ClearLLab 10C - BG - Българска версия

КОМБИНАЦИИ ОТ СЕ АНТИТЕЛА ЗА АНАЛИЗ НА ЛЕВКЕМИЯ/ЛИМФОМ* П АНЕЛИ C LEAR LL AB 10C

СПРАВОЧНИК

Всяко събитие е от значение * Само за неходжкинов лимфом

1

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

СЪДЪРЖАНИЕ

ВЪВЕДЕНИЕ......................................................................................3 ОБЩИ ПОЛОЖЕНИЯ......................................................................3 ОБЩОПРИЕТИ ПРЕПОРЪКИ ЗА ИМУНОФЕНОТИПИЗИРАНЕ........................................................4 ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ НА ПАНЕЛИТЕ CLEARLLAB 10C................4 ПАНЕЛИ CLEARLLAB 10C...............................................................4 НАБОР ЗА КОМПЕНСАЦИЯ CLEARLLAB.....................................5 ИЗБОР И ИНТЕРПРЕТИРАНЕ НА СЛУЧАЙ................................5 СВЪРЗАНИ ДОКУМЕНТИ..............................................................6 БИБЛИОГРАФИЯ.............................................................................6 СЛУЧАИ............................................................................................. 7 НЯМА ИМУНОФЕНОТИПНА АБНОРМНОСТ............................ 7 ПЕРИФЕРНА ЦЯЛОСТНА КРЪВ.....................................................7 Случай № 1: Нормална цялостна кръв.......................... 7 КОСТЕН МОЗЪК...............................................................................32 Случай № 2: Нормален костен мозък...........................32 ЛИМФЕН ВЪЗЕЛ..............................................................................56 Случай № 3: Нормален лимфен възел.........................56 НЕОПЛАСТИЧЕН ПРОЦЕС ОТ В-КЛЕТЪЧЕН ПРОИЗХОД.....80 В-ЛИМФОБЛАСТНА ЛЕВКЕМИЯ/ ЛИМФОБЛАСТЕН ЛИМФОМ......................................................80 Случай № 4: В-клетъчна остра лимфобластна левкемия/лимфобластен лимфом.................................80 В-ЛИМФОБЛАСТНА ЛЕВКЕМИЯ/ ЛИМФОБЛАСТЕН ЛИМФОМ.................................................... 105 Случай № 5: В-клетъчна остра лимфобластна левкемия/лимфобластен лимфом.............................. 105 ХРОНИЧНА ЛИМФОЦИТНА ЛЕВКЕМИЯ/МАЛЪК ЛИМФОЦИТЕН ЛИМФОМ......................................................... 130 Случай № 6: Хронична лимфоцитна левкемия/ малък лимфоцитен лимфом.......................................... 130 ХРОНИЧНА ЛИМФОЦИТНА ЛЕВКЕМИЯ/МАЛЪК ЛИМФОЦИТЕН ЛИМФОМ......................................................... 154 Случай № 7: Хронична лимфоцитна левкемия/ малък лимфоцитен лимфом.......................................... 154 МАНТИЙНО КЛЕТЪЧЕН ЛИМФОМ........................................ 178 Случай № 8: Мантийно клетъчен лимфом.............. 178 ПЛАЗМОКЛЕТЪЧЕН МИЕЛОМ.................................................202 Случай № 9: Плазмоклетъчен миелом..................... 202 ФОЛИКУЛЯРЕН ЛИМФОМ........................................................226 Случай № 10: Фоликулярен лимфом.......................... 226

В-КЛЕТЪЧЕН ЛИМФОМ С ПРОИЗХОД ГЕРМИНАТИВНИЯ ЦЕНТЪР.......................................................250 Случай № 11: В-клетъчен лимфом с произход герминативния център................................................... 250 ЛИМФОМ ОТ ЗРЕЛИ В-КЛЕТКИ..............................................274 Случай № 12: Лимфом от зрели В-клетки................ 274 ЛИМФОМ ОТ ЗРЕЛИ В-КЛЕТКИ..............................................298 Случай № 13: Лимфом от зрели В-клетки................ 298 НЕОПЛАСТИЧЕН ПРОЦЕС ОТ Т-КЛЕТЪЧЕН ПРОИЗХОД....322 Т-ЛИМФОБЛАСТНА ЛЕВКЕМИЯ/ЛИМФОБЛАСТЕН ЛИМФОМ.........................................................................................322 Случай № 14: Т-клетъчна лимфобластна левкемия/Т-клетъчен лимфобластен лимфом....... 322 Т-ЛИМФОБЛАСТНА ЛЕВКЕМИЯ/ЛИМФОБЛАСТЕН ЛИМФОМ........................................................................................ 346 Случай № 15: Т-клетъчна лимфобластна левкемия/Т-клетъчен лимфобластен лимфом....... 346 Т-ЕДРОКЛЕТЪЧЕН ЛИМФОМ С ГРАНУЛАРНА СТРУКТУРА.......................................................................................370 Случай № 16: Т-клетъчни лимфопролиферативни нарушения......................... 370 Т-ЕДРОКЛЕТЪЧЕН ЛИМФОМ С ГРАНУЛАРНА СТРУКТУРА...................................................................................... 394 Случай № 17: Т-клетъчни лимфопролиферативни нарушения......................... 394 НЕОПЛАСТИЧЕН ПРОЦЕС ОТ МИЕЛОИДЕН ПРОИЗХОД.........................................................418 ОСТРА МИЕЛОИДНА ЛЕВКЕМИЯ...........................................418 Случай № 18: Остра миелоидна левкемия............. 418 ОСТРА МИЕЛОИДНА ЛЕВКЕМИЯ.......................................... 442 Случай № 19: Остра моноцитна левкемия............. 442 ОСТРА МИЕЛОИДНА ЛЕВКЕМИЯ.......................................... 466 Случай № 20: Остра миелоидна левкемия – NOS.................................................................. 466 ОСТРА МИЕЛОИДНА ЛЕВКЕМИЯ.......................................... 490 Случай № 21: Остра промиелоцитна левкемия... 490 ОСТРА МИЕЛОИДНА ЛЕВКЕМИЯ........................................... 514 Случай № 22: Остра моноцитна левкемия............. 514 МИЕЛОДИСПЛАСТИЧЕН СИНДРОМ....................................538 Случай № 23: Миелодиспластичен синдром......... 538 МИЕЛОДИСПЛАСТИЧЕН СИНДРОМ....................................562 Случай № 24: Миелодиспластичен синдром......... 562

Всяко събитие е от значение

2

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

ВЪВЕДЕНИЕ Този справочник е създаден да подпомага анализа на данните от поточно-цитометрично имунофенотипизиране, генерирани от панели ClearLLab 10C на Beckman Coulter с реактиви, маркирани със CE-IVD, за анализ на левкемия и лимфомна поточни цитометри Navios и Navios EX на Beckman Coulter. Включени са случаи на проби с характеристични находки, типични за различни лимфоидни и миелоидни неоплазми, както и случаи от пациенти с клинични и/или лабораторни находки, които предполагат основен неопластичен процес, но при които не се идентифицира имунофенотипна абнормност. Видовете образци включват периферна цялостна кръв, костен мозък и лимфни възли. Всеки случай включва клинична карта, която описва демографските данни на пациента и клиничната история, специфични за случая файлове с данни listmode за повторен анализ от потребителя на този справочник, протоколи за анализ, специфични за ClearLLab 10C, които да бъдат използвани с listmode данните, и отчет, показващ анализа с предоставените протоколи. Всеки отчет включва бележки по анализа, които маркират имунофенотипните находки, както и потенциални грешки. ЗАБЕЛЕЖКА: Примерите в справочника се предоставят само с илюстративна цел и може би не всички категории от хематолимфоидните неоплазми са представени, нито всички възможни имунофенотипни варианти са описани или демонстрирани. ОБЩИ ПОЛОЖЕНИЯ Поточно-цитометричното имунофенотипизиране установява наличието и липсата на специфични антигени за всяка отделна клетка, налична в образеца. Когато се разглеждат заедно, тези резултати генерират профил на имунофенотип за всяка клетка, който е или съответстващ с този на очаквана популация (т.е. нормален), или несъответстващ с този на очаквана популация (т.е. аберантен) в този вид проба. Когато се анализират проби от пациенти, суспектни на хематолимфоидни злокачествени заболявания, се изпълняват няколко стъпки 1 : • Оценка на всички клетъчни популации в пробата. • Оценяване на всяка клетъчна популация като „нормална“ или „аберантна“. • Подробно характеризиране на аберантната популация според наличието или липсата на антигени, както и повишен или понижен интензитет на оцветяване от флуорохром-белязани антитела. • Интерпретирането на аберантния имунофенотип, като включва, когато е налична, допълнителна информация, например клинична анамнеза, хистология, цитология, имунохистохимия и генотипни изследвания, например in situ хибридизация, кариотипизиране и молекулярно диагностициране.

Всяко събитие е от значение

3

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

ОБЩОПРИЕТИ ПРЕПОРЪКИ ЗА ИМУНОФЕНОТИПИЗИРАНЕ

Общоприетите препоръки за поточно-цитометрично имунофенотипизиране на проби от пациенти с известни или суспектни хематолимфоидни злокачествени заболявания възникнаха в последните две десетилетия и бяха публикувани няколко указания в научната литература. От 2008 г. поточно-цитометричното имунофенотипизиране е включено в класификацията на СЗО за тумори на хематопоетичните и лимфоидните тъкани 2 . Медицински индикации и валидиране на поточно-цитометричен анализ, включващ данни от преданалитичен, аналитичен и постаналитичен етап на тестването, са разгледани в Bethesda International Consensus Conference recommendations (Препоръки на Международната консесусна конференция в Бетезда) праз 2006 г. 3,4,5 , както и в практическите указания на ICSH/ICCS за клетъчно базирани флуоресцентни анализи 6,7,8 . ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ НА ПАНЕЛИТЕ ClearLLab 10C Панелите на ClearLLab 10C са предназначени за използване при ин витро диагностика за качествена идентификация на клетъчни популации чрез мултипараметрично имунофенотипизиране в поточни цитометри Navios и Navios EX. Тези реактиви се използват като помощно средство в диференциалната диагностика на пациенти с хематологични абнормности със или със съмнение за следните хематопоетични неоплазми: хронична левкемия, остра левкемия, Неходжкинов лимфом, миелом, миелодиспластичен синдром (MDS) и/или миелопролиферативни неоплазми (MPN). Реактивите могат да се използват с периферна цялостна кръв (събирана в K 2 EDTA, киселина, цитрат и декстроза (ACD) или хепарин), костен мозък (събиран в K 2 EDTA, ACD или хепарин) и образци от лимфен възел. Интерпретирането на резултатите трябва да бъде потвърдено от патолог или специалист с еквивалентна квалификация заедно с други клинични и лабораторни находки. Тези реактиви предоставят мултипараметрични, качествени резултати за повърхностните антигени, изброени по-долу:

Виолетов лазер

Панели ClearLLab 10C

Син лазер

Червен лазер

Номер на частта

APC- A750

Епруветка

FITC

PE

ECD PC5.5 PC7

APC APC- A700

PB KRO

B96805 Епруветка с В-клетки B96806 Епруветка с Т-клетки

Капа

Ламбда

CD10

CD5

CD200 CD34

CD38

CD20

CD19 CD45

TCRγδ

CD4

CD2

CD56

CD5

CD34

CD7

CD8

CD3

CD45

B96807 Епруветка с M1-клетки

CD16

CD7

CD10

CD13

CD64

CD34

CD14

HLA-DR CD11b CD45

B96808 Епруветка с M2-клетки

CD15

CD123 CD117 CD13

CD33

CD34

CD38

HLA-DR CD19 CD45

Всяко събитие е от значение

4

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

НАБОР ЗА КОМПЕНСАЦИЯ ClearLLab

Син лазер

Червен лазер

Виолетов лазер

Номер на частта

APC- A700

APC- A750

FITC

PE

ECD PC5.5

PC7

APC

PB

KRO

B74074

CD4

CD4

CD3

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD8

Горният реактив се предоставя в стандартен формат за използване с реактиви за подготовка на проба и настройка на цитометъра заедно със софтуер за получаване на данни и анализ. Панелите ClearLLab 10C отговарят на изискванията за стандартизация, описани в указанията от Бетезда 2 . Допълнителна информация относно панелите ClearLLab 10C може да се открие на beckman.com/ClearLLab . ИЗБОР И ИНТЕРПРЕТИРАНЕ НА СЛУЧАЙ Данните, представени в този справочник, са генерирани след процедурата, подробно описана в ClearLLab 10C Panel Instructions For Use (IFU) (Инструкции за употреба за панели ClearLLab 10C), които са на разположение на beckman.com . От данните от клиничното проучване са подбрани представителни случаи, които са разгледани, анотирани и интерпретирани от: Brent Wood MD PhD професор, Ръководител на подразделение „Лабораторна медицина и патология“, Директор на отдела по хематопатология, Медицински директор на Лаборатория по хематопатология

и патология SCCA, Лаборатории SCCA Вашингтонски университет, Сиатъл, WA, САЩ Xueyan Chen, MD, PhD доцент, Лабораторна медицина Асоцииран директор, Лаборатория по хематопатология Вашингтонски университет, Сиатъл, WA Yi Zhou, MD PhD доцент

Департамент по лабораторна медицина Вашингтонски университет, Сиатъл, WA

Протоколи за анализ: Изтеглете протокола за анализ ClearLLab 10C. Анализ: Изтеглете файлове с анализ на Kaluza C, специфични за случая.

Всяко събитие е от значение

5

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

БИБЛИОГРАФИЯ 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms. F.E. Craig, K.A. Foon. Blood. 2008; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Swerdlow SH, et al. Blood. 2016;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Arber DA, et al. Blood 2016 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia. Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications. Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S5-13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia. Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues. Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep- Oct;84(5):291-308. doi: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations. Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep- Oct;84(5):309-14. doi: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria. Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):315-23. doi: 10.1002/cyto.b.2110 • ClearLLab Control Cells Instructions For Use (Инструкции за употреба на ClearLLab Control Cells), номер на частта B99884 • ClearLLab Control Cells QC Analysis Protocols Download Addendum (Допълнение за изтегляне на протоколи за анализ на КК с ClearLLab Control Cells), номер на частта C33277AA СВЪРЗАНИ ДОКУМЕНТИ • ClearLLab 10C Application System Guide (Системно ръководство на приложението ClearLLab 10C), номер на частта C28535AA • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use (Инструкции за употреба на софтуер за поточна цитометрия Kaluza C), номер на частта C25277 • Navios Flow Cytometer Instructions For Use (Инструкции за употреба на поточен цитометър Navios), номер на частта C28483AA • Navios EX Flow Cytometer Instructions For Use (Инструкции за употреба на поточен цитометър Navios EX), номер на частта B90628AC • ClearLLab 10C Panels Instructions For Use (Инструкции за употреба на панели ClearLLab 10C), номер на частта C00197 • ClearLLab Compensation Beads Instructions For Use (Инструкции за употреба на ClearLLab Compensation Beads), номер на частта C00201 • ClearLLab Compensation Kit Instructions For Use (Инструкции за употреба на набор за компенсация ClearLLab), номер на частта B74074

Всяко събитие е от значение

6

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

СЛУЧАИ Към случаите се прилага следното

Лимфоцити (Област за анализ Ly)/NK-клетки: червен CD19+ B-клетки: оранжев CD3+ T-клетки: светлосин

Моноцити (Област за анализ Mo): зелен Гранулоцити (Област за анализ Gr): син

CD45dim: виолетов Допълнителни аберантни популации: синьо-зелен CD45 отрицателна популация: сив

селектиране с приоритета на цветовете:

НЯМА ИМУНОФЕНОТИПНА АБНОРМНОСТ Поточната цитометрия е средство за характеризиранена левкоцитнипопулации. Тяможе да епомощно средствов диференциалната диагностиканапациенти с хематологичниабнормности със или със съмнение за хематопоетичнанеоплазия, включително хронична левкемия, остра левкемия, Неходжкинов лимфом, миелом, миелодиспластичен синдром (MDS) и/или миелопролиферативни неоплазми (MPN). Съществено за идентифициране на аберантни популации в такива клинични ситуации е доброто познаване на нормалните клетъчни популации, представени в проби от цялостна кръв, костен мозък и тъкани от лимфен възел. Следват примери на нормални проби, оцветени с панели ClearLLab 10C.

ПЕРИФЕРНА ЦЯЛОСТНА КРЪВ Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Клинична карта При този65-годишенмъже установена тромбоцитопения. Пробаот перифернацялостна кръвеподложенанапоточно-цитометрично имунофенотипизиране с панели ClearLLab 10C. Поточно-цитометрично имунофенотипизиране Епруветка с В-клетки

Фигура 1: Тази точкова диаграма, представляваща Time (Време) в зависимост от CD45, е неселектирана и показва всички събития, регистрирани последователно. Тя има за цел да установи наличието на флуидни пертурбации по време на получаване на проба. Стабилното получаване се представя чрез модел на равномерно отразяване на събитията във времето. Събития, които се отклоняват от стабилния модел, могат да бъдат изключени от областта за анализ Time (Време).

Фигура2:Точковатадиаграма,представящаFSINT(Интензитетнапредноразсейване)взависимост отFSPEAK (Пиквпредноразсейване),показвасъбитиятавобласттазаанализTime (Време).Тази диаграма има за цел да изключи клетъчните дублети или агрегати. Събитията „регистрирани синглети“ показват линейна зависимост между INT (Интензитет) и PEAK (Пик) и са включени в областта за анализ Singlets (Синглети), докато дублетите лежат извън линейната зависимост.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

7

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с В-клетки

Фигура3:Точковатадиаграма,представляващаSideScatter(Страничноразсейване)взависимост отForwardScatter (Предноразсейване),показвасъбитиявобласттазаанализSinglets (Синглети). Нейната цел е да се изключи клетъчен дебрис, който обикновено има понижено предно разсейване. Апоптотичните клетки в ранен стадий на развитие също имат леко завишено странично разсейване, докато апоптотични в късен стадий на развитие и некротични клетки имат променливо понижено странично разсейване. Жизнеспособните клетки са включени в областта за анализ Cells (Клетки).

Фигура 4: Точковата диаграма, представляваща CD45 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва събития в областта за анализ Cells (Клетки). Тази диаграма има за цел да маркира различни подпопулации на бели кръвни клетки, които са селектирани като CD45 положителни. CD45 отрицателната популация обикновено обхваща червени кръвни клетки, тромбоцитни агрегати, тъканен дебрис или нехематопоетични клетки.

Фигура 5: Точковата диаграма, представляваща CD45 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва събития в областта за анализ CD45+ (CD45+). Тази точкова диаграма позволява разграничаването на няколко популации от бели кръвни клетки, обичайно представени в периферната кръв, костния мозък и пробите от лимфни възли, обхващащи лимфоцити (област за анализ Ly, червени/оранжеви), моноцити (област за анализ Mo, зелени) и гранулоцити (област за анализ Gr, сини). Областта за анализ CD45dim (Слабосветещи CD45) (виолетови) обхваща областта, обичайно заета от ранните прогенитори, т.е. миелобласти, и незрелите В-клетки. В тази област могат да се появят също и базофили, плазмоцитоидни дендритниклетки,плазмениклеткииNK-клетки.Сприлаганенаразличницветовезасъбитията, анализирани чрез всяко селектиране, могат да се идентифицират различните популации.

Фигура 6: Точковата диаграма, представляваща CD19 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва събития в областта за анализ Cells (Клетки). Областта за анализ CD19+ идентифицираCD19положителниклетки.CD19сеекспресиравърхузрелиинезрелиВ-клетки, както и върху повечето плазмени клетки. Тези клетки обичайно имат слабо до умерено странично разсейване.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

8

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с В-клетки

Фигура 7: Точковата диаграма, представляваща Kappa (Капа) в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. Повърхностни капа леки вериги се експресират върху зрели В-клетки (оранжеви) и незрели В-клетки от късен стадий. Количественото отношение на капа положителните В-клетки нормално е по-голямо от капа отрицателните(ламбдаположителните)В-клетки.Наблюдавасеизявяващасекапаположителност върхумоноцитите (зелени)порадимедииранотоотFcрецепторасвързваненаимуноглобулин. Положителните на капа леки вериги клетки се показват в дясната страна на диаграмата.

Фигура 8: Точковата диаграма, представляваща Lambda (Ламбда) в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. Повърхностни ламбда леки вериги се експресират върху зрели В-клетки (оранжеви) и незрели В-клетки от късен стадий. КоличественотоотношениеналамбдаположителнитеВ-клеткинормалноепо-малкоотламбда отрицателните(капаположителните)В-клетки.Наблюдавасеизявяващаселамбдаположителност върхумоноцитите (зелени)порадимедииранотоотFcрецепторасвързваненаимуноглобулин. Положителните на ламбда леки вериги клетки се показват в дясната страна на диаграмата.

Фигура 9: Точковата диаграма, представляваща CD10 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD10 се експресира върху незрелите В-клетки, зрелите В-клетки в герминативния център и върху зрелите гранулоцити (синьо). Гранулоцитите имат силно странично разсейване за разлика от лимфоидните клетки, които имат слабо странично разсейване.

Фигура 10: Точковата диаграма, представляваща CD5 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD5 се експресира върху незрели и зрели Т-клетки (червени, долу вдясно), както и слабосветещо при подпопулация на зрели В-клетки (оранжеви). Тези лимфоидни клетки обичайно имат слабо странично разсейване.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

9

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с В-клетки

Фигура11:Точковатадиаграма,представляващаCD200взависимостотSideScatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD200 обичайно се експресира върху В-клетки, но е отрицателен в някои неопластични В-клетки. Особено е полезно при разграничаването на мантийно клетъчен лимфом (обикновено отрицателен на CD200) от хроничналимфоцитналевкемия/малъклимфоцитенлимфом(обикновеноположителеннаCD200).

Фигура 12: Точковата диаграма, представляваща CD34 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD34 е маркер на ранни хематопоетични прогенитори. Той се експресира върху хематопоетични стволови клетки, ранни миелоидни прогенитори (миелобласти) и незрели В- и Т-клетки (лимфобласти). Зрелите гранулоцити, моноцити и лимфоцити са отрицателни за CD34. Прогениторите, положителни за CD34, нормално са по-малко от 0,01 % от белите клетки в периферната кръв.

Фигура13:Точковатадиаграма,представляващаCD38взависимостотSideScatter (Странично разсейване),показвавсичкижизнеспособниклетки.CD38емаркернаактивация.Снай-високи нива се експресира върху плазмени клетки, с умерено ниво се експресира върху незрели миелоидни и лимфоидни прогенитори, с ниско ниво се експресира върху моноцити (зелени), а с променливо ниво – върху активирани зрели лимфоцити.

Фигура 14: Точковата диаграма, представляваща CD20 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD20 се експресира върху зрели В-клетки (оранжеви) и променливо ниско ниво върху подпопулация на зрели Т-клетки. Променливо се експресиравърхунезрелиВ-клеткивпо-късенстадийнаразвитие.ПоложителнитенаCD20клетки обикновено се намират в областта за анализ на лимфоцити със слабо странично разсейване.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

10

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с В-клетки

Фигура15.Точковатадиаграма,представляващаLambda (Ламбда)взависимостотKappa (Капа), показва всички CD19+ клетки. Незрелите В-клетки в ранен стадий на развитие (виолетови) не експресират леки вериги на повърхностни имуноглобулини, т.е. са отрицателни за капа или ламбда леки вериги. Зрелите В-клетки са поликлонални, експресиращи капа или ламбда леки вериги. Нормалното съотношение между капа и ламбда е 1,4 с диапазон между 1 и 2. Повишеният фон поради слепнал плазмен имуноглобулин е често явление.

Фигура 16. Точковата диаграма, представляваща CD19 в зависимост от CD20, показва всички клетки в областта за анализ на лимфоцити (Ly). Зрелите В-клетки експресират както CD19, така и CD20 (оранжеви). Някои неопластични В-клетки могат да покажат понижена експресия на CD19 или CD20.

Фигура 17. Точковата диаграма, представляваща CD19 в зависимост от CD10, показва всички клеткивобласттазаанализналимфоцити (Ly).В-клеткитесаположителнизаCD19 (оранжеви). ПоложителнитезаCD10зрелиВ-клеткисаразпределенивгерминативницентровевлимфните възли, а малка подпопулация от незрели В-клетки в късен стадий на развитие се проявяват в периферната кръв и костно-мозъчни аспирати.

Фигура 18. Точковата диаграма, представляваща CD38 в зависимост от CD10, показва всички клетки в областта за анализ на лимфоцити (Ly). CD38 се експресира с най-високо ниво върху плазмени клетки, с умерено ниво върху незрели В-клетки и с ниско ниво върху В-клетките в герминативни центрове. Повечето зрели В-клетки (оранжеви) показват слаба или липсваща експресиянаCD38.Т-клетките (червени)показватпроменливаекспресиянаCD38взависимост от състоянието на активиране.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

11

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с В-клетки

Фигура 19. Точковата диаграма, представляваща CD20 в зависимост от CD10, показва всички клеткивобласттазаанализналимфоцити(Ly).ПовечетозрелиВ-клеткиравномерноекспресират CD20 с високо ниво без CD10.

Фигура 20. Точковата диаграма, представляваща CD19 в зависимост от CD5, показва всички клетки в областта за анализ на лимфоцити (Ly). CD5 е експресиран върху Т-клетки (червени, горе вляво), променливо експресиран с ниско ниво върху подпопулация от нормални зрели В-клетки (оранжеви) и експресиран върху някои от подвидовете неопластични В-клетки.

Фигура 21. Точковата диаграма, представляваща CD20 в зависимост от CD200, показва всички клеткивобласттазаанализналимфоцити (Ly).ПовечетозрелиВ-клетки (оранжеви)експресират CD200 с ниско до умерено ниво.

Фигура 22. Точковата диаграма, представляваща CD5 в зависимост от CD200, показва всички клеткивобласттазаанализналимфоцити (Ly).ПовечетозрелиВ-клеткиобичайноекспресират CD200сподпопулация,променливоекспресиращаCD5.НеопластичнитеВ-клеткиприхронична лимфоцитналевкемия/малъклимфоцитенлимфомобичайноекспресиратCD5иCD200,докато при мантийно клетъчен лимфом обичайно експресират CD5, но не и CD200.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

12

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с Т-клетки

Фигура 1: Тази точкова диаграма, представляваща Time (Време) в зависимост от CD45, е неселектирана и показва всички събития, регистрирани последователно. Тя има за цел да установи наличието на флуидни пертурбации по време на получаване на проба. Стабилното получаване се представя чрез модел на равномерно отразяване на събитията във времето. Събития, които се отклоняват от стабилния модел, могат да бъдат изключени от областта за анализ Time (Време).

Фигура 2: Точковата диаграма, представяща FS INT (Интензитет на предно разсейване) в зависимостотFSPEAK (Пиквпредноразсейване),показвасъбитиятавобласттазаанализTime (Време). Тази диаграма има за цел да изключи клетъчните дублети или агрегати. Събитията „регистрирани синглети“ показват линейна зависимост между INT (Интензитет) и PEAK (Пик) и са включени в областта за анализ Singlets (Синглети), докато дублетите лежат извън линейната зависимост.

Фигура3:Точковатадиаграма,представляващаSideScatter(Страничноразсейване)взависимост отForwardScatter (Предноразсейване),показвасъбитиявобласттазаанализSinglets (Синглети). Целта на тази диаграма е да се изключи клетъчен дебрис, който обикновено има понижено предноразсейванесъсзавишеностраничноразсейване.Апоптотичнитеклеткивраненстадий на развитие също имат леко завишено странично разсейване, докато апоптотични в късен стадий на развитие и некротични клетки имат променливо понижено странично разсейване. Жизнеспособните клетки са включени в областта за анализ Cells (Клетки).

Фигура 4: Точковата диаграма, представляваща CD45 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва събития в областта за анализ Cells (Клетки). Тази диаграма има за цел да маркира различни видове бели кръвни клетки, които са CD45 положителни. CD45 отрицателнатапопулацияобикновенообхващачервеникръвниклетки,тромбоцитниагрегати или нехематопоетични клетки.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

13

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с Т-клетки

Фигура 5: Точковата диаграма, представляваща CD45 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва събития в областта за анализ CD45+ (CD45+). Тази точкова диаграма позволява разграничаването на няколко популации от бели кръвни клетки, обичайно представени в периферната кръв, костния мозък и пробите от лимфни възли, обхващащи лимфоцити (областзаанализLy,червено/светлосиньо),моноцити (областзаанализMo,зелени) и гранулоцити (област за анализ Gr, сини). Областта за анализ CD45dim (Слабосветещи CD45) (виолетови) обхваща областта, обичайно заета от миелобластите и незрелите В-клетки. В тази област могат да попаднат също и базофили, плазмоцитоидни дендритни клетки, плазмени клетки и NK-клетки. С прилагане на различни цветове за събитията, анализирани чрез всяко селектиране, могат да се проследяват различните популации.

Фигура 6: Точковата диаграма, представляваща CD3 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. Областта за анализ CD3+ идентифицира клетки с повърхностна експресия на CD3+ (светлосиньо). CD3 е силно специфичен за Т-клетки, експресирасесамовърхуповърхносттаназрелиТ-клеткиинезрелиТ-клеткивпо-късенстадий на развитие. Тези клетки обичайно имат слабо до умерено странично разсейване.

Фигура 8: Точковата диаграма, представляваща CD4 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD4 се експресира с високо ниво върху подпопулация на незрели и зрели Т-клетки (светлосиньо). CD4 се експресира също и върху моноцитни клетки (зелени) с ниво, по-ниско от това на Т-клетките, положителни за CD4.

Фигура 7: Точковата диаграма, представляваща TCRγδ в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. TCRγδ е подединица на Т-клетъчния рецептор и се експресира върху малка подпопулация от цитотоксични Т-клетки. Тези клетки обичайно имат слабо странично разсейване (светлосиньо).

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

14

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с Т-клетки

Фигура 9: Точковата диаграма, представляваща CD2 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD2 е антиген, експресиран от почти всички незрели и зрели Т-клетки (светлосиньо). CD2 се експресира също и върху NK-клетки (червени, долу вдясно) и с по-ниско ниво върху моноцити (зелени).

Фигура 10: Точковата диаграма, представляваща CD56 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD56 обикновено се експресира върху основнаподпопулациянаNK-клетки (червени),Т-клеткисактивностнаестествениубийци (NK- /T-клетки) и върху много гама/делта Т-клетки (светлосини). CD56 също частично се експресира и върху моноцитни клетки (зелени) в реактивно и неопластично състояние.

Фигура 11: Точковата диаграма, представляваща CD5 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD5 се експресира върху повечето зрели и незрели Т-клетки (светлосини) и с ниско ниво върху подпопулация на зрели В-клетки. Незрелите Т-клетки в много ранен стадий на развитие и гама/делта Т-клетките обикновено иматслабадолипсващаекспресиянаCD5.МалкаподпопулацияотNK-клеткиекспресираCD5.

Фигура 12: Точковата диаграма, представляваща CD34 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD34 е маркер на ранни хематопоетични прогенитори. Той се експресира върху хематопоетични стволови клетки, ранни миелоидни прогенитори (миелобласти) и незрели В- и Т-клетки (лимфобласти). Зрелите гранулоцити, моноцити и лимфоцити са отрицателни за CD34. Прогениторите, положителни за CD34, нормално са по-малко от 0,01 % от белите клетки в периферната кръв.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

15

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с Т-клетки

Фигура 13: Точковата диаграма, представляваща CD7 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване),показвавсичкижизнеспособниклетки.CD7сеекспресиравърхунезрелиТ-клеткив най-раннияетапнаразвитиенаТ-клеткатаиперсистираповременасъзряванетонаТ-клетките, за да бъде променливо експресиран върху зрелите Т-клетки (светлосини). Експресира се също и изцяло върху NK-клетки (червени, долу вдясно) и слабосветещо върху подпопулация от плазмоцитоидни дендритни клетки и подпопулация на клетъчен ред комитирани CD34 положителни прогенитори.

Фигура 14: Точковата диаграма, представляваща CD8 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD8 се експресира върху подпопулация от незрели и зрели Т-клетки (светлосини) и дефинира популацията на цитотоксични зрели Т-клетки. Променливо се експресира с ниско ниво върху NK-клетки и гама-делта Т-клетки.

Фигура 15. Точковата диаграма, представляваща CD3 в зависимост от CD56, показва всички клеткивобласттазаанализналимфоцити (Ly).Т-клеткитесеопределятчрезекспресиянаCD3, тъй като се проявява върху всички зрели Т-клетки и не се експресира върху клетки от други клетъчниредове.NK-клеткитеподефинициянеекспресиратповърхностенCD3,ноекспресират CD56 върху голяма подпопулация (червени, горе вляво). Също и малки подпопулации от зрели Т-клетки експресират CD56, в частност Т-клетки с активност на естествени убийци (NK- /T-клетки) и гама/делта Т-клетки.

Фигура16.Точковатадиаграма,представляващаCD5взависимостотCD3,показвавсичкиклетки вобласттазаанализналимфоцити (Ly).CD3иCD5сеекспресиратзаедновърхуповечетозрели Т-клетки (светлосини),въпрекичемалкаподпопулацияотцитотоксичниТ-клеткисморфология наголемигрануларнилимфоцитичестопроявяваредуциранадолипсващаекспресиянаCD5. CD5 не се експресира върху повечето NK-клетки.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

16

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с Т-клетки

Фигура 18. Точковата диаграма, представляваща CD8 в зависимост от CD4, показва всички клетки в областта за анализ на лимфоцити (Ly). Т-клетките, положителни на CD3, (светлосини) съдържатположителнинаCD4 (хелпери)иположителнинаCD8 (цитотоксични)подпопулации. Положителните на CD4 Т-клетки обикновено превъзхождат числено положителните на CD8 Т-клетки със съотношение CD4:CD8, равно на 1:1 до 4:1 в периферната кръв. Понякога има и CD4 и CD8 двойно отрицателни или двойно положителни Т-клетки. Двойно отрицателните Т-клетки обичайно се състоят най-вече от гама/делта Т-клетки. Следва да се отбележи, че CD4 положителните, но отрицателни на CD3 клетки (червени, средата вляво) са моноцити, включенивобласттазаанализналимфоцитите.Стоваседемонстрира,чесамоселектирането CD45 в зависимост от Side scatter (Странично разсейване) не позволява идентифициране на чисти лимфоцити.

Фигура17.Точковатадиаграма,представляващаCD7взависимостотCD2,показвавсичкиклетки в областта за анализ на лимфоцити (Ly). CD2 и CD7 се експресират заедно в мнозинството от зрели Т-клетки (светлосини) и NK-клетки (червени, горе вдясно).

Фигура 19. Точковата диаграма, представляваща CD3 в зависимост от CD4, показва всички клеткивобласттазаанализналимфоцити (Ly).ВсичкиположителнизаCD4Т-клеткиекспресират CD3. Моноцитите и плазмоцитоидните дендритни клетки експресират CD4 с по-ниско ниво от положителните на CD4 Т-клетки и липса на експресия на CD3. NK-клетките не експресират CD3 и CD4.

Фигура20.Точковатадиаграма,представляващаCD3взависимостотCD8,показвавсичкиклетки в областта за анализ на лимфоцити (Ly). Всички положителни за CD8 Т-клетки експресират CD3 (светлосиньо).МалкапопулацияотNK-клеткисъщоекспресираCD8(червени,горевляво)безCD3.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

17

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с Т-клетки

Фигура 21. Точковата диаграма, представляваща CD3 в зависимост от TCRγδ, показва всички клеткивобласттазаанализналимфоцити (Ly).МалкаподпопулацияотТ-клеткиекспресираTCR гама/делта, която се коекспресира със CD3. Силно линейната зависимост между CD3 и TCR се дължи на тяхното наличие като хетеродимерен комплекс с фиксирано съотношение 1:1, като повишената експресия на единия показва повишена експресия на другия.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

18

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с M1-клетки

Фигура 1: Тази точкова диаграма, представляваща Time (Време) в зависимост от CD45, е неселектирана и показва всички събития, регистрирани последователно. Тя има за цел да установи наличието на флуидни пертурбации по време на получаване на проба. Стабилното получаване се представя чрез модел на равномерно отразяване на събитията във времето. Събития, които се отклоняват от стабилния модел, могат да бъдат изключени от областта за анализ Time (Време).

Фигура 2: Точковата диаграма, представяща FS INT (Интензитет на предно разсейване) в зависимостотFSPEAK (Пиквпредноразсейване),показвасъбитиятавобласттазаанализTime (Време). Тази диаграма има за цел да изключи клетъчните дублети или агрегати. Събитията „регистрирани синглети“ показват линейна зависимост между INT (Интензитет) и PEAK (Пик) и са включени в областта за анализ Singlets (Синглети), докато дублетите лежат извън линейната зависимост.

Фигура3:Точковатадиаграма,представляващаSideScatter(Страничноразсейване)взависимост отForwardScatter (Предноразсейване),показвасъбитиявобласттазаанализSinglets (Синглети). Целта на тази диаграма е да се изключи клетъчен дебрис, който обикновено има понижено предноразсейванесъсзавишеностраничноразсейване.Апоптотичнитеклеткивраненстадий на развитие също имат леко завишено странично разсейване, докато апоптотични в късен стадий на развитие и некротични клетки имат променливо понижено странично разсейване. Жизнеспособните клетки са включени в областта за анализ Cells (Клетки).

Фигура 4: Точковата диаграма, представляваща CD45 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва събития в областта за анализ Cells (Клетки). Тази диаграма има за цел да маркира различни подпопулации на бели кръвни клетки, които са селектирани като CD45 положителни. CD45 отрицателната популация обикновено обхваща червени кръвни клетки, тромбоцитни агрегати, тъканен дебрис или нехематопоетични клетки.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

19

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с M1-клетки

Фигура 5: Точковата диаграма, представляваща CD45 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва събития в областта за анализ CD45+ (CD45+). Тази точкова диаграма позволява разграничаването на няколко популации от бели кръвни клетки, обичайно представенивпробитеотперифернакръв,костeнмозъкилимфнивъзли,обхващащилимфоцити (област за анализ Ly, червени), моноцити (област за анализ Mo, зелени) и гранулоцити (област за анализ Gr, сини). Областта за анализ CD45dim (Слабосветещи CD45) (виолетови) обхваща областта, обичайно заета от миелобластите и незрелите В-клетки. В тази област могат да попаднат също и базофили, плазмоцитоидни дендритни клетки, плазмени клетки и NK-клетки. С прилагане на различни цветове за събитията, анализирани чрез всяко селектиране, могат да се проследяват различните популации.

Фигура 6: Точковата диаграма, представляваща CD16 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD16 се експресира с най-високото си ниво върху зрели гранулоцити (сини). Повечето NK-клетки експресират CD16 (червени, долу вдясно), както прави и подпопулация от активирани моноцити (зелени).

Фигура 8: Точковата диаграма, представляваща CD10 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD10 се експресира върху незрелите В-клетки, зрелите В-клетки в герминативния център и върху зрелите гранулоцити (синьо). Гранулоцитите имат силно странично разсейване за разлика от лимфоидните клетки, които имат слабо странично разсейване.

Фигура 7: Точковата диаграма, представляваща CD7 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване),показвавсичкижизнеспособниклетки.CD7сеекспресиравърхунезрелиТ-клеткив най-раннияетапнаразвитиенаТ-клеткатаиперсистираповременасъзряванетонаТ-клетките, задабъдепроменливоекспресиранвърхузрелитеТ-клетки (червени,долувдясно).Експресира сесъщоивърхуNK-клеткиислабосветещовърхуподпопулацияотплазмоцитоиднидендритни клетки и подпопулация на клетъчен ред комитирани прогенитори.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

20

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с M1-клетки

Фигура 9: Точковата диаграма, представляваща CD13 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD13 се експресира върху съзряващи гранулоцити (сини), зрели моноцити (зелени) и миелоидни прогенитори (виолетови).

Фигура 10: Точковата диаграма, представляваща CD64 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване),показвавсичкижизнеспособниклетки.CD64сеекспресираснай-високотосиниво върхузрелимоноцити(зелени).CD64несеекспресирадобревърхуостаналитезрелигранулоцити (сини), но се повишава при експресия с активиране на гранулоцитите. CD64 не се експресира върхулимфоцити (червени)илиповечетоCD34положителнипрогенитори.Активиранизрели моноцити експресират CD64 с по-ниско ниво и имат слабо странично разсейване.

Фигура11:Точковатадиаграма,представляващаCD34взависимостотSideScatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD34 е маркер на ранни хематопоетични прогенитори. Той се експресира върху хематопоетични стволови клетки, ранни миелоидни прогенитори (миелобласти) и незрели В- и Т-клетки (лимфобласти). Зрелите гранулоцити, моноцити и лимфоцити са отрицателни за CD34. Прогениторите, положителни за CD34, нормално са по-малко от 0,01 % от белите клетки в периферната кръв.

Фигура 12: Точковата диаграма, представляваща CD14 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD14 се експресира с високо ниво върху зрели моноцити (зелени) и с ниско ниво върху зрели гранулоцити (сини). Активирани зрели моноцити експресират CD14 с по-ниско ниво и имат слабо странично разсейване.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

21

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с M1-клетки

Фигура 13: Точковата диаграма, представляваща HLA-DR в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. HLA-DR се експресира върху антигенпрезентиращи клетки, включващи моноцити (зелени) и плазмоцитоидни дендритни клетки.ЕкспресирасесъщоивърхуCD34положителнипрогенитори,незрелиизрелиВ-клетки, както и върху активирани Т-клетки.

Фигура14:Точковатадиаграма,представляващаCD11bвзависимостотSideScatter (Странично разсейване), показва всички жизнеспособни клетки. CD11b се експресира върху гранулоцити (сини) и върху моноцити (зелени). CD11b се експресира също и върху NK-клетки и базофили.

Фигура 15. Точковата диаграма, представляваща CD11b в зависимост от CD16, показва всички жизнеспособни клетки. CD11b се експресира върху моноцити (зелени), незрели и зрели гранулоцити (сини) и NK-клетки (червени). CD16 се експресира върху незрели и зрели гранулоцити (сини) и върху подпопулация на NK-клетки (червени, горе вдясно). Активирани зрели моноцити експресират CD16 с променливо ниво и са CD11b положителни.

Фигура 16. Точковата диаграма, представляваща CD16 в зависимост от CD13, показва всички жизнеспособни клетки. CD13 се експресира върху гранулоцити (сини), моноцити (зелени), базофилииCD34положителнипрогенитори.CD16сеекспресиравърхусъзряващигранулоцити (сини) и върху подпопулация на NK-клетки (червени, долу вдясно).

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

22

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с M1-клетки

Фигура 17. Точковата диаграма, представляваща CD13 в зависимост от CD34, показва всички жизнеспособни клетки. CD13 се експресира върху гранулоцити (сини), моноцити (зелени), базофилииCD34положителнипрогенитори.CD34сеекспресиравърхураннихематопоетични прогенитори. Зрелите гранулоцити, моноцити и лимфоцити са отрицателни за CD34.

Фигура 18. Точковата диаграма, представляваща CD14 в зависимост от CD64, показва всички жизнеспособни клетки. CD64 се експресира с високо ниво върху моноцити (зелени) и с ниско ниво върху гранулоцити (сини). CD14 се експресира с високо ниво върху моноцити и с по- ниско ниво върху гранулоцити (сини). Активирани зрели моноцити експресират CD14 и CD64 с променливо по-ниско ниво.

Фигура 19. Точковата диаграма, представляваща CD14 в зависимост от CD16, показва всички жизнеспособни клетки. CD14 се експресира с високо ниво върху моноцити (зелени) и с по- ниско ниво върху гранулоцити (сини, горе вляво). CD16 се експресира върху гранулоцити и върху подпопулация на NK-клетки (червени, средата вляво). Активирани зрели моноцити експресират CD14 и CD16 с променливо по-ниско ниво.

Фигура 20. Точковата диаграма, представляваща HLA-DR в зависимост от CD10, показва всички жизнеспособни клетки. HLA-DR се експресира върху моноцити (зелени), В-клетки, плазмоцитоидни дендритни клетки и CD34 положителни прогенитори. CD10 се експресира от зрели гранулоцити (сини).

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

23

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с M1-клетки

Фигура 21. Точковата диаграма, представляваща CD7 в зависимост от CD13, показва всички жизнеспособни клетки. CD7 се експресира върху T-клетки и NK-клетки (червени, долу вдясно). CD13сеекспресиравърхугранулоцити(сини),моноцити(зелени),базофилииCD34положителни прогенитори. Коекспресия на CD13 и CD7 по принцип не се наблюдава.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

24

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB

Епруветка с M2-клетки

Фигура 1: Тази точкова диаграма, представляваща Time (Време) в зависимост от CD45, е неселектирана и показва всички събития, регистрирани последователно. Тя има за цел да установи наличието на флуидни пертурбации по време на получаване на проба. Стабилното получаване се представя чрез модел на равномерно отразяване на събитията във времето. Събития, които се отклоняват от стабилния модел, могат да бъдат изключени от областта за анализ Time (Време).

Фигура 2: Точковата диаграма, представяща FS INT (Интензитет на предно разсейване) в зависимостотFSPEAK (Пиквпредноразсейване),показвасъбитиятавобласттазаанализTime (Време). Тази диаграма има за цел да изключи клетъчните дублети или агрегати. Събитията „регистрирани синглети“ показват линейна зависимост между INT (Интензитет) и PEAK (Пик) и са включени в областта за анализ Singlets (Синглети), докато дублетите лежат извън линейната зависимост.

Фигура3:Точковатадиаграма,представляващаSideScatter(Страничноразсейване)взависимост отForwardScatter (Предноразсейване),показвасъбитиявобласттазаанализSinglets (Синглети). Нейната цел е да се изключи клетъчен дебрис, който обикновено има понижено предно разсейване. Апоптотичните клетки в ранен стадий на развитие също имат леко завишено странично разсейване, докато апоптотични в късен стадий на развитие и некротични клетки имат променливо понижено странично разсейване. Жизнеспособните клетки са включени в областта за анализ Cells (Клетки).

Фигура 4: Точковата диаграма, представляваща CD45 в зависимост от Side Scatter (Странично разсейване), показва събития в областта за анализ Cells (Клетки). Тази диаграма има за цел да маркира различни подпопулации на бели кръвни клетки, които са селектирани като CD45 положителни. CD45 отрицателната популация обикновено обхваща червени кръвни клетки, тромбоцитни агрегати, тъканен дебрис или нехематопоетични клетки.

Съдържание > Няма имунофенотипна абнормност > Случай № 1: Нормална цялостна кръв

Всяко събитие е от значение

25

Beckman Coulter • Панели ClearLLab 10C • C33369 AB