ClearLLab 10C - JP - 日本語版

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白血病 /リンパ腫* 分析のためのCE抗体コンビネーション C LEAR LL AB 10Cパ ネル ケースブック

すべてのイベントが重要です *非ホジキンリンパ腫のみ

1 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

目次

濾胞性リンパ腫......................................................................... 226 症例#10:濾胞性リンパ腫............................................... 226 胚中心由来のB細胞リンパ腫................................................. 250 症例#11:胚中心由来のB細胞リンパ腫....................... 250 成熟B細胞リンパ腫.................................................................. 274 症例#12:成熟B細胞リンパ腫........................................ 274 成熟B細胞リンパ腫.................................................................. 298 症例#13:成熟B細胞リンパ腫........................................ 298 T細胞由来の腫瘍過程. ........................................................322 T細胞リンパ芽球性白血病/リンパ芽球性リンパ腫............ 322 Case #14: . Tリンパ芽球性白血病/Tリンパ芽球性リンパ腫.......... 322 T細胞リンパ芽球性白血病/リンパ芽球性リンパ腫............ 346 症例#15:. Tリンパ芽球性白血病/Tリンパ芽球性リンパ腫.......... 346 T細胞大顆粒リンパ腫.............................................................. 370 症例#16:T細胞リンパ増殖性疾患................................ 370 T細胞大顆粒リンパ腫.............................................................. 394 症例#17:T細胞リンパ増殖性疾患................................ 394 骨髄由来の腫瘍過程. ..........................................................418 急性骨髄性白血病................................................................... 418 症例#18:急性骨髄性白血病......................................... 418 急性骨髄性白血病................................................................... 442 症例#19:急性単球性白血病......................................... 442 急性骨髄性白血病................................................................... 466 症例#20:急性骨髄性白血病-NOS............................... 466 急性骨髄性白血病................................................................... 490 症例#21:急性前骨髄球性白血病................................. 490 急性骨髄性白血病................................................................... 514 症例#22:急性単球性白血病......................................... 514 骨髄異形成症候群................................................................... 538 症例#23:骨髄異形成症候群......................................... 538 骨髄異形成症候群................................................................... 562 症例#24:骨髄異形成症候群......................................... 562

はじめに..................................................................................3 背景........................................................................................3 免疫表現型検査に対するコンセンサス勧告...............................4 ClearLLab 10Cパネルの使用目的............................................4 ClearLLab 10Cパネル..............................................................4 ClearLLabコンペンセーションキット.........................................5 症例選択および解釈................................................................5 関連文献.................................................................................6 参考文献.................................................................................6 症例........................................................................................7 異常免疫表現型なし................................................................7 末梢血全血.....................................................................................7 症例#1:正常全血. ................................................................7 骨髄................................................................................................32 症例#2:正常な骨髄...........................................................32 リンパ節.........................................................................................56 症例#3:正常なリンパ節....................................................56 B細胞由来の腫瘍過程...........................................................80 B細胞リンパ芽球性白血病/リンパ芽球性リンパ腫...............80 症例#4:B細胞急性リンパ芽球性白血病/. リンパ芽球性リンパ腫........................................................80 B細胞リンパ芽球性白血病/リンパ芽球性リンパ腫............ 105 症例#5:. B細胞急性リンパ芽球性白血病/. リンパ芽球性リンパ腫..................................................... 105 慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫....................... 130 症例#6:. 慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫............... 130 慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫....................... 154 症例#7:. 慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫............... 154 マントル細胞リンパ腫.............................................................. 178 症例#8:マントル細胞リンパ腫....................................... 178 形質細胞性骨髄腫................................................................... 202 症例#9:. 形質細胞性骨髄腫........................................................... 202

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2 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

はじめに このケースブックは、Beckman Coulter NaviosおよびNavios EXフローサイトメーターで、Beckman CoulterのClearLLab 10Cパネル( 白血病とリンパ腫分析のためのCE-IVD認証試薬)を使用して生成されたフローサイトメトリー免疫表現型検査データの分析を促進す るためのものです。 さまざまなリンパ系および骨髄系腫瘍に典型的な特徴的所見に関するサンプルケースのほか、臨床や検査所見で潜在的な腫瘍過程 が示唆されているものの、異常免疫表現型が確認されない患者のケースが含まれています。サンプルタイプには、末梢血全血、骨髄、リ ンパ節が含まれます。 各ケースには、患者の人口統計や病歴を示す臨床症例ビネット、このケースブックのユーザーが再分析を行うためのケース固有のリスト モードデータファイル、リストモードデータとともに使用されるClearLLab 10C固有の分析プロトコル、提供されたプロトコルによる分析 を示すレポートが含まれます。各レポートには、免疫表現型に関する所見のほか、潜在的な危険性を強調した解析メモが含まれます。 注記:ケースブックの例は例示のみを目的としており、血液リンパ系腫瘍に関するすべてのカテゴリを表しているわけでも、または可能 性のあるすべての免疫表現型の多様性を説明したり示しているわけでもありません。 背景 フローサイトメトリー免疫表現型検査はサンプルに存在する個々の細胞について、特異的抗原の有無を評価します。これらの結果を総 合することにより、該当のサンプルタイプにおいて予測された集団(すなわち正常)と一致するか、あるいは一致しないか(すなわち異 常)について、各細胞の免疫表現型プロファイルが生成されます。造血リンパ組織悪性腫瘍が疑われる患者からのサンプルの評価には、 複数のステップが伴います 1 : • サンプル内のすべての細胞集団の評価。 • 各細胞集団に対する「正常」または「異常」の識別。 • 抗原の有無、および蛍光色素標識抗体による染色の強弱に応じた異常細胞集団のより詳細な解析。 • 病歴、組織学、細胞学、免疫組織化学のほか、in situハイブリダイゼーション、核型分析、分子診断学を含む遺伝子型決定などの利 用可能な追加情報を取り入れた、異常免疫表現型の解釈。

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3 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

免疫表現型検査に対するコンセンサス勧告 造血リンパ組織悪性腫瘍を有する、または造血リンパ組織悪性腫瘍が疑われる患者からのサンプルのフローサイトメトリー免疫表現型 検査に対するコンセンサス勧告は過去20年をかけて明確化され、複数のガイドラインが科学文献で発表されてきました。 フローサイトメトリー免疫表現型検査は2008年以降から、造血組織およびリンパ系組織の腫瘍に関するWHO分類に含まれています 2 。 医学的適応、および検査の分析前、分析、分析後の詳細情報を含むフローサイトメトリー測定の検証については、2006 Bethesda International Consensus Conference recommendations(2006年ベセスダ国際コンセンサス会議勧告) 3,4,5 、および細胞ベースの蛍 ClearLLab 10Cパネルは、NaviosおよびNavios EXフローサイトメーターでのマルチパラメータ免疫表現型検査による細胞集団の定性的 同定のための、体外診断用医薬品です。この試薬は、慢性白血病、急性白血病、非ホジキンリンパ腫、骨髄腫、骨髄異形成症候群(MDS) 、骨髄増殖性腫瘍(MPN)などの造血器腫瘍を有する、または造血器腫瘍が疑われる血液学的異常を示す患者の鑑別診断において補 助として使用します。この試薬は、末梢全血(K 2 EDTA、クエン酸デキストロース(ACD)またはヘパリン中に採取)、骨髄(K 2 EDTA、ACDま たはヘパリン中に採取)、およびリンパ節サンプルと一緒に使用できます。結果の解釈は、その他の臨床および検査所見とともに、病理 学者または同等の専門家が確定する必要があります。 この試薬により、下記に一覧表示された表面抗原の定性分析結果に関するマルチパラメータを得られます。 ClearLLab 10Cパネル 青色レーザー 赤色レーザー 紫色レーザー PN チューブ FITC PE ECD PC5.5 PC7 APC APC- A700 APC- A750 PB KRO B96805 Bセルチューブ Kappa Lambda CD10 CD5 CD200 CD34 CD38 CD20 CD19 CD45 B96806 Tセルチューブ TCRγδ CD4 CD2 CD56 CD5 CD34 CD7 CD8 CD3 CD45 B96807 M1セルチュ ーブ CD16 CD7 CD10 CD13 CD64 CD34 CD14 HLA-DR CD11b CD45 B96808 M2セルチュ ーブ CD15 CD123 CD117 CD13 CD33 CD34 CD38 HLA-DR CD19 CD45 光測定に関するICSH/ICCS実践ガイドライン 6,7,8 で取り上げられています。 ClearLLab 10Cパネルの使用目的

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4 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

ClearLLabコンペンセーションキット 青色レーザー

赤色レーザー

紫色レーザー

APC- A700

APC- A750

PN

FITC

PE

ECD PC5.5

PC7 CD4

APC CD4

PB

KRO

B74074 CD8 上記の試薬は標準化されたフォーマットで提供され、データ取得と分析のためのソフトウェアとともに、サンプル調製とサイトメーター 設定のための試薬と一緒に使用します。ClearLLab 10Cパネルは、ベセスダガイドライン 2 で概説されている標準化のための勧告に準 拠しています。 ClearLLab 10Cパネルに関する詳細情報は、 beckman.com/ClearLLab を参照してください。 症例選択および解釈 このケースブックで紹介されているデータは、 beckman.com で入手可能なClearLLab 10Cパネル取扱説明書(IFU)に詳述されている 手順に従って生成されました。 代表的な症例は臨床試験データから選択され、以下の方々によって評価、注釈、解釈が行われました。 Brent Wood MD PhD. Professor, Laboratory Medicine and Pathology. Division Head, Hematopathology. Director, Hematopathology Laboratory and SCCA Pathology. Medical Director, SCCA Laboratories. University of Washington, Seattle, WA, USA Xueyan Chen, MD, PhD. Assistant Professor, Laboratory Medicine. Associate Director, Hematopathology Laboratory. University of Washington, Seattle, WA Yi Zhou, MD PhD. Assistant Professor. CD4 CD4 CD3 CD4 CD4 CD4 CD4

Department of Laboratory Medicine. University of Washington, Seattle, WA

測定プロトコル: ClearLLab 10C測定プロトコルをダウンロード。 測定: 症例ごとのKaluza Cアナリシスファイルをダウンロード。

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5 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

参考文献 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms.F.E.Craig, K.A. Foon.Blood.2008; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues.IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms.Swerdlow SH, et al.Blood.2016;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia.Arber DA, et al.Blood 2016 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia.Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom.2007;72 Suppl 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications.Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom.2007;72 Suppl 1:S5- 13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia.Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom.2007;72 Suppl 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues.Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; ICSH/ICCS Working Group.Cytometry B Clin Cytom.2013 Sep-Oct;84(5):291-308. doi: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations.Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; ICSH/ICCS Working Group.Cytometry B Clin Cytom.2013 Sep-Oct;84(5):309-14. doi: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria.Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; ICSH/ICCS Working Group.Cytometry B Clin Cytom.2013 Sep-Oct;84(5):315-23. doi: 10.1002/cyto.b.2110 関連文献 • ClearLLab 10C Application System Guide, PN C24688(ClearLLab 10Cアプリケーションシステムガイド、PN C28536AA) • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use, PN C10993(Kaluza Cフローサイトメトリーソフトウェア取扱説明 書、PN C10999) • Navios Flow Cytometer Instructions For Use, PN 773232(Naviosフローサイトメーターオペレーターズガイド、PN 774536AG) • Navios EX Flow Cytometer Instructions For Use, PN B73085(Navios EXフローサイトメーター取扱説明書、PN B77107AB) • ClearLLab 10C Panels Instructions For Use, PN C00197(ClearLLab 10Cパネル取扱説明書、PN C00197) • ClearLLab Compensation Beads Instructions For Use, PN C00201(ClearLLab Compensation Beads取扱説明書、PN C00201) • ClearLLab Compensation Kit Instructions For Use, PN B74074(ClearLLabコンペンセーションキット取扱説明書、PN B74074) • ClearLLab Control Cells Instructions For use, PN B99884(ClearLLab Control Cells取扱説明書、PN B99884) • ClearLLab Control Cells QC Analysis Protocols Download Addendum, PN C31984(ClearLLab Control CellsQC分析プロトコ ルのダウンロードの補遺、PN C33278AA)

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6 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

症例 次のColor Precedence Gating(カラー優先ゲー ティング)が症例に適用さ れます:

リンパ球. (ゲートLy)/NK細胞:赤 CD19+ B細胞:オレンジ CD3+ T細胞:水色

単球. (ゲートMo):緑 顆粒球. (ゲートGr):青

CD45dim:紫 追加の異常細胞集団:青 緑 CD45陰性細胞集団:灰 色

異常免疫表現型なし フローサイトメトリーは白血球細胞集団を特性化するための手段です。慢性白血病、急性白血病、非ホジキンリンパ腫、骨髄腫、骨髄異形成症候 群(MDS)、骨髄増殖性腫瘍(MPN)などの造血器腫瘍を有する、または造血器腫瘍が疑われる血液学的異常を示す患者の鑑別診断において役 立ちます。これらの臨床症状における異常細胞集団の同定にとって極めて重要なことは、全血、骨髄、リンパ節組織サンプルに存在する正常細胞 集団を熟知することです。以下は、ClearLLab 10Cパネルによって染色された正常なサンプルの例です。 末梢血全血 症例#1:正常全血 症例 この65歳の男性は血小板減少症の症状を示しています。末梢血全血サンプルがClearLLab 10Cパネルを使用したフローサイトメトリー

免疫表現型検査に提出されています。 フローサイトメトリー免疫表現型検査 Bセルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートに除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 7 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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Bセルチューブ

図3:この側方散乱 - 前方散乱ドットプロットは、Singlets(シングレット)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットは、多くの場合に前方散乱を低減した 細胞破片を除外するためのものです。また初期アポトーシス細胞は軽度に側方 散乱を増加させている一方、後期アポトーシス細胞および壊死細胞は可変的に 側方散乱を低減しています。生存細胞はCells(細胞)ゲートに含まれています。

図4:このCD45 -側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示し ています。このプロットは、CD45陽性としてゲーティングされた白血球細胞のさま ざまなサブセットを強調表示するためのものです。CD45陰性集団には通常、赤血 球細胞、血小板凝集塊、組織残屑、または非造血細胞が含まれます。

図5:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、CD45+(CD45+)ゲート内のイベント を示しています。このドットプロットでは、リンパ球(ゲートLy、赤/オレンジ)、単球( ゲートMo、緑)、顆粒球(ゲートGr、青)など、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに通 常見られる複数の白血球細胞集団を区別できます。CD45dimゲート(紫)は、初期 前駆細胞(すなわち、骨髄芽球および未熟B細胞)が通常占める領域をカバーして います。好塩基球、形質細胞様樹状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に現れる 可能性があります。各ゲートにより構成されるイベントに異なる色を適用すること により、分析においてさまざまな細胞集団を特定できます。

図6:このCD19 - 側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示 しています。CD19+ゲートはCD19陽性細胞を特定します。CD19は成熟・未熟B細 胞、および多くの形質細胞で発現しています。これらの細胞は一般的に、低から 中程度の側方散乱性を有します。

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Bセルチューブ

図7:このカッパ - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。 表面カッパ軽鎖は成熟B細胞(オレンジ)および後期未熟B細胞で発現していま す。カッパ陽性B細胞の割合は通常、カッパ陰性(ラムダ陽性)B細胞よりも多い です。免疫グロブリンのFc受容体介在性結合により、明らかなカッパ陽性が単球 (緑)に確認されます。カッパ軽鎖陽性細胞はプロットの右側に示されています。

図8:このラムダ-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。表 面ラムダ軽鎖は成熟B細胞(オレンジ)および後期未熟B細胞で発現しています。ラ ムダ陽性B細胞は通常、ラムダ陰性(カッパ陽性)B細胞よりも小さいです。免疫グロ ブリンのFc受容体介在性結合により、明らかなラムダ陽性が単球(緑)に確認され ます。ラムダ軽鎖陽性細胞はプロットの右側に示されています。

図9:このCD10-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD10 は未熟B細胞、成熟胚中心B細胞、および成熟顆粒球(青)で発現しています。リン パ球系細胞の側方散乱は低いのに対し、顆粒球は高い側方散乱性を有します。

図10:このCD5-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD5 は未熟・成熟T細胞(赤、右下)で発現するとともに、成熟B細胞(オレンジ)のサブ セットでわずかに発現します。これらのリンパ球系細胞は一般的に、低い側方散 乱性を有します。

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Bセルチューブ

図11:このCD200 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD200は通常B細胞で発現しますが、一部の新生B細胞では陰性となります。 慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫(通常はCD200陽性)とマントル細胞 リンパ腫(通常はCD200陰性)を区別するのに特に有用です。

図12:このCD34 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。造血幹細胞、初期骨髄系前駆細 胞(骨髄芽球)、未熟B細胞およびT細胞(リンパ芽球)で発現しています。成熟顆 粒球、単球、リンパ球はCD34陰性です。CD34陽性前駆細胞は通常、末梢血の白 血球の0.01%未満を表します。

図13:このCD38 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD38は活性化マーカーです。形質細胞では最高レベルで、未熟骨髄・リンパ 球前駆細胞では中レベルで、単球(緑)では低レベルで、活性化成熟リンパ球で は可変レベルで発現しています。

図14:このCD20-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD20 は成熟B細胞(オレンジ)で発現しているとともに、成熟T細胞のサブセットで可変 的に低レベルで発現しています。後期未熟B細胞では可変的に発現します。CD20陽 性細胞は通常、低い側方散乱のリンパ球ゲート内にあります。

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すべてのイベントが重要です

Bセルチューブ

図15:このラムダ - カッパドットプロットは、すべてのCD19+細胞を示しています。 初期未熟B細胞(紫)は表面免疫グロブリン軽鎖(すなわち、カッパまたはラムダ 軽鎖のいずれかが陰性)を発現しません。成熟B細胞はポリクローナルであり、 カッパまたはラムダ軽鎖のいずれかを発現します。通常のカッパ/ラムダ比は1.4 です(1~2の範囲)。付着性の血漿中免疫グロブリンによりバックグラウンドが高 くなることは一般的です。

図16:このCD19 - CD20ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。成熟B細胞はCD19およびCD20の両方を発現します(オレンジ) 。一部の新生B細胞は、低下したCD19またはCD20発現を示すことがあります。

図17:このCD19 - CD10ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。B細胞はCD19陽性です(オレンジ)。CD10陽性成熟B細胞はリ ンパ節の胚中心に分散しており、後期未熟B細胞の小さなサブセットは末梢血と 骨髄液に存在します。

図18:このCD38 - CD10ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。CD38は、形質細胞では高レベルで、未熟B細胞では中レベル に、胚中心B細胞では低レベルで発現しています。多くの成熟B細胞(オレンジ) はCD38の低い発現から欠損を示します。T細胞(赤)は活性状態に応じて可変的 なCD38発現を示します。

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Bセルチューブ

図19:このCD20-CD10ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示 しています。多くの成熟B細胞はCD10なしで一様に高レベルのCD20を発現します。

図20:このCD19 - CD5ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。CD5はT細胞(赤、左上)で発現し、正常な成熟B細胞(オレンジ) のサブセットでは低レベルで可変的に発現し、新生B細胞の一部のサブタイプで 発現しています。

図21:このCD20 - CD200ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。多くの成熟B細胞(オレンジ)は低レベルから中レベルでCD200 を発現します。

図22:このCD5 - CD200ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。多くの成熟B細胞は通常、可変的にCD5を発現するサブセットを 伴い、CD200を発現します。慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫の新生B 細胞は通常CD5およびCD200を発現する一方、マントル細胞リンパ腫はCD5のみ を発現し、CD200を発現しません。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 12 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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Tセルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートに除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

図3:この側方散乱 - 前方散乱ドットプロットは、Singlets(シングレット)ゲート内 のイベントを示しています。このプロットは、多くの場合に前方散乱を低減し、側 方散乱を増加させる細胞破片を除外するためのものです。また初期アポトーシ ス細胞は軽度に側方散乱を増加させている一方、後期アポトーシス細胞および 壊死細胞は可変的に側方散乱を低減しています。生存細胞はCells(細胞)ゲー トに含まれています。

図4:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示 しています。このプロットは、CD45陽性であるさまざまなタイプの白血球細胞を 強調表示するためのものです。CD45陰性集団には通常、赤血球細胞、血小板凝 集塊、または非造血細胞が含まれます。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 13 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

すべてのイベントが重要です

Tセルチューブ

図5:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、CD45+(CD45+)ゲート内のイベント を示しています。このドットプロットでは、リンパ球(ゲートLy、赤/水色)、単球(ゲー トMo、緑)、顆粒球(ゲートGr、青)など、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに通常見 られる複数の白血球細胞集団を区別できます。CD45dimゲート(紫)は、骨髄芽球 および未熟B細胞が通常占める領域をカバーしています。好塩基球、形質細胞様 樹状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に該当する可能性があります。各ゲート により構成されるイベントに異なる色を適用することにより、分析においてさまざ まな細胞集団を追跡できます。

図6:このCD3 -側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD3+ ゲートは、表面CD3発現を示す細胞を特定します(水色)。CD3はT細胞に対し非常 に特異的であり、成熟T細胞および後期未熟T細胞の表面でのみ発現しています。 これらの細胞は一般的に、低から中程度の側方散乱性を有します。

図7:このTCRγδ - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。TCRγδはT細胞受容体のサブユニットであり、細胞傷害性T細胞の小さなサブセッ トで発現しています。これらの細胞は一般的に、低い側方散乱性を有します(水色)。

図8:このCD4 -側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD4 は未熟・成熟T細胞のサブセットで高レベルに発現しています(水色)。CD4はま た、CD4陽性T細胞よりも低いレベルで単球性細胞(緑)でも発現しています。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 14 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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Tセルチューブ

図9:このCD2 -側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD2 は、ほぼすべての未熟・成熟T細胞により発現する抗原です(水色)。また、CD2はNK 細胞で発現し(赤、右下)、単球で低レベルで発現しています(緑)。

図10:このCD56 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD56はNK細胞の大きなサブセット(赤)、NK活性を示すT細胞(NK/T細胞)、お よび多くのガンマ/デルタT細胞(水色)で正常に発現しています。CD56はまた、反応 性および腫瘍性の状態の両方において単球性細胞(緑)で部分的に発現します。

図12:このCD34 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。造血幹細胞、初期骨髄系前駆細 胞(骨髄芽球)、未熟B細胞およびT細胞(リンパ芽球)で発現しています。成熟顆 粒球、単球、リンパ球はCD34陰性です。CD34陽性前駆細胞は通常、末梢血の白 血球の0.01%未満を表します。

図11:このCD5-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD5 は多くの未熟・成熟T細胞で発現し(水色)、成熟B細胞のサブセットで低レベルで発 現しています。最も初期段階の未熟T細胞およびガンマ/デルタT細胞は通常、CD5発 現が非常に低いか、発現しません。NK細胞の小さなサブセットはCD5を発現します。

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すべてのイベントが重要です

Tセルチューブ

図13:このCD7-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD7 はT細胞発生の初期段階において未熟T細胞で発現し、T細胞成熟の過程におい て成熟T細胞で可変的に発現します(水色)。また、NK細胞で一様に発現し(赤、右 下)、形質細胞様樹状細胞のサブセット、および系統特異的CD34陽性前駆細胞の サブセットでわずかに発現します。

図14:このCD8-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD8 は未熟・成熟T細胞のサブセット(水色)で発現し、細胞傷害性成熟T細胞集団を定 義します。NK細胞およびガンマ/デルタT細胞に低レベルで可変的に発現します。

図15:このCD3 - CD56ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。T細胞は、すべての成熟T細胞に存在し、その他の系統の細胞によっ て発現しないため、CD3発現により定義されます。NK細胞は本質的に表面CD3を 発現しませんが、大きなサブセットでCD56は発現します(赤、左上)。特にNK活性 を示すT細胞(NK/T細胞)およびガンマ/デルタT細胞など、成熟T細胞の小さなサ ブセットもCD56を発現します。

図16:このCD5 - CD3ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示 しています。CD3およびCD5は多くの成熟T細胞で共発現しますが(水色)、大きな顆 粒性リンパ球形態を有する細胞傷害性T細胞の小さなサブセットは多くの場合に CD5の発現が低いかまったく発現しません。CD5は多くのNK細胞で発現しません。

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Tセルチューブ

図17:このCD7 - CD2ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。CD2およびCD7は大多数の成熟T細胞(水色)およびNK細胞(赤、 右上)で共発現します。

図18:このCD8 - CD4ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。CD3陽性T細胞(水色)には、CD4陽性(ヘルパー)およびCD8陽性 (細胞傷害性)サブセットが含まれます。CD4陽性T細胞は多くの場合CD8陽性T 細胞よりも多く、末梢血のCD4/CD8比は1:1~4:1です。ときにCD4およびCD8の 二重陰性または二重陽性T細胞が存在することもあります。二重陰性T細胞は通 常、主にガンマ/デルタT細胞で構成されています。注目すべきは、CD4陽性であ るもののCD3陰性の細胞(赤、左中)が、リンパ球ゲート内の単球であるというこ とです。これは、CD45 - 側方散乱ゲーティングだけでは、純粋にリンパ球を確認 できないことを示しています。

図19:このCD3 - CD4ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。すべてのCD4陽性T細胞はCD3を発現します。単球および形質細 胞様樹状細胞は、CD4陽性T細胞よりも低いレベルでCD4を発現しますが、CD3 発現は欠損しています。NK細胞はCD3およびCD4発現の両方が欠損しています。

図20:このCD3 - CD8ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示 しています。すべてのCD8陽性T細胞はCD3(水色)を発現します。NK細胞の小さな サブセットも、CD3なしでCD8(赤、左上)を発現します。

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Tセルチューブ

図21:このCD3 - TCRγδドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。T細胞の小さなサブセットはTCRガンマ/デルタを発現します。こ れはCD3と共発現されます。CD3およびTCRとの強い直線関係は、1:1の固定比 を有するヘテロダイマー複合体としてそれらが存在しているためであり、したが って一方の発現が高まれば、他方の発現も高まります。

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M1セルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートに除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

図3:この側方散乱 - 前方散乱ドットプロットは、Singlets(シングレット)ゲート内 のイベントを示しています。このプロットは、多くの場合に前方散乱を低減し、側 方散乱を増加させる細胞破片を除外するためのものです。また初期アポトーシ ス細胞は軽度に側方散乱を増加させている一方、後期アポトーシス細胞および 壊死細胞は可変的に側方散乱を低減しています。生存細胞はCells(細胞)ゲー トに含まれています。

図4:このCD45 -側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示し ています。このプロットは、CD45陽性としてゲーティングされた白血球細胞のさま ざまなサブセットを強調表示するためのものです。CD45陰性集団には通常、赤血 球細胞、血小板凝集塊、組織残屑、または非造血細胞が含まれます。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 19 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図5:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、CD45+(CD45+)ゲート内のイベン トを示しています。このドットプロットでは、リンパ球(ゲートLy、赤)、単球(ゲート Mo、緑)、顆粒球(ゲートGr、青)など、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに通常見ら れる複数の白血球細胞集団を区別できます。CD45dimゲート(紫)は、骨髄芽球お よび未熟B細胞が通常占める領域をカバーしています。好塩基球、形質細胞様樹 状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に該当する可能性があります。各ゲートに より構成されるイベントに異なる色を適用することにより、分析においてさまざま な細胞集団を追跡できます。

図6:このCD16-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD16 は成熟顆粒球(青)で最高レベルで発現しています。多くのNK細胞はCD16(赤、右 下)を発現し、活性化単球(緑)のサブセットも同様です。

図7:このCD7 -側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD7 はT細胞発生の初期段階において未熟T細胞で発現し、T細胞成熟の過程におい て持続し、成熟T細胞で可変的に発現します(赤、右下)。また、NK細胞で発現し、 形質細胞様樹状細胞のサブセット、および系統特異的前駆細胞のサブセットで わずかに発現します。

図8:このCD10-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD10 は未熟B細胞、成熟胚中心B細胞、および成熟顆粒球(青)で発現しています。リン パ球系細胞の側方散乱は低いのに対し、顆粒球は高い側方散乱性を有します。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 20 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図9:このCD13 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD13は成熟過程の顆粒球(青)、成熟単球(緑)、および骨髄系前駆細胞(紫) で発現しています。

図10:このCD64 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD64は成熟単球(緑)で高レベルで発現しています。CD64は静止期の成熟 顆粒球(青)ではあまり発現していませんが、顆粒球活性化により発現が高まりま す。CD64はリンパ球(赤)または多くのCD34陽性前駆細胞では発現しません。活性 化成熟単球はより低いレベルでCD64を発現し、より低い側方散乱性を有します。

図11:このCD34 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。造血幹細胞、初期骨髄系前駆細 胞(骨髄芽球)、未熟B細胞およびT細胞(リンパ芽球)で発現しています。成熟顆 粒球、単球、リンパ球はCD34陰性です。CD34陽性前駆細胞は通常、末梢血の白 血球の0.01%未満を表します。

図12:このCD14-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD14 は成熟単球(緑)で高レベルで、成熟顆粒球(青)で低レベルで発現しています。活 性化成熟単球はより低いレベルでCD14を発現し、より低い側方散乱性を有します。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 21 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図13:このHLA-DR - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。HLA-DRは単球(緑)および形質細胞様樹状細胞など、抗原提示細胞で発現して います。また、CD34陽性、未熟・成熟B細胞、および活性化T細胞でも発現しています。

図14:このCD11b - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD11bは顆粒球(青)および単球(緑)で発現しています。CD11bはまた、NK細 胞および好塩基球でも発現しています。

図15:このCD11b-CD16ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD11b は単球(緑)、未熟・成熟顆粒球(青)、およびNK細胞(赤)で発現しています。CD16 は未熟・成熟顆粒球(青)、およびNK細胞(赤、右上)のサブセットで発現していま す。活性化成熟単球は可変レベルでCD16を発現し、CD11b陽性です。

図16:このCD16 - CD13ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD13 は顆粒球(青)、単球(緑)、好塩基球、およびCD34陽性前駆細胞で発現していま す。CD16は成熟過程の顆粒球(青)、およびNK細胞のサブセット(赤、右下)で発 現しています。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 22 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図17:このCD13 - CD34ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD13 は顆粒球(青)、単球(緑)、好塩基球、およびCD34陽性前駆細胞で発現していま す。CD34は初期造血前駆細胞で発現しています。成熟顆粒球、単球、リンパ球は CD34陰性です。

図18:このCD14 - CD64ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD64 は単球(緑)で高レベルで、顆粒球(青)で低レベルで発現しています。CD14は単球 で高レベルで、顆粒球(青)で低レベルで発現しています。活性化成熟単球は可変 的に低いレベルでCD14およびCD64を発現しています。

図19:このCD14 - CD16ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD14 は単球(緑)で高レベルで、顆粒球(青、左上)で低レベルで発現しています。CD16 は顆粒球、およびNK細胞のサブセット(赤、中央左)で発現しています。活性化成熟 単球は可変的に低いレベルでCD14およびCD16を発現しています。

図20:このHLA-DR-CD10ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。HLA- DRは単球(緑)、B細胞、形質細胞様樹状細胞、CD34陽性前駆細胞で発現していま す。CD10は成熟顆粒球(青)により発現しています。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 23 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図21:このCD7 - CD13ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD7 はT細胞およびNK細胞で発現しています(赤、右下)。CD13は顆粒球(青)、単球 (緑)、好塩基球、およびCD34陽性前駆細胞で発現しています。一般的にCD13 とCD7の共発現は見られません。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 24 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M2セルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートに除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

図3:この側方散乱 - 前方散乱ドットプロットは、Singlets(シングレット)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットは、多くの場合に前方散乱を低減した 細胞破片を除外するためのものです。また初期アポトーシス細胞は軽度に側方 散乱を増加させている一方、後期アポトーシス細胞および壊死細胞は可変的に 側方散乱を低減しています。生存細胞はCells(細胞)ゲートに含まれています。

図4:このCD45 -側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示し ています。このプロットは、CD45陽性としてゲーティングされた白血球細胞のさま ざまなサブセットを強調表示するためのものです。CD45陰性集団には通常、赤血 球細胞、血小板凝集塊、組織残屑、または非造血細胞が含まれます。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 25 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

すべてのイベントが重要です

M2セルチューブ

図5:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、CD45+(CD45+)ゲート内のイベン トを示しています。このドットプロットでは、リンパ球(ゲートLy、赤)、単球(ゲート Mo、緑)、顆粒球(ゲートGr、青)など、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに通常見ら れる複数の白血球細胞集団を区別できます。CD45dimゲート(紫)は、骨髄芽球お よび未熟B細胞が通常占める領域をカバーしています。好塩基球、形質細胞様樹 状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に該当する可能性があります。各ゲートに より構成されるイベントに異なる色を適用することにより、分析においてさまざま な細胞集団を追跡できます。

図6:このCD15-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD15 は顆粒球(青)で発現しているほか、単球(緑)で低レベルで発現しています。

図7:このCD123 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD123は好塩基球および形質細胞様樹状細胞で高レベルで、CD34陽性骨髄 系前駆細胞および単球(緑)で低レベルで発現しています。

図8:このCD117 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD117はCD34陽性骨髄系前駆細胞、初期の前骨髄球、前期赤芽球系前駆細 胞で可変的に、マスト細胞で高レベルに発現します。CD117はまた、反応性NK細 胞および腫瘍性形質細胞のサブセットでも発現しています。成熟顆粒球、単球、 リンパ球はCD117陰性です。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 26 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

すべてのイベントが重要です

M2セルチューブ

図9:このCD13-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD13 は顆粒球(青)、成熟単球(緑)、および可変的に骨髄系前駆細胞で発現しています。

図10:このCD33 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD33は単球(緑)で高レベルで、顆粒球(青)でより低レベルで発現していま す。CD33はまた、好塩基球、NK細胞のサブセット(赤)、CD34陽性骨髄系前駆細 胞のサブセットでも発現しています。

図11:このCD34 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。通常、骨髄芽球、未熟BおよびT 細胞(リンパ芽球)で発現しています。成熟顆粒球、単球、リンパ球はCD34陰性で す。CD34陽性前駆細胞は通常、末梢血の白血球の0.01%未満を表します。

図12:このCD38 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD38は活性化マーカーです。形質細胞では最高レベルで、未熟骨髄・リンパ球 前駆細胞では中レベルで、単球(緑)では低レベルで、活性化成熟リンパ球(赤)で は可変的に低レベルで発現しています。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 27 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M2セルチューブ

図13:このHLA-DR - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。HLA-DRは単球(緑)および形質細胞様樹状細胞など、抗原提示細胞で発現 しています。また、CD34陽性前駆細胞、成熟B細胞(赤、右下)、および活性化T細 胞でも発現しています。

図14:このCD19 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD19は未熟・成熟B細胞(赤、右下)、および多くの形質細胞で発現しています。 これらの細胞は一般的に、低から中程度の側方散乱性を有します。

図15:このCD34-CD117ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD34 は骨髄芽球および初期未熟B前駆細胞で発現しています。CD117は骨髄芽球、 前骨髄球、初期赤血球前駆細胞で発現していますが、初期B前駆細胞では陰性 となります。成熟顆粒球、単球、リンパ球はCD34およびCD117陰性です。CD34お よびCD117陽性前駆細胞は通常、末梢血の白血球の0.01%未満に相当します。

図16:このCD33 - CD13ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD33 およびCD13は単球(緑)、顆粒球(青)、好塩基球、CD34陽性前駆細胞で発現して います。リンパ球(赤)はCD13またはCD33のどちらも発現しません。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 28 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M2セルチューブ

図17:このCD38 - CD34ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD38 は活性化マーカーです。CD38は、可変のCD34を有する系統特異的初期前駆細胞で 一様に発現します。成熟顆粒球、単球、リンパ球はCD34陰性で、可変的なCD38発現 を示します。CD34陽性前駆細胞は通常、末梢血の白血球の0.01%未満を表します。

図18:このHLA-DR - CD34プロットは、すべての生存細胞を示しています。HLA-DR はB細胞、単球(緑)、形質細胞様樹状細胞、およびCD34陽性前駆細胞で発現してい ます。CD34は初期前駆細胞で発現しています。成熟顆粒球、単球、リンパ球はCD34 陰性です。CD34陽性前駆細胞は通常、末梢血の白血球の0.01%未満を表します。

図19:このCD19-CD123ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD19 はB細胞で発現しています。CD123は、好塩基球、形質細胞様樹状細胞、単球(緑) 、およびCD34陽性前駆細胞で発現しています。通常、CD19陽性B細胞(赤、右)は 著しいCD123発現を示しません。成熟過程の顆粒球での明らかなCD19陽性(青) は、主に好酸球による自家蛍光を原因とします。

図20:このCD19 - CD34ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD19 はB細胞で発現しています。CD34は初期前駆細胞で発現しています。成熟顆粒球、 単球、リンパ球はCD34陰性です。CD34陽性前駆細胞は通常、末梢血の白血球の 0.01%未満を表します。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 29 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

すべてのイベントが重要です

M2セルチューブ

図21:このCD38 - CD19ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD38 は、形質細胞および系統特異的初期前駆細胞で一様に発現します。成熟CD19陽 性B細胞はCD38中程度陽性(赤、上)を示します。成熟過程の顆粒球での明らかな CD19陽性(青)は、主に好酸球による自家蛍光を原因とします。

図22:このHLA-DR-CD15ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD15 は顆粒球(青)および単球(緑)で発現しています。HLA-DRはB細胞、単球(緑)、形 質細胞様樹状細胞、およびCD34陽性前駆細胞で発現しています。成熟顆粒球は HLA-DRを発現しません(青)。

図23:このHLA-DR - CD123ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。HLA-DRはB細胞、単球(緑)、形質細胞様樹状細胞、およびCD34陽性前駆細胞 で発現しています。成熟顆粒球はHLA-DRを発現しません(青)。CD123は、好塩基 球、形質細胞様樹状細胞、単球(緑)、およびCD34陽性前駆細胞で発現しています。

図24:このCD19 - CD33ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD19 はB細胞で発現しています(赤、右下)。CD33は単球(緑)および顆粒球(青)によっ て発現します。通常、CD19陽性B細胞はCD33を発現しません。成熟過程の顆粒 球での明らかなCD19陽性(青)は、主に好酸球による自家蛍光を原因とします。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 30 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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フローサイトメトリー免疫表現型検査の結果 フローサイトメトリー免疫表現型検査で、この症例においては免疫表現型的に異常な細胞集団は特定されませんでした。形態学によ り白血球の異常は確認されていません。臨床的、形態的、研究的データとの相関付けが勧告されるとともに、この解析の根拠のみでは 悪性経過を判断できないという点に留意してください。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#1:正常全血 31 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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骨髄 症例#2:正常な骨髄 症例 この37歳の男性は貧血の症状を示しています。骨髄サンプルがClearLLab 10Cパネルを使用したフローサイトメトリー免疫表現型検査 に提出されています。 フローサイトメトリー免疫表現型検査

Bセルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートから除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 32 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

すべてのイベントが重要です

Bセルチューブ

図3:この側方散乱 - 前方散乱ドットプロットは、Singlets(シングレット)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットは、多くの場合に前方散乱を低減した 細胞破片を除外するためのものです。また初期アポトーシス細胞は軽度に側方 散乱を増加させている一方、後期アポトーシス細胞および壊死細胞は可変的に 側方散乱を低減しています。生存細胞はCells(細胞)ゲートに含まれています。

図4:このCD45 -側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示し ています。このプロットは、CD45陽性としてゲーティングされた白血球細胞のさま ざまなサブセットを強調表示するためのものです。CD45陰性集団には通常、赤血 球細胞、血小板凝集塊、組織残屑、または非造血細胞が含まれます。

図5:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、CD45+(CD45+)ゲート内のイベント を示しています。このドットプロットでは、リンパ球(ゲートLy、赤)、単球(ゲートMo、 緑)、顆粒球(ゲートGr、青)など、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに通常見られる 複数の白血球細胞集団を区別できます。CD45dimゲート(紫)は、初期前駆細胞( すなわち、骨髄芽球および未熟B細胞)が通常占める領域をカバーしています。好 塩基球、形質細胞様樹状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に現れる可能性が あります。各ゲートにより構成されるイベントに異なる色を適用することにより、 分析においてさまざまな細胞集団を特定できます。

図6:このCD19 - 側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示 しています。CD19+ゲートはCD19陽性細胞を特定します。CD19は成熟B細胞(オ レンジ)、未熟B細胞(紫)、および多くの形質細胞で発現しています。これらの細 胞は一般的に、低から中程度の側方散乱性を有します。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 33 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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Bセルチューブ

図7:このカッパ - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。 表面カッパ軽鎖は成熟B細胞(オレンジ)および後期未熟B細胞で発現していま す。カッパ陽性B細胞の割合は通常、カッパ陰性(ラムダ陽性)B細胞よりも多い です。免疫グロブリンのFc受容体介在性結合により、明らかなカッパ陽性が単球 (緑)に確認されます。カッパ軽鎖陽性細胞はプロットの右側に示されています。

図8:このラムダ-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。表 面ラムダ軽鎖は成熟B細胞(オレンジ)および後期未熟B細胞で発現しています。ラ ムダ陽性B細胞は通常、ラムダ陰性(カッパ陽性)B細胞よりも小さいです。免疫グロ ブリンのFc受容体介在性結合により、明らかなラムダ陽性が単球(緑)に確認され ます。ラムダ軽鎖陽性細胞はプロットの右側に示されています。

図9:このCD10-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD10 は未熟B細胞(紫)、成熟胚中心B細胞、および成熟顆粒球(青)で発現しています。リ ンパ球系細胞の側方散乱は低いのに対し、顆粒球は高い側方散乱性を有します。

図10:このCD5-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD5 は成熟・未熟T細胞で発現するとともに、成熟B細胞(オレンジ)のサブセットでわず かに発現します。これらのリンパ球系細胞は一般的に、低い側方散乱性を有します。

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Bセルチューブ

図11:このCD200 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD200は通常B細胞で発現しますが、一部の新生B細胞では陰性となります。 慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫(通常はCD200陽性)とマントル細胞 リンパ腫(通常はCD200陰性)を区別するのに特に有用です。

図12:このCD34 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。造血幹細胞、初期骨髄系前駆細 胞(骨髄芽球)、未熟B細胞およびT細胞(リンパ芽球)で発現しています。一般的に CD34陽性前駆細胞はCD45dimゲート(紫)内で低から中程度の側方散乱性を有 し、未熟B前駆細胞は未熟骨髄系前駆細胞よりも低い側方散乱性を有しています。

図13:このCD38 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD38は活性化マーカーです。形質細胞では最高レベルで、未熟骨髄・リンパ 球前駆細胞(紫)では中レベルで、単球(緑)では低レベルで、活性化成熟リンパ 球(赤)では可変的に低レベルで発現しています。CD34陽性造血幹細胞は、可変 的に低レベルでCD38を発現するか、発現しません。

図14:このCD20-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD20 は成熟B細胞(オレンジ)で発現しているとともに、成熟T細胞のサブセットで可変 的に低レベルで発現しています。後期未熟B細胞では可変的に発現します。CD20陽 性細胞は通常、低い側方散乱のリンパ球ゲート内にあります。

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Bセルチューブ

図15:このラムダ - カッパドットプロットは、すべてのCD19+細胞を示しています。 初期未熟B細胞(紫)は表面免疫グロブリン軽鎖(すなわち、カッパまたはラムダ 軽鎖のいずれかが陰性)を発現しません。成熟B細胞はポリクローナルであり、 カッパまたはラムダ軽鎖のいずれかを発現します。通常のカッパ/ラムダ比は1.4 です(1~2の範囲)。付着性の血漿中免疫グロブリンによりバックグラウンドが高 くなることは一般的です。

図16:このCD19 - CD20ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。成熟B細胞はCD19およびCD20の両方を発現します(オレンジ)。未 熟B細胞はCD19を発現するほか、可変的に低レベルでCD20を発現します。一部の 新生B細胞は、低下したCD19またはCD20発現を示すことがあります。

図17:このCD19 - CD10ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。B細胞はCD19陽性です(オレンジ)。CD10陽性成熟B細胞はリン パ節の胚中心に分散しており、後期未熟B細胞の小さなサブセットは末梢血と骨 髄液に存在します。一般的に未熟B細胞はCD10陽性ですが、大部分はCD45dim ゲート内で確認されます。

図18:このCD38 - CD10ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。CD38は、形質細胞では高レベルで、未熟B細胞では中レベルに、胚 中心B細胞では低レベルで発現しています。多くの成熟B細胞はCD38は低レベル か陰性です。T細胞(赤)は活性状態に応じて可変的なCD38発現を示します。少数 のCD10陽性およびCD38中程度陽性の細胞は、リンパ球ゲート内で後期未熟B細 胞を示しますが、多くの未熟B細胞はCD45dimゲート内にあります。

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Bセルチューブ

図19:このCD20 - CD10ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。多くの成熟B細胞は一様に高レベルのCD20を発現します。CD20 が可変的に低減された希少なCD10陽性B細胞は、後期未熟B細胞を示します。

図20:このCD19 - CD5ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。CD5は正常な成熟B細胞のサブセットでは低レベルで可変的に発 現し、新生B細胞の一部のサブタイプで発現しています。

図21:このCD20 - CD200ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細 胞を示しています。多くの成熟B細胞は低レベルから中レベルでCD200を発現し ます(オレンジ)。

図22:このCD5 - CD200ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。多くの成熟B細胞は通常、CD200を発現し、可変的にCD5を発現 するサブセットを伴います。慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫の新生B 細胞は通常CD5およびCD200を発現する一方、マントル細胞リンパ腫はCD5のみ を発現し、CD200を発現しません。

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Tセルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートから除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

図3:この側方散乱 - 前方散乱ドットプロットは、Singlets(シングレット)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットは、多くの場合に前方散乱を低減した 細胞破片を除外するためのものです。また初期アポトーシス細胞は軽度に側方 散乱を増加させている一方、後期アポトーシス細胞および壊死細胞は可変的に 側方散乱を低減しています。生存細胞はCells(細胞)ゲートに含まれています。

図4:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示 しています。このプロットは、CD45陽性としてゲーティングされた白血球細胞のさ まざまなサブセットを強調表示するためのものです。CD45陰性集団(灰色)には通 常、赤血球細胞、血小板凝集塊、組織残屑、非造血細胞が含まれます。

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Tセルチューブ

図5:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、CD45+(CD45+)ゲート内のイベント を示しています。このドットプロットでは、リンパ球(ゲートLy、赤/水色)、単球(ゲー トMo、緑)、顆粒球(ゲートGr、青)など、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに通常見 られる複数の白血球細胞集団を区別できます。CD45dimゲート(紫)は、骨髄芽球 および未熟B細胞が通常占める領域をカバーしています。好塩基球、形質細胞様 樹状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に現れる可能性があります。各ゲートに より構成されるイベントに異なる色を適用することにより、分析においてさまざま な細胞集団を特定できます。

図6:このCD3 -側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD3+ ゲートは、表面CD3発現を示す細胞を特定します(水色)。CD3はT細胞に対し非常 に特異的であり、成熟T細胞および後期未熟T細胞の表面でのみ発現しています。 これらの細胞は一般的に、低から中程度の側方散乱性を有します。

図7:このTCRγδ - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。TCRγδはT細胞受容体のサブタイプであり、細胞傷害性T細胞(水色)の小さ なサブセットで発現しています。

図8:このCD4 -側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD4 は未熟・成熟T細胞のサブセットで高レベルに発現しています(水色)。CD4はCD4+T 細胞よりも低いレベルで単球性細胞(緑)でも発現しています。また、骨髄の多系統 の未熟前駆細胞でも低レベルに発現します。

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Tセルチューブ

図9:このCD2 -側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD2 は、ほぼすべての未熟・成熟T細胞により発現する抗原です(水色)。また、CD2はNK 細胞で発現し(赤、右下)、単球で低レベルで発現しています(緑)。

図10:このCD56 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD56はNK細胞の大きなサブセット(赤)、NK活性を示すT細胞(NK/T細胞)、お よび多くのガンマ/デルタT細胞(水色)で正常に発現しています。CD56はまた、反応 性および腫瘍性の状態の両方において単球性細胞(緑)で部分的に発現します。

図12:このCD34 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。造血幹細胞、初期骨髄系前駆細 胞(骨髄芽球)、未熟B細胞およびT細胞(リンパ芽球)で発現しています。一般的に CD34陽性前駆細胞はCD45dimゲート(紫)内で低から中程度の側方散乱性を有 し、未熟B前駆細胞は未熟骨髄系前駆細胞よりも低い側方散乱性を有しています。

図11:このCD5-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD5 は多くの未熟・成熟T細胞で発現し(水色)、成熟B細胞のサブセットで低レベルで発 現しています。最も初期段階の未熟T細胞およびガンマ/デルタT細胞は通常、CD5発 現が非常に低いか、発現しません。NK細胞の小さなサブセットはCD5を発現します。

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Tセルチューブ

図13:このCD7-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD7 はT細胞発生の初期段階において未熟T細胞で発現し、T細胞成熟の過程におい て成熟T細胞で可変的に発現します(水色)。また、NK細胞で一様に発現し(赤)、 形質細胞様樹状細胞のサブセット、および系統特異的CD34陽性前駆細胞のサブ セットでわずかに発現します。

図14:このCD8-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD8 は未熟・成熟T細胞のサブセット(水色)で発現し、細胞傷害性成熟T細胞集団を定 義します。NK細胞およびガンマ/デルタT細胞に低レベルで可変的に発現します。

図15:このCD3 - CD56ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。T細胞は、すべての成熟T細胞に存在し、その他の系統の細胞によっ て発現しないため、CD3発現により定義されます。NK細胞は本質的に表面CD3を 発現しませんが、大きなサブセットでCD56は発現します(赤、左上)。特にNK活性 を示すT細胞(NK/T細胞)およびガンマ/デルタT細胞など、成熟T細胞の小さなサ ブセットもCD56を発現します。

図16:このCD5 - CD3ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示 しています。CD3およびCD5は多くの成熟T細胞で共発現しますが(水色)、大きな顆 粒性リンパ球形態を有する細胞傷害性T細胞の小さなサブセットは多くの場合に CD5の発現が低いかまったく発現しません。CD5は多くのNK細胞で発現しません。

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Tセルチューブ

図17:このCD7 - CD2ドットプロットは、リンパ球ゲート内のすべての細胞を示し ています。CD2およびCD7は大多数の成熟T細胞(水色)およびNK細胞(赤、右 上)で共発現します。

図18:このCD8 - CD4ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。CD3陽性T細胞(水色)には、CD4陽性(ヘルパー)およびCD8陽性 (細胞傷害性)サブセットが含まれます。CD4陽性T細胞は多くの場合CD8陽性T 細胞よりも多く、末梢血のCD4/CD8比は1:1~4:1です。ときにCD4およびCD8の 二重陰性または二重陽性T細胞が存在することもあります。二重陰性T細胞は通 常、主にガンマ/デルタT細胞で構成されています。注目すべきは、CD4陽性であ るもののCD3陰性の細胞(赤、左中)が、リンパ球ゲート内の単球であるというこ とです。これは、CD45 - 側方散乱ゲーティングだけでは、純粋にリンパ球を確認 できないことを示しています。

図19:このCD3 - CD4ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を 示しています。すべてのCD4陽性T細胞はCD3を発現します。単球および形質細 胞様樹状細胞は、CD4陽性T細胞よりも低いレベルでCD4を発現しますが、CD3 発現は欠損しています。NK細胞はCD3およびCD4発現の両方が欠損しています。

図20:このCD3 - CD8ドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示 しています。すべてのCD8陽性T細胞はCD3(水色)を発現します。NK細胞の小さな サブセットも、CD3なしでCD8(赤、左上)を発現します。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 42 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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Tセルチューブ

図21:このCD3 - TCRγδドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞 を示しています。T細胞の小さなサブセットはTCRガンマ/デルタを発現します。こ れはCD3と共発現されます。CD3およびTCRとの強い直線関係は、1:1の固定比 を有するヘテロダイマー複合体としてそれらが存在しているためであり、したが って一方の発現が高まれば、他方の発現も高まります。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 43 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートに除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

図3:この側方散乱 - 前方散乱ドットプロットは、Singlets(シングレット)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットは、多くの場合に前方散乱を低減した 細胞破片を除外するためのものです。また初期アポトーシス細胞は軽度に側方 散乱を増加させている一方、後期アポトーシス細胞および壊死細胞は可変的に 側方散乱を低減しています。生存細胞はCells(細胞)ゲートに含まれています。

図4:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示 しています。このプロットは、CD45陽性としてゲーティングされた白血球細胞のさ まざまなサブセットを強調表示するためのものです。CD45陰性集団(灰色)には通 常、赤血球細胞、血小板凝集塊、組織残屑、非造血細胞が含まれます。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 44 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図5:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、CD45+(CD45+)ゲート内のイベント を示しています。このドットプロットでは、リンパ球(ゲートLy、赤)、単球(ゲートMo、 緑)、顆粒球(ゲートGr、青)など、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに通常見られる 複数の白血球細胞集団を区別できます。CD45dimゲート(紫)は、初期前駆細胞( すなわち、骨髄芽球および未熟B細胞)が通常占める領域をカバーしています。好 塩基球、形質細胞様樹状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に現れる可能性が あります。各ゲートにより構成されるイベントに異なる色を適用することにより、 分析においてさまざまな細胞集団を特定できます。

図6:このCD16-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD16 は成熟顆粒球で最高レベルで発現し、後骨髄球および杆状核球で可変的により低 レベルで発現しています(青)。多くのNK細胞はCD16(赤)を発現し、活性化単球( 緑)のサブセットも同様です。

図7:このCD7 -側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD7 はT細胞発生の初期段階において未熟T細胞で発現し、T細胞成熟の過程におい て持続し、成熟T細胞で可変的に発現します(赤)。また、NK細胞で一様に発現し( 赤)、形質細胞様樹状細胞のサブセット、および系統特異的前駆細胞のサブセット でわずかに発現します(紫)。

図8:このCD10-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD10 は未熟B細胞(紫)、成熟胚中心B細胞、および成熟顆粒球(青)で発現しています。リ ンパ球系細胞の側方散乱は低いのに対し、顆粒球は高い側方散乱性を有します。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 45 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

すべてのイベントが重要です

M1セルチューブ

図9:このCD13-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD13 は成熟段階に応じて濃度が異なる、成熟過程の顆粒球で発現しています(青)。前 骨髄球で可変的に高レベルで発現するほか、骨髄球で低レベルに発現し、顆粒球 へと成熟するにつれ発現が高まり、顆粒球で高レベルに発現しています。CD13は 成熟単球(緑)では高レベルで、未熟単球では低レベルで発現し、骨髄系前駆細胞 (紫)では可変的に発現します。

図10:このCD64 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD64は成熟・未熟単球で最高レベルで発現し(緑)、前骨髄球および骨髄球 で若干低いレベルで発現しています(青)。CD64は静止期の成熟顆粒球(青)で はあまり発現していませんが、顆粒球活性化により発現が高まります。CD64はリ ンパ球系細胞または多くのCD34+前駆細胞では発現しません。

図11:このCD34 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。造血幹細胞、初期骨髄系前駆細 胞(骨髄芽球)、未熟B細胞およびT細胞(リンパ芽球)で発現しています。一般的に CD34陽性前駆細胞はCD45dimゲート(紫)内で低から中程度の側方散乱性を有 し、未熟B前駆細胞は未熟骨髄系前駆細胞よりも低い側方散乱性を有しています。

図12:このCD14 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD14は成熟単球(緑)で高レベルで、未熟単球で可変的に低レベルで発現し ています。CD14はまた、成熟顆粒球で低レベルで発現しています。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 46 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図13:このHLA-DR - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。HLA-DRは単球(緑)および形質細胞様樹状細胞など、抗原提示細胞で発現 しています。また、CD34+陽性前駆細胞(紫)、成熟(赤、右下)・未熟(紫)B細胞、 および活性化T細胞(赤)でも発現しています。

図14:このCD11b - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD11bは後期の前骨髄球段階に始まる成熟過程の顆粒球(青)と、単球(緑)で発 現しています。CD11bはまた、NK細胞(赤)および好塩基球(紫)でも発現しています。

図15:このCD11b-CD16ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD11b は単球(緑)、成熟過程の顆粒球(青)、NK細胞(赤)、および好塩基球(紫)で発現 しています。CD16は成熟過程の顆粒球(青)、およびNK細胞のサブセット(赤)で 発現しています。顆粒球成熟の間は多くの前骨髄球でCD11bとCD16(青、左下) が欠損しており、骨髄球へと成熟するにつれてCD11bを獲得します(青、右下)。 次にCD16は低レベルで後骨髄球で取得され、成熟顆粒球へと成熟するにつれ て徐々に増加し、成熟顆粒球で最高レベルで発現しています。

図16:このCD16 - CD13ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD13 は成熟過程の顆粒球(青)、単球(緑)、好塩基球、およびCD34陽性前駆細胞(紫) で発現しています。CD16は成熟過程の顆粒球(青)、およびNK細胞のサブセット (赤)で発現しています。顆粒球成熟の間はCD16なしでCD13が前骨髄球によっ て可変的に発現し(青、左)、骨髄球へと成熟するにつれてCD13は消失していき ます(青、左下)。その一方で骨髄球は次に、CD16が少ない後骨髄球から、高い CD13およびCD16発現を示す成熟顆粒球へと成熟する過程で、CD13とCD16を 同時に獲得します(青、右上)。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 47 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

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M1セルチューブ

図17:このCD13 - CD34ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD13 は成熟過程の顆粒球(青)、単球(緑)、好塩基球、およびCD34陽性前駆細胞(紫) で発現しています。CD34は初期造血前駆細胞で発現しています。CD13はCD34陽 性B前駆細胞(紫)または成熟リンパ球系細胞(赤)ではあまり発現していません。

図18:このCD14 - CD64ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD64 は単球(緑)で高レベルで、成熟過程の顆粒球(青)で低レベルで発現していま す。CD14は成熟単球で高レベルで、成熟顆粒球(青)で低レベルで発現していま す。未熟単球はCD14なしで高いCD64発現を示し(青、左上)、高レベルのCD64を 保持しつつ、成熟単球へと成熟する過程でCD14を徐々に獲得します(緑)。未熟顆 粒球はCD14なしで中程度のCD64発現を示し(青、左)、成熟顆粒球への過程にお いてCD14を獲得してCD64を失います(青、下)。

図19:このHLA-DR-CD10ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。HLA- DRは単球、B細胞、形質細胞様樹状細胞、CD34陽性前駆細胞(紫)で発現していま す。CD10は成熟顆粒球(青)および未熟B細胞(紫)により発現します。未熟B細胞 はCD10およびHLA-DR(紫)の両方を発現します。

図20:このCD7 - CD13ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD7 はT細胞およびNK細胞で発現しています(赤)。CD13は成熟過程の顆粒球(青)、 単球(緑)、好塩基球、およびCD34陽性前駆細胞(紫)で発現しています。一般的 にCD13とCD7の共発現は見られません。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 48 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

すべてのイベントが重要です

M2セルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートに除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

図3:この側方散乱 - 前方散乱ドットプロットは、Singlets(シングレット)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットは、多くの場合に前方散乱を低減した 細胞破片を除外するためのものです。また初期アポトーシス細胞は軽度に側方 散乱を増加させている一方、後期アポトーシス細胞および壊死細胞は可変的に 側方散乱を低減しています。生存細胞はCells(細胞)ゲートに含まれています。

図4:このCD45 -側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを示し ています。このプロットは、CD45陽性としてゲーティングされた白血球細胞のさま ざまなサブセットを強調表示するためのものです。CD45陰性集団には通常、赤血 球細胞、血小板凝集塊、組織残屑、または非造血細胞が含まれます。

目次 > 異常免疫表現型なし > 症例#2:正常な骨髄 49 Beckman Coulter • ClearLLab 10Cパネル • C33370 AB

すべてのイベントが重要です

M2セルチューブ

図5:このCD45 - 側方散乱ドットプロットは、CD45+(CD45+)ゲート内のイベン トを示しています。このドットプロットでは、リンパ球(ゲートLy、赤)、単球(ゲート Mo、緑)、顆粒球(ゲートGr、青)など、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに通常見 られる複数の白血球細胞集団を区別できます。CD45dimゲート(紫)は、骨髄芽 球および未熟B細胞が通常占める領域をカバーしています。好塩基球、形質細胞 様樹状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に現れる可能性があります。各ゲート により構成されるイベントに異なる色を適用することにより、分析においてさまざ まな細胞集団を特定できます。

図6:このCD15-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD15 は骨髄単球成熟への早期の関与の段階から、未熟・成熟顆粒球(青)で発現してい ます。CD15はまた、単球(緑)でも低レベルで発現しています。

図7:このCD123 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD123は好塩基球および形質細胞様樹状細胞で高レベルで(紫)、CD34陽性 骨髄系前駆細胞(紫)および単球(緑)で低レベルで発現しています。

図8:このCD117 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD117はCD34+骨髄系前駆細胞、初期の前骨髄球、前期赤芽球系前駆細胞 で可変的に発現し、マスト細胞(青、右)で高レベルに発現しています。CD117は また、反応性NK細胞および腫瘍性形質細胞のサブセットでも発現しています。

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図9:このCD13-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD13 は成熟段階に応じて濃度が異なる、成熟過程の顆粒球で発現しています(青)。前 骨髄球で可変的に高レベルで発現するほか、骨髄球で低レベルに発現し、顆粒球 へと成熟するにつれ発現が高まり、顆粒球で高レベルに発現しています。CD13は 成熟単球(緑)では高レベルで、未熟単球では低レベルで発現し、骨髄系前駆細胞 (紫)では可変的に発現します。

図10:このCD33-側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD33 は未熟・成熟単球(緑)で高レベルで、未熟顆粒球(青)で若干低いレベルで、成熟 顆粒球(青)で最低レベルで発現しています。CD33はまた、好塩基球、NK細胞のサ ブセット(赤)、CD34陽性骨髄系前駆細胞のサブセット(紫)でも発現しています。

図11:このCD34 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。造血幹細胞、初期骨髄系前駆細 胞(骨髄芽球)、未熟B細胞およびT細胞(リンパ芽球)で発現しています。一般的に CD34陽性前駆細胞はCD45dimゲート(紫)内で低から中程度の側方散乱性を有 し、未熟B前駆細胞は未熟骨髄系前駆細胞よりも低い側方散乱性を有しています。

図12:このCD38 - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。CD38は活性化マーカーです。形質細胞では最高レベルで、未熟骨髄・リンパ 球前駆細胞(紫)では中レベルで、単球(緑)では低レベルで、活性化成熟リンパ 球(赤)では可変的に低レベルで発現しています。CD34陽性造血幹細胞は、可変 的に低レベルでCD38を発現するか、発現しません。

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図13:このHLA-DR - 側方散乱ドットプロットは、すべての生存細胞を示していま す。HLA-DRは単球(緑)および形質細胞様樹状細胞など、抗原提示細胞で発現し ています。また、CD34陽性前駆細胞(紫)、成熟(赤)・未熟(紫)B細胞、および活性 化T細胞(赤)でも発現しています。

図14:このCD19 - 側方散乱ドットプロットは、Cells(細胞)ゲート内のイベントを 示しています。CD19+ゲートはCD19陽性細胞を特定します。CD19は成熟・未熟B 細胞、および多くの形質細胞で発現しています。これらの細胞は一般的に、低か ら中程度の側方散乱性を有します。

図15:このCD33 - CD13ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD33 およびCD13は単球(緑)、成熟過程の顆粒球(青)、好塩基球、およびCD34陽性前 駆細胞(紫)で発現しています。単球は、一様に高レベルでCD33を、より可変的に CD13を発現します。未熟顆粒球は、より成熟した顆粒球(青、左)と比較し、より高 レベルでCD33、低レベルでCD13(青、下)を発現します。リンパ球は概して、CD13 またはCD33のどちらも発現しません(赤)。

図16:このCD38 - CD34ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD38 は、可変のCD34を有する系統特異的初期前駆細胞で一様に発現します(紫)。造 血幹細胞は最高レベルのCD34を有し、CD38(紫、このサンプルでは多くない)は 可変的に減少しています。形質細胞による明確で可変的なCD34発現(紫、一番 右)は、可視範囲のスケールに収まらない極度に高レベルのCD38による補正ア ーチファクトです。

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図17:このCD19 - CD33ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD19 はB細胞により発現しています(赤および紫)。CD33は単球(緑)および成熟過程 の顆粒球(青)によって発現します。B細胞は通常、著しいCD33発現を示しませ ん。成熟過程の顆粒球での明らかなCD19陽性(青)は、主に好酸球による自家 蛍光を原因とします。

図18:このHLA-DR - CD34プロットは、すべての生存細胞を示しています。HLA-DR はB細胞、単球(緑)、形質細胞様樹状細胞、およびCD34陽性前駆細胞(紫)で発 現しています。CD34は初期前駆細胞で発現しています。初期前駆細胞はCD34 およびHLA-DR(紫)の両方を可変的に発現し、初期単球(紫、右)に高レベルの HLA-DRが確認されます。

図19:このCD19-CD123ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD19 はB細胞により発現します。CD123は好塩基球、形質細胞様樹状細胞、単球(緑)、 およびCD34+前駆細胞(紫)により発現しています。通常、CD19陽性B細胞は著し いCD123発現を示しません。CD123陽性好塩基球および形質細胞様樹状細胞は CD19を発現しません。成熟過程の顆粒球での明らかなCD19陽性(青)は、主に好 酸球による自家蛍光を原因とします。

図20:このCD19 - CD34ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD19 はB細胞により発現します。CD34は初期前駆細胞で発現しています。初期未熟B細 胞はCD19およびCD34の両方に対し陽性であり、後期のB細胞はCD34を発現しま せん。CD34陽性骨髄系前駆細胞はCD19を発現しません。

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図21:このCD38 - CD19ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD38 は、形質細胞および系統特異的初期前駆細胞で一様に発現します(紫)。このサン プルのほとんどの前駆細胞は、CD19陽性でCD38中程度陽性(紫)のB前駆細胞で す。成熟CD19+B細胞はより低いレベルのCD38発現(上の赤)を示します。形質細 胞は、スケールから大きく外れた極度に高レベルのCD38発現を示しますが(紫、一 番右)、可変的なCD19発現も示しています。成熟過程の顆粒球での明らかなCD19 陽性(青)は、主に好酸球による自家蛍光を原因とします。

図22:このHLA-DR-CD15ドットプロットは、すべての生存細胞を示しています。CD15 は成熟過程の顆粒球(青)および単球(緑)により発現します。HLA-DRはB細胞、 単球(緑)、形質細胞様樹状細胞、およびCD34陽性前駆細胞(紫)で発現していま す。成熟過程の顆粒球は、CD15を獲得している過程の最初期の形態を除き、HLA- DR(青)を発現しません。CD34陽性骨髄系前駆細胞(紫)はHLA-DRを発現します が、CD15の発現は一時的です。

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フローサイトメトリー免疫表現型検査の結果 フローサイトメトリー免疫表現型検査で、この症例においては免疫表現型的に異常な細胞集団は特定されませんでした。臨床的、研究 的データとの相関付けが勧告されるとともに、この解析の根拠のみでは悪性経過を判断できないという点に留意してください。形態学、 免疫組織化学的、細胞遺伝学の所見により、造血器腫瘍が存在しないことが確認されます。

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リンパ節 症例#3:正常なリンパ節 症例 この53歳の女性は腫瘤/病変の症状を示しています。リンパ節生検サンプルがClearLLab 10Cパネルを使用したフローサイトメトリー免 疫表現型検査に提出されています。 フローサイトメトリー免疫表現型検査

Bセルチューブ

図1:このTime(時間) - CD45ドットプロットはゲーティングされておらず、連続的 に収集されたすべてのイベントを示しています。このプロットは、サンプル取得中 の流体不安定性を評価することを目的としています。安定的な取得は、長期に おけるイベントの一様のパターンで表されます。一定のパターンから外れたイベ ントはTime(時間)ゲートに除外できます。

図2:FS INT(FS INT) - FS PEAK(FSピーク)ドットプロットは、Time(時間)ゲート 内のイベントを示しています。このプロットはダブレット(細胞凝集)や細胞集合体 を除外するためのものです。シングレット(対象細胞)イベントはINT(INT) - PEAK( ピーク)の直線関係を示し、Singlets(シングレット)ゲートに含まれる一方、ダブレ ットは直線関係の外側に位置します。

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