes på granulocytter (blå) og ved et lavere nivå på monocytter (grønne).

Figur 7: Dette punktplottet CD123 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD123 uttrykkes ved et høyt nivå på basofiler og plasmacytoide dendrittiske celler og ved et lavere nivå på CD34-positive myeloide progenitorer og monocytter (grønne).

Figur 8: Dette punktplottet CD117 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD117 uttrykkes variabelt på CD34-positivemyeloide progenitorer, tidlige promyelocytter og tidlige erytroide forløpere og ved et høyt nivå påmastceller. CD117 uttrykkes også på delsett av reaktive NK-celler og neoplastiske plasmaceller. Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD117.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

26

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M2-cellerør

Figur 9: Dette punktplottet CD13 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD13 uttrykkes på granulocytter (blå) og modne monocytter (grønne) og variabelt på myeloide progenitorer.

Figur 10: Dette punktplottet CD33 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD33 uttrykkes ved et høyt nivå på monocytter (grønne) og ved et lavere nivå på granulocytter (blå). CD33 uttrykkes også på basofiler, et delsett av NK-celler (røde) og et delsett av CD34-positive myeloide progenitorer.

Figur 11: Dette punktplottet CD34 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD34 er en markør av tidlige hematopoietiske progenitorer. Det uttrykkes typisk på myeloide blaster, umodne B- og T-celler (lymfoblaster). Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34. CD34-positive progenitorer representerer normaltmindre enn0,01 %av de hvite cellene i perifert blod.

Figur 12: Dette punktplottet CD38 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD38 er en aktiveringsmarkør. Det uttrykkes ved det høyeste nivået på plasmaceller, ved et moderat nivå på umodne myeloide og lymfoide progenitorer, ved et lavt nivå på monocytter (grønne) og ved et variabelt lavt nivå på aktiverte modne monocytter (røde).

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

27

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB

M2-cellerør

Figur 13: Dette punktplottet HLA-DR kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. HLA-DR uttrykkes på antigenpresenterende celler, herunder monocytter (grønne) og plasmacytoide dendrittiske celler. Det uttrykkes også på CD34-positive progenitorer, modne B-celler (røde, nedre høyre) og aktiverte T-celler.

Figur 14: Dette punktplottet CD19 kontra Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedyktige celler. CD19 uttrykkes på umodne ogmodne B-celler (røde, nedre høyre) samt de fleste plasmaceller. Disse cellene har typisk lav til moderat sidespredning.

Figur 15. Dette punktplottet CD34 kontra CD117 viser alle levedyktige celler. CD34 uttrykkes på myeloide blaster og tidlige umodne B-celleforløpere. CD117 uttrykkes på myeloide blaster, promyelocytter og tidlige erytroide forløpere, men er negativ på tidlige B-celleforløpere. Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34 og CD117. CD34- og CD117-positive progenitorer representerer normalt mindre enn 0,01 % av de hvite cellene i perifert blod.

Figur 16. Dette punktplottet CD33 kontra CD13 viser alle levedyktige celler. CD33 og CD13 uttrykkes på monocytter (grønne), granulocytter (blå), basofiler og CD34- positive progenitorer. Lymfocytter (røde) uttrykker ikke verken CD13 eller CD33.

Innholdsfortegnelse > Ingen immunfenotypiske abnormiteter > Case nr. 1: Normalt fullblod

Hver hendelse teller

28

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33364 AB