ClearLLab 10C - Dansk version

CE-ANTISTOFKOMBINATIONER FOR LEUKÆMI/LYMFOM* ANALYSE C LEAR LL AB 10C - P ANELER

CASEHÆFTE

Every Event Matters * Kun non-Hodgkins lymfom

1

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

INDHOLDSFORTEGNELSE

INTRODUKTION..........................................................................3 BAGGRUND.................................................................................3 ENSTEMMIGE ANBEFALINGER FOR IMMUNFÆNOTYPEBESTEMMELSE........................................4 CLEARLLAB 10C-PANELER – TILSIGTET ANVENDELSE.........................................................4 CLEARLLAB 10C-PANELER.....................................................4 CLEARLLAB-KOMPENSATIONSSÆT.....................................5 CASEVALG OG FORTOLKNING..............................................5 RELATEREDE DOKUMENTER..................................................6 REFERENCER..............................................................................6 CASES...........................................................................................7 INGEN IMMUNFÆNOTYPEBESTEMT ANOMALITET..........7 PERIFERT BLOD........................................................................ 7 Case 1: Normalt helblod.....................................................7 KNOGLEMARV.........................................................................32 Case 2: Normal knoglemarv..........................................32 LYMFEKNUDE......................................................................... 56 Case 3: Normal lymfekirtel.............................................56 NEOPLASTISK PROCES AF B-CELLE-OPRINDELSE...... 80 B-LYMFOBLASTISK LEUKÆMI/ LYMFOBLASTLYMFOM........................................................ 80 Case 4: B akut lymfoblastisk leukæmi/ lymfoblastlymfom............................................................. 80 B-LYMFOBLASTISK LEUKÆMI/ LYMFOBLASTLYMFOM.......................................................105 Case 5: B akut lymfoblastisk leukæmi/ lymfoblastlymfom............................................................105 KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI/ LILLE LYMFOCYTISK LYMFOM.......................................130 Case 6: Kronisk lymfatisk leukæmi/ lille lymfocytisk lymfom................................................130 KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI/ LILLE LYMFOCYTISK LYMFOM.......................................154 Case 7: Kronisk lymfatisk leukæmi/ lille lymfocytisk lymfom................................................ 154 MANTLE CELLELYMFOM................................................... 178 Case 8: Mantle cellelymfom.........................................178 PLASMACELLEMYELOM...................................................202 Case 9: Plasmacellemyelom.......................................202

FOLLIKULÆRT LYMFOM.................................................. 226 Case 10: Follikulært lymfom....................................... 226 B-CELLELYMFOM STAMMENDE FRA KIMCENTER.................................................................250 Case 11: B-cellelymfom stammende fra kimcenter.....................................................................250 MODENT B-CELLELYMFOM............................................ 274 Case 12: Modent B-cellelymfom................................274 MODENT B-CELLELYMFOM............................................298 Case 13: Modent B-cellelymfom............................... 298 NEOPLASTISK PROCES AF T-CELLE-OPRINDELSE..... 322 T-LYMFOBLASTISK LEUKÆMI/ LYMFOBLASTLYMFOM...................................................... 322 Case 14: T-lymfoblastisk leukæmi/ T-lymfoblastlymfom....................................................... 322 T-LYMFOBLASTISK LEUKÆMI/ LYMFOBLASTLYMFOM......................................................346 Case 15: T-lymfoblastisk leukæmi/ T-lymfoblastlymfom.......................................................346 T STORT GRANULÆRT LYMFOM..................................370 Case 16: T–celle lymfoproliferativ sygdom.......... 370 T STORT GRANULÆRT LYMFOM..................................394 Case 17: T–celle lymfoproliferativ sygdom..........394 NEOPLASTISK PROCES AF MYELOID-OPRINDELSE....418 AKUT MYELOID LEUKÆMI...............................................418 Case 18: Akut myeloid leukæmi................................. 418 AKUT MYELOID LEUKÆMI..............................................442 Case 19: Akut monocytleukæmi...............................442 AKUT MYELOID LEUKÆMI..............................................466 Case 20: Akut myeloid leukæmi-NOS..................466 AKUT MYELOID LEUKÆMI............................................. 490 Case 21: Akut promyelocytleukæmi...................... 490 AKUT MYELOID LEUKÆMI...............................................514 Case 22: Akut monocytleukæmi............................... 514 PRÆLEUKÆMI...................................................................... 538 Case 23: Præleukæmi.................................................... 538 PRÆLEUKÆMI......................................................................562 Case 24: Præleukæmi................................................... 562

Every Event Matters

2

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

INTRODUKTION Casehæftet er udviklet til at hjælpe med analysen af data til flowcytometrisk immunfænotypebestemmelse af data genereret ved hjælp af Beckman Coulters ClearLLab 10C-paneler CE-IVD-markeret reagens til leukæmi- og lymfomanalyse på Beckman Coulter Navios- og Navios EX-flowcytometrene. Prøvecases med karakteristiske fund, der er typiske for forskellige lymfe- og myeloidtumorer, er inkluderet, og det samme gælder tilfælde fra patienter med kliniske og/eller laboratoriefund, der tyder på en underliggende neoplastisk proces, men hvor der ikke er identificeret en immunfænotypebestemt abnormitet. Prøvetyper omfatter perifert blod, knoglemarv og lymfeknuder. Hvert tilfælde indeholder en klinisk vignet, der beskriver patientdemografien og anamnesen, case-specifikke listmode- datafiler til ny analyse udført af brugeren af dette casehæfte, specifikke analyseprotokoller til ClearLLab 10C, der skal bruges sammen med listmode-dataene og en rapport, der viser analysen med de leverede protokoller. Hver rapport indeholder analysenoter, der fremhæver de immunfænotypebestemte fund samt potentielle faldgruber. BEMÆRK: Eksempler fra casehæftet er kun tilvejebragt til illustrative formål, og ikke alle kategorier af hæmatolymphoide tumorer kan være repræsenteret, og det er heller ikke alle mulige immunfænotypebestemte varianter, der er beskrevet eller påvist. BAGGRUND Flowcytometrisk immunfænotypebestemmelse evaluerer tilstedeværelsen og manglen på specifikke antigener for hver enkelt celle i prøven. Samlet set genererer disse resultater en immunfænotypebestemt profil for hver enkelt celle, som enten er i overensstemmelse med en forventet population (dvs. normal) eller uoverensstemmende med en forventet population (dvs. atypisk) i denne prøvetype. I forbindelse med evaluering af prøver fra patienter med mistanke om hæmatolymphoide maligniteter omfatter det flere trin 1 :

• Vurdering af alle cellepopulationer i prøven.

• Tildeling af hver cellepopulation til enten ”normal” eller ”atypisk”.

• Detaljeret karakterisering af den atypiske population i henhold til tilstedeværelsen eller manglen på antigener samt øget eller reduceret farveintensitet efter flourokrommærkede antistoffer. • Fortolkning af den atypiske immunfænotype, herunder, hvis relevant, yderligere oplysninger som f.eks. klinisk historik, histologi, bytologi, immonohistokemi og genotypebestemmelsesstudier, f.eks. in situ-hybridisering, karyotypebestemmelse og molekylær diagnosticering.

Every Event Matters

3

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

ENSTEMMIGE ANBEFALINGER FOR IMMUNFÆNOTYPEBESTEMMELSE I løbet af de seneste årtier er enstemmige anbefalinger for flowcytometrisk immunfænotypebestemmelse af prøver fra patienter med kendte eller mulige hæmatolymphoide maligniteter opstået, og der er udgivet flere forskellige retningslinjer i den videnskabelige litteratur. Flowcytometrisk immunfænotypebestemmelse er inkluderet i WHO classification of Tumors of Haematopoetic and Lymphoid Tissues since 2008 2 . Medicinske indikationer og validering af flowcymetrianalyse, herunder testdetaljer for præanalyse, analyse og postanalyse er beskrevet i 2006 Bethesda International Consensus Conference recommendations 3,4,5 og ICSH/ICCS practice guidelines for cell-based fluorescence assays 6,7,8 . ClearLLab 10C-PANELER – TILSIGTET ANVENDELSE ClearLLab 10C-panelerne er beregnet til in vitro-diagnostisk anvendelse til kvalitativ identifikation af cellepopulationer via immunfænotypebestemmelse med flere parametre på Navios- og Navios EX-flowcytometre. Disse reagenser anvendes som hjælpemiddel til differentialdiagnosen af hæmatologisk unormale patienter med eller med mistanke om de følgende hæmatopoietiske tumorer: kronisk leukæmi, akut leukæmi, non‑Hodgkins lymfom, myelom, myelodysplastisk syndrom (MDS) og/eller myeloproliferative neoplasmer (MPN). Reagenserne kan anvendes med perifert fuldblod (indsamlet i K 2 EDTA, ACD (Acid Citrate Dextrose – syrecitratdextrose) eller Heparin), knoglemarv (indsamlet i K 2 EDTA, ACD eller Heparin) og lymfeknudeprøver. Fortolkning af resultaterne skal bekræftes af en patolog eller tilsvarende fagperson i forbindelse med andre kliniske fund og laboratoriefund.

Disse reagenser leverer kvalitative resultater med flere parametre til de nedenstående overfladeantigener:

ClearLLab 10C-paneler

Blå laser

Rød laser

Violet laser

APC- A750 PB KRO

Delnr.

Prøverør

FITC PE ECD PC5,5 PC7 APC APC- A700

B96805 B-cellerør

Kappa Lambda CD10 CD5 CD200 CD34 CD38 CD20 CD19 CD45

B96806 T-cellerør

CD4

CD2 CD56 CD5 CD34 CD7

CD8

CD3 CD45

TCR γδ

B96807 M1-cellerør

CD16

CD7

CD10 CD13 CD64 CD34 CD14 HLA-DR CD11b CD45

B96808 M2-cellerør

CD15

CD123 CD117 CD13 CD33 CD34 CD38 HLA-DR CD19 CD45

Every Event Matters

4

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

ClearLLab-KOMPENSATIONSSÆT

Blå laser

Rød laser

Violet laser

APC- A750 PB KRO

Delnr.

FITC

PE

ECD PC5,5

PC7

APC APC- A700

B74074

CD4

CD4

CD3

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD8

Ovenstående reagens leveres i standardformat til brug med reagenser til prøveklargøring og cytometeropsætning sammen med software til dataindsamling og dataanalyse. ClearLLab 10C-paneler overholder anbefalingerne til standardisering som angivet i Bethesda-retningslinjerne 2 . Yderligere oplysninger om ClearLLab 10C-paneler findes på beckman.com/ClearLLab . CASEVALG OG FORTOLKNING

Dataene i dette casehæfte er genereret ved at følge den procedure, som er beskrevet i detaljer i brugsanvisningen til ClearLLab 10C-paneler, som er tilgængelig på beckman.com .

Repræsentative cases er udvalgt fra kliniske forsøgsdata og gennemgået, annoteret og fortolket af:

Brent Wood MD PhD Professor, Laboratory Medicine and Pathology Division Head, Hematopathology Director, Hematopathology Laboratory and SCCA Pathology Medical Director, SCCA Laboratories University of Washington, Seattle, WA, USA

Xueyan Chen, MD, PhD Assistant Professor, Laboratory Medicine Associate Director, Hematopathology Laboratory University of Washington, Seattle, WA

Yi Zhou, MD PhD Assistant Professor

Department of Laboratory Medicine University of Washington, Seattle, WA

Analyseprotokoller: Download ClearLLab 10C-analyseprotokollen. Analyse: Download casespecifikke Kaluza C-analysefiler.

Every Event Matters

5

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

REFERENCER 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms. F.E. Craig, K.A. Foon. Blood. 2008; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Swerdlow SH, et al. Blood. 2016;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Arber DA, et al. Blood 2016 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia. Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications. Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S5-13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia. Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues. Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):291-308. doi: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations. Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):309-14. doi: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria. Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):315-23. doi: 10.1002/cyto.b.2110 RELATEREDE DOKUMENTER • ClearLLab 10C Application System Guide (Systemvejledning til applikationen ClearLLab 10C), Delnr. C28522AA • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use (Brugsanvisning til Kaluza C-flowcytometrisoftware), Delnr. C20149 • Navios Flow Cytometer Instructions For Use (Brugsanvisning til Navios-flowcytometer), Delnr. 774534AG • Navios EX Flow Cytometer Instructions For Use (Brugsanvisning til Navios EX-flowcytometer), Delnr. B77114AC • ClearLLab 10C Panels Instructions For Use (Brugsanvisning til ClearLLab 10C-paneler), Delnr. C00197 • ClearLLab Compensation Beads Instructions For Use (Brugsanvisning til ClearLLab-kompenseringsperler), Delnr. C00201 • ClearLLab Compensation Kit Instructions For Use (Brugsanvisning til ClearLLab-kompenseringssæt), Delnr. B74074 • ClearLLab Control Cells Instructions For use (Brugsanvisning til ClearLLab-kontrolceller), Delnr. B99884 • ClearLLab Control Cells QC Analysis Protocols Download Addendum (Tillæg til download af protokoller til kvalitetskontrolanalyse af ClearLLab-kontrolceller), Delnr. C33264AA

Every Event Matters

6

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

CASES

Følgende farvepræcedensgating anvendes på casene:

Lymphocytter (Gate Ly)/NK-celler: rød CD19+ B-celler: orange CD3+ T-celler: aqua

Monocytter (Gate Mo): grøn Granulocytter (Gate Gr): blå CD45dim: lilla

Yderligere atypiske populationer: turkis CD45-negativ population: grå

INGEN IMMUNFÆNOTYPEBESTEMT ANOMALITET Flowcytometri er enmetode til karakterisering af leukocytpopulationer. Det kan bruges somhjælpemiddel ved differentialdiagnosen af hæmatologisk unormale patienter med eller med mistanke om hæmatopoietisk dysplasi, herunder kronisk leukæmi, akut leukæmi, non-Hodgkins lymfom, lymfom, myelom, myelodysplastisk syndrom (MDS) og/eller myeloproliferative neoplasmer (MPN). Kendskab til normale cellepopulationer i prøver med fuldblod, knoglemarv og lymfeknudevæv er afgørende for identifikation af atypiske populationer i disse kliniske situationer. De følgende er eksempler på normale prøver farvet med ClearLLab 10C-paneler.

PERIFERT BLOD Case 1: Normalt helblod

Klinisk vignet

Denne 65-årige mand har trombocytopeni. En normal fuldblodsprøve sendes til flowcytometrisk immunfænotypebestemmelse ved hjælp af ClearLLab 10C-paneler.

Flowcytometrisk immunfænotypebestemmelse

B-cellerør

Figur 1: Dette punktdiagram over Time (Tid) vs. CD45 er ikke-gated og viser alle hændelser samlet sekventielt. Formålet med diagrammet er at evaluere for afvigelse under prøveindsamling. En stabil indsamling repræsenteres af et ensartet mønster af hændelser over tid. Hændelser, som afviger fra det stabile mønster, kan udelukkes i gaten Time (Tid).

Figur 2: Dette punktdiagram over FS INT vs. FS PEAK viser hændelser i gaten Time (Tid). Formålet med diagrammet er at udelukke celledubletter eller aggregater. Singlet-hændelser viser en lineær relation for INT vs. PEAK og er inkluderet i gaten Singlets (Singlets), mens dubletter ligger uden for den lineære relation.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

7

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

B-cellerør

Figur 3: Dette punktdiagram for Side Scatter (Sidespredning) vs. Forward Scatter (Fremadspredning) viser hændelser i gaten Singlets (Singlets). Diagrammets formål er at udelukke cellerester, som normalt har reduceret fremadspredning. Tidlige apoptotiske celler har også mildt øget sidespredning, mens sene apoptotiske celler og nekrotiske celler har variabel reduceret sidespredning. Levedygtige celler er inkluderet i gaten Cells (Celler).

Figur 4: Dette punktdiagram for CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gaten Cells (Celler). Dette diagram har til formål at fremhæve forskellige delmængder af hvide blodceller, somgates somCD45-positive. Den CD45-negative population omfatter normalt røde blodceller, blodpladeaggregater, vævsrester eller ikke-hæmatopoietiske celler.

Figur 5: Dette punktdiagramfor CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gatenCD45+. Dette punktdiagramgivermulighed for skelnenmellemflere forskellige populationer af hvide blodlegemer, som normalt findes i prøver fra perifert blod, knoglemarv og lymfekirtler, herunder lymfocytter (gate Ly, rød/orange), monocytter (gate Mo, grøn) og granulocytter (gate Gr, blå). Gaten CD45dim (uklar) (lilla) dækker det område, somnormalt optages af tidlige progenitorer, dvs. myeloblaster ogumodne B-celler. Basofiler, plasmacytoiddendritiske celler, plasmaceller og NK-celler kan også blive vist i dette område. Ved at anvende forskellige farver på hændelserne i hver gate, er det muligt at identificere de forskellige populationer i analysen.

Figur 6: Dette punktdiagram for CD19 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gaten Cells (Celler). Gaten CD19+ identificerer CD19-positive celler. CD19 udtrykkes på modne og umodne B-celler samt i de fleste plasmaceller. Disse celler har normalt lav til moderat sidespredning.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

8

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

B-cellerør

Figur 7: Dette punktdiagram over Kappa vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. Overflade kappa let kæde udtrykkes på modne B-celler (orange) og umodne B-celler på et sent stadie. Andelen af kappa-positive B-celler er normalt større end andelen af kappa-negative (lambda-positive) B-celler. Tydelig kappa-positivitet ses påmonocytter (grøn) grundet Fc-receptormedieret binding af immunglobulin. De kappa-positive celler med let kæde vises til højre i diagrammet.

Figur 8: Dette punktdiagram over Lambda vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. Overflade lambda let kæde udtrykkes på modne B-celler (orange) og umodne B-celler på et sent stadie. Andelen af lambda-positive B-celler er normalt mindre end andelen af lambda-negative (kappa-positive) B-celler. Tydelig lambda-positivitet ses påmonocytter (grøn) grundet Fc-receptormedieret binding af immunglobulin. De lambda-positive celler med let kæde vises til højre i diagrammet.

Figur 9: Dette punktdiagram over CD10 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD10 udtrykkes på umodne B-celler, modne B-celler i kimcentret ogmodne granulocytter (blå). Granulocytterne har høj sidespredning i modsætning til lymfoidceller, som har lav sidespredning.

Figur 10: Dette punktdiagram over CD5 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD5 udtrykkes på umodne og modne T-celler (rød, nederst til højre) samt uklart på en delmængde af modne B-celler (orange). Disse lymfoidceller har normalt lav sidespredning.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

9

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

B-cellerør

Figur 11: Dette punktdiagram over CD200 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD200 udtrykkes normalt på B-celler, men er negativ i visse neoplastiske B-celler. Dette er normalt nyttigt i forbindelse med skelnen mellem mantle cellelymfom (normalt CD200-negativ) og kronisk lymfatisk leukæmi/lille lymfocytisk lymfom (normalt CD200-positiv).

Figur 12: Dette punktdiagram over CD34 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD34 er en markør for tidlige hæmatopoietiske progenitorer. Det udtrykkes på hæmatopoietiske stamceller, tidligemyeloidprogenitorer (myeloblaster) og umodne B- og T-celler (lymfoblaster). Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34. CD34-positive progenitorer udgør normalt mindre end 0,01 % af de hvide blodlegemer i perifert blod.

Figur 13: Dette punktdiagram over CD38 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD38 er en aktiveringsmarkør. Det udtrykkes ved det højeste niveau af plasmaceller, ved et moderat niveau af umodne myeloide og lymfoide progenitorer, ved et lavt niveau på monocytter (grøn) og ved et variabelt niveau på aktiverede modne lymfocytter.

Figur 14: Dette punktdiagram over CD20 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD20 udtrykkes på modne B-celler (orange) og ved et variabelt lavt niveau på en delmængde af modne T-celler. Det udtrykkes variabelt på umodne B-celler på senere stadie. CD20-positive celler findes normalt i lymfocytgate med lav sidespredning.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

10

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

B-cellerør

Figur 15. Dette Lambda vs. Kappa-punktdiagram viser alle CD19+-celler. De tidlige umodne B-celler (lilla) udtrykker ikke overflade-immunglobulin lette kæder, dvs. negativ for hverken kappa eller lambda let kæde. De modne B-celler er polyklonale og udtrykker hverken kappa eller lambda let kæde. Det normalt kappa til lambda- forhold er 1,4 med et område mellem 1 og 2. Øge baggrund på grund af tilhørende plasmaimmunglobulin er almindelig.

Figur 16. Dette CD19 vs. CD20-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). Modne B-celler udtrykker både CD19 og CD20 (orange). Visse neoplastiske B-celler kan vise reduceret CD19 eller CD20-udtryk.

Figur 17. Dette CD19 vs. CD10-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). B-celler er CD19-positive (orange). CD10-positive, modne B-celler er fordelt i kimcentre i lymfekirtler, og en mindre delmængde af umodne B-celler på sent stadie findes i opsugninger af perifert blod og knoglemarv.

Figur 18. Dette CD38 vs. CD10-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). CD38 udtrykkes på det højeste niveau på plasmaceller, på et moderat niveau på umodne B-celler og på et lavt niveau på B-celler i kimcentret. De fleste modne B-celler (orange) viser lav til manglende udtryk af CD38. T-celler (røde) viser et variabelt CD38-udtryk afhængigt af aktiveringstilstand.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

11

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

B-cellerør

Figur 19. Dette CD20 vs. CD10-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). De fleste modne B-celler udtrykker høje niveauer af CD20 uden CD10.

Figur 20. Dette CD19 vs. CD5-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). CD5 udtrykkes på T-celler (rød, øverst til venstre), udtrykkes variabelt på lavt niveau på en delmængde af normale, modne B-celler (orange) og udtrykkes på visse delmængder af neoplastiske B-celler.

Figur 21. Dette CD20 vs. CD200-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). De fleste modne B-celler (orange) udtrykker CD200 på lavt til moderat niveau.

Figur 22. Dette CD5 vs. CD200-punktdiagramviser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). De fleste modne B-celler udtrykker normalt CD200med en delmængde, som variabelt udtrykker CD5. Neoplastiske B-celler i kronisk lymfatisk leukæmi/lille lymfocytisk lymfom udtrykker normalt CD5 og CD200, hvorimod mantle cellelymfom normalt udtrykker CD5, men ikke CD200.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

12

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

T-cellerør

Figur 1: Dette punktdiagram over Time (Tid) vs. CD45 er ikke-gated og viser alle hændelser samlet sekventielt. Formålet med diagrammet er at evaluere for afvigelse under prøveindsamling. En stabil indsamling repræsenteres af et ensartet mønster af hændelser over tid. Hændelser, som afviger fra det stabile mønster, kan udelukkes i gaten Time (Tid).

Figur 2: Dette punktdiagram over FS INT vs. FS PEAK viser hændelser i gaten Time (Tid). Formålet med diagrammet er at udelukke celledubletter eller aggregater. Singlet-hændelser viser en lineær relation for INT vs. PEAK og er inkluderet i gaten Singlets (Singlets), mens dubletter ligger uden for den lineære relation.

Figur 3: Dette punktdiagram for Side Scatter (Sidespredning) vs. Forward Scatter (Fremadspredning) viser hændelser i gaten Singlets (Singlets). Diagrammets formål er at udelukke cellerester, som normalt har reduceret fremadspredning med øget sidespredning. Tidlige apoptotiske celler har også mildt øget sidespredning, mens sene apoptotiske celler og nekrotiske celler har variabel reduceret sidespredning. Levedygtige celler er inkluderet i gaten Cells (Celler).

Figur 4: Dette punktdiagramfor CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gaten Cells (Celler). Dette diagram har til formål at fremhæve forskellige typer af hvide blodceller, som er CD45-positive. Den CD45-negative population omfatter normalt røde blodceller, blodpladeaggregater eller ikke-hæmatopoietiske celler.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

13

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

T-cellerør

Figur 5: Dette punktdiagram for CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gaten CD45+. Dette punktdiagram giver mulighed for skelnen mellem flere forskellige populationer af hvide blodlegemer, som normalt findes i prøver fra perifert blod, knoglemarv og lymfekirtler, herunder lymfocytter (gate Ly, rød/ aqua), monocytter (gate Mo, grøn) og granulocytter (gate Gr, blå). Gaten CD45dim (uklar) (lilla) dækker det område, som normalt optages af myeloblaster og umodne B-celler. Basofiler, plasmacytoiddendritiske celler, plasmaceller og NK-celler kan også falde inden for dette område. Ved at anvende forskellige farver på hændelserne i hver gate, er det muligt at følge de forskellige populationer i løbet af hele analysen.

Figur 6: Dette punktdiagram over CD3 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. Gaten CD3+ identificerer celler med CD3-overfladeudtryk (aqua). CD3 ermeget specifik for T-celler og udtrykkes kun på overfladen afmodne T-celler og senere stadier af umodne T-celler. Disse celler har normalt lav til moderat sidespredning.

Figur 8: Dette punktdiagram over CD4 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD4 udtrykkes på en delmængde af umodne og modne T-celler ved et højt niveau (aqua). CD4 udtrykkes også på monocytiske celler (grøn) ved et lavere niveau end for CD4-positive T-celler.

Figur 7: Dette punktdiagram over TCR γδ vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. TCR γδ er en underenhed af T-cellereceptor og udtrykkes på en lille delmængde af cytotoksiske T-celler. Disse celler har normalt lav sidespredning (aqua).

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

14

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

T-cellerør

Figur 9: Dette punktdiagram over CD2 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD2 er et antigen, som udtrykkes af næsten alle umodne og modne T-celler (aqua). CD2 udtrykkes også på NK-celler (rød, nederst til højre) og på lavere niveau på monocytter (grøn).

Figur 10: Dette punktdiagram over CD56 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD56 udtrykkes normalt på en større delmængde af NK-celler (rød), T-celler med naturlig dræberaktivitet (NK/T-celler) og mange gamma/delta T-celler (aqua). CD56 udtrykkes også delvist på monocytiske celler (grøn) under både reaktive og neoplastiske betingelser.

Figur 11: Dette punktdiagram over CD5 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD5 udtrykkes på de fleste umodne og modne T-celler (aqua) og ved et lavt niveau på en delmængde af modne B-celler. Med tidlige, umodne T-celler og gamma/delta T-celler har normalt meget lidt eller slet intet CD5-udtryk. En lille delmængde af NK-celler udtrykker CD5.

Figur 12: Dette punktdiagram over CD34 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD34 er en markør for tidlige hæmatopoietiske progenitorer. Det udtrykkes på hæmatopoietiske stamceller, tidligemyeloidprogenitorer (myeloblaster) og umodne B- og T-celler (lymfoblaster). Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34. CD34-positive progenitorer udgør normalt mindre end 0,01 % af de hvide blodlegemer i perifert blod.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

15

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

T-cellerør

Figur 13: Dette punktdiagram over CD7 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD7 udtrykkes på umodne T-celler i det tidligste stadie af T-celleudvikling og vedvarer i T-cellemodningen, hvor det udtrykkes variabelt på modne T-celler (aqua). Det udtrykkes også ensartet på NK-celler (rød, nederst til højre) oguklart på endelmængde af plasmacytoiddendritiske celler og endelmængde af de beslægtede CD34-positive progenitorer.

Figur 14: Dette punktdiagram over CD8 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD8 udtrykkes på en delmængde af umodne og modne T-celler (aqua) og definerer den cytotoksiske, modne T-cellepopulation. Det udtrykkes variabelt ved et lavt niveau af NK-celler og gamma-delta T-celler.

Figur 15. Dette CD3 vs. CD56-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). T-celler defineres af CD3-udtryk som det forefindes i alle modne T-celler og ikke udtrykkes af celler i andre slægter. NK-celler udtrykker pr. definition ikke overflade CD3, men udtrykker CD56 på en større delmængde (rød, øverst til venstre). Mindre delmængder af modne T-celler udtrykker også CD56, særligt T-celler med naturlig dræberaktivitet (NK/T-celler) og gamma-delta T-celler.

Figur 16. Dette CD5 vs. CD3-punktdiagramviser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). CD3 og CD5 udtrykkes samtidig på de fleste modne T-celler (aqua), selvom en mindre delmængde af cytotoksiske T-celler med en stor granulær lymfocytmorfologi ofte viser reduceret til intet udtryk af CD5. CD5 udtrykkes ikke på de fleste NK-celler.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

16

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

T-cellerør

Figur 17. Dette CD7 vs. CD2-punktdiagramviser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). CD2 og CD7 udtrykkes sammen på størstedelen af modne T-celler (aqua) og NK-celler (rød, øverst til højre).

Figur 18. Dette CD8 vs. CD4-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). CD3-positive T-celler (aqua) indeholder CD4-positive (hjælper) og CD8-positive (cytotoksiske ) delmængder. Antallet af CD4-positive T-celler er normalt højere end antallet af CD8-positive T-celler med et CD4:CD8-forhold på 1:1 til 4:1 i perifert blod. Lejlighedsvis dobbelt negative eller dobbelt positive T-celler med CD4 og CD8 findes også. De dobbelt negative T-celler består oftest af gamma/delta-T-celler. Bemærk, at CD4-positive, men CD3-negative celler (rød, midten til venstre) er monocytter, som er inkluderet i lymfocytgaten. Det demonstrerer, at gating med CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) ikke alene tillader ren lymfocytidentifikation.

Figur 19. Dette CD3 vs. CD4-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). Alle CD4-positive T-celler udtrykker CD3. Monocytter og plasmacytoiddendritiske celler udtrykker CD4 ved et lavere niveau end CD4-positive T-celler og mangler CD3-udtryk. NK-celler mangler udtryk af både CD3 og CD4.

Figur 20. Dette CD3 vs. CD8-punktdiagram viser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). Alle CD8-positive T-celler udtrykker CD3 (aqua). En lille delmængde af NK-celler udtrykker også CD8 (rød, øverst til venstre) uden CD3.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

17

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

T-cellerør

Figur 21. Dette CD3 vs. TCR γδ -punktdiagramviser alle celler i lymfocyt-gaten (Ly). En mindre delmængde af T-celler udtrykker TCR gamma/delta, som udtrykkes samlet sammen med CD3. Den meget lineære relation mellem CD3 og TCR skyldes deres tilstedeværelse som et heterodimerisk kompleks med et fast 1:1-forhold, så øget udtryk af det ene vil også give et øget udtryk af det andet.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

18

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M1-cellerør

Figur 1: Dette punktdiagram over Time (Tid) vs. CD45 er ikke-gated og viser alle hændelser samlet sekventielt. Formålet med diagrammet er at evaluere for afvigelse under prøveindsamling. En stabil indsamling repræsenteres af et ensartet mønster af hændelser over tid. Hændelser, som afviger fra det stabile mønster, kan udelukkes i gaten Time (Tid).

Figur 2: Dette punktdiagram over FS INT vs. FS PEAK viser hændelser i gaten Time (Tid). Formålet med diagrammet er at udelukke celledubletter eller aggregater. Singlet-hændelser viser en lineær relation for INT vs. PEAK og er inkluderet i gaten Singlets (Singlets), mens dubletter ligger uden for den lineære relation.

Figur 3: Dette punktdiagram for Side Scatter (Sidespredning) vs. Forward Scatter (Fremadspredning) viser hændelser i gaten Singlets (Singlets). Diagrammets formål er at udelukke cellerester, som normalt har reduceret fremadspredning med øget sidespredning. Tidlige apoptotiske celler har også mildt øget sidespredning, mens sene apoptotiske celler og nekrotiske celler har variabel reduceret sidespredning. Levedygtige celler er inkluderet i gaten Cells (Celler).

Figur 4: Dette punktdiagram for CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gaten Cells (Celler). Dette diagram har til formål at fremhæve forskellige delmængder af hvide blodceller, somgates somCD45-positive. Den CD45-negative population omfatter normalt røde blodceller, blodpladeaggregater, vævsrester eller ikke-hæmatopoietiske celler.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

19

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M1-cellerør

Figur 5: Dette punktdiagramfor CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gatenCD45+. Dette punktdiagramgivermulighed for skelnenmellemflere forskellige populationer af hvide blodlegemer, som normalt findes i prøver fra perifert blod, knoglemarv og lymfekirtler, herunder lymfocytter (gate Ly, rød), monocytter (gate Mo, grøn) og granulocytter (gate Gr, blå). Gaten CD45dim (uklar) (lilla) dækker det område, som normalt optages af myeloblaster og umodne B-celler. Basofiler, plasmacytoiddendritiske celler, plasmaceller og NK-celler kan også falde inden for dette område. Ved at anvende forskellige farver på hændelserne i hver gate, er det muligt at følge de forskellige populationer i løbet af hele analysen.

Figur 6: Dette punktdiagram over CD16 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD16 udtrykkes på højeste niveau på modne granulocytter (blå). De fleste NK-celler udtrykker CD16 (rød, nederst til højre) på samme måde som en delmængde af aktiverede monocytter gør (grøn).

Figur 7: Dette punktdiagram over CD7 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD7 udtrykkes på umodne T-celler i det tidligste stadie af T-celleudvikling og vedvarer i T-cellemodningen, hvor det udtrykkes variabelt på modne T-celler (rød, nederst til højre). Det udtrykkes også på NK-celler og uklart på en delmængde af plasmacytoiddendritiske celler og en delmængde af de beslægtede progenitorer.

Figur 8: Dette punktdiagram over CD10 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD10 udtrykkes på umodne B-celler, modne B-celler i kimcentret ogmodne granulocytter (blå). Granulocytterne har høj sidespredning i modsætning til lymfoidceller, som har lav sidespredning.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

20

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M1-cellerør

Figur 9: Dette punktdiagram over CD13 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD13 udtrykkes på modnende granulocytter (blå), modne monocytter (grøn), og myeloide progenitorer (lilla).

Figur 10: Dette punktdiagram over CD64 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD64 udtrykkes på højeste niveau på modne monocytter (grøn). CD64 udtrykkes ikke godt på hvilende, modne granulocytter (blå), men udtrykket øges med granulocytaktivering. CD64 udtrykkes ikke på lymfocytter (rød) eller de fleste CD34-positive progenitorer. Aktiverede, modne monocytter udtrykker CD64 på et lavere niveau og har lavere sidespredning.

Figur 11: Dette punktdiagram over CD34 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD34 er en markør for tidlige hæmatopoietiske progenitorer. Det udtrykkes på hæmatopoietiske stamceller, tidligemyeloidprogenitorer (myeloblaster) og umodne B- og T-celler (lymfoblaster). Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34. CD34-positive progenitorer udgør normalt mindre end 0,01 % af de hvide blodlegemer i perifert blod.

Figur 12: Dette punktdiagram over CD14 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD14 udtrykkes ved et højt niveau på modne monocytter (grøn) og ved et lavt niveau på modne granulocytter (blå). Aktiverede, modne monocytter udtrykker CD14 på et lavere niveau og har lavere sidespredning.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

21

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M1-cellerør

Figur 13: Dette punktdiagram over HLA-DR vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. HLA-DR udtrykkes på antigen-præsenterende celler, herunder monocytter (grøn) og plasmacytoiddendritiske celler. Det udtrykkes desuden på CD34-positive progenitorer, modne og umodne B-celler og i aktiverede T-celler.

Figur 14: Dette punktdiagram over CD11b vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD11b udtrykkes på granulocytter (blå) og monocytter (grøn). CD11b udtrykkes også på NK-celler og basofiler.

Figur 15. Dette CD11b vs. CD16-punktdiagram viser alle levedygtige celler. CD11b udtrykkes på monocytter (grøn), umodne og modne granulocytter (blå) og NK- celler (rød). CD16 udtrykkes på umodne og modne granulocytter (blå) og på en delmængde af NK-celler (rød, øverst til højre). Aktiverede, modne monocytter udtrykker CD16 på et variabelt niveau og er CD11b-positive.

Figur 16. Dette CD16 vs. CD13-punktdiagram viser alle levedygtige celler. CD13 udtrykkes på granulocytter (blå), monocytter (grøn), basofiler og CD34-positive progenitorer. CD16 udtrykkes påmodnende granulocytter (blå) og på en delmængde af NK-celler (rød, nederst til højre).

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

22

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M1-cellerør

Figur 17. Dette CD13 vs. CD34-punktdiagram viser alle levedygtige celler. CD13 udtrykkes på granulocytter (blå), monocytter (grøn), basofiler og CD34-positive progenitorer. CD34 udtrykkes på tidlige hæmatopoietiske progenitorer. Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34.

Figur 18. Dette CD14 vs. CD64-punktdiagram viser alle levedygtige celler. CD64 udtrykkes ved et højt niveau på monocytter (grøn) og ved et lavere niveau på granulocytter (blå). CD14 udtrykkes ved et højt niveau på monocytter og ved et lavere niveau på granulocytter (blå). Aktiverede, modne monocytter udtrykker CD14 og CD64 på et variabelt lavere niveau.

Figur19.DetteCD14vs.CD16-punktdiagramviseralle levedygtigeceller.CD14udtrykkes ved et højt niveau på monocytter (grøn) og ved et lavere niveau på granulocytter (blå, øverst til venstre). CD16 udtrykkes på granulocytter og på en delmængde af NK-celler (rød, i midten til venstre). Aktiverede, modne monocytter udtrykker CD14 og CD16 på et variabelt lavere niveau.

Figur 20. Dette HLA-DR vs. CD10-punktdiagramviser alle levedygtige celler. HLA-DR udtrykkes på monocytter (grøn), B-celler, plasmacytoiddendritiske celler og CD34- positive progenitorer. CD10 udtrykkes af modne granulocytter (blå).

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

23

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M1-cellerør

Figur 21. Dette CD7 vs. CD13-punktdiagramviser alle levedygtige celler. CD7 udtrykkes på T-celler og NK-celler (rød, nederst til højre). CD13 udtrykkes på granulocytter (blå), monocytter (grøn), basofiler og CD34-positive progenitorer. Samtidigt udtryk af CD13 og CD7 ses generelt ikke.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

24

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M2-cellerør

Figur 1: Dette punktdiagram over Time (Tid) vs. CD45 er ikke-gated og viser alle hændelser samlet sekventielt. Formålet med diagrammet er at evaluere for afvigelse under prøveindsamling. En stabil indsamling repræsenteres af et ensartet mønster af hændelser over tid. Hændelser, som afviger fra det stabile mønster, kan udelukkes i gaten Time (Tid).

Figur 2: Dette punktdiagram over FS INT vs. FS PEAK viser hændelser i gaten Time (Tid). Formålet med diagrammet er at udelukke celledubletter eller aggregater. Singlet-hændelser viser en lineær relation for INT vs. PEAK og er inkluderet i gaten Singlets (Singlets), mens dubletter ligger uden for den lineære relation.

Figur 3: Dette punktdiagram for Side Scatter (Sidespredning) vs. Forward Scatter (Fremadspredning) viser hændelser i gaten Singlets (Singlets). Diagrammets formål er at udelukke cellerester, som normalt har reduceret fremadspredning. Tidlige apoptotiske celler har også mildt øget sidespredning, mens sene apoptotiske celler og nekrotiske celler har variabel reduceret sidespredning. Levedygtige celler er inkluderet i gaten Cells (Celler).

Figur 4: Dette punktdiagram for CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gaten Cells (Celler). Dette diagram har til formål at fremhæve forskellige delmængder af hvide blodceller, somgates somCD45-positive. Den CD45-negative population omfatter normalt røde blodceller, blodpladeaggregater, vævsrester eller ikke-hæmatopoietiske celler.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

25

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M2-cellerør

Figur 5: Dette punktdiagramfor CD45 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser hændelser i gatenCD45+. Dette punktdiagramgivermulighed for skelnenmellemflere forskellige populationer af hvide blodlegemer, som normalt findes i prøver fra perifert blod, knoglemarv og lymfekirtler, herunder lymfocytter (gate Ly, rød), monocytter (gate Mo, grøn) og granulocytter (gate Gr, blå). Gaten CD45dim (uklar) (lilla) dækker det område, som normalt optages af myeloblaster og umodne B-celler. Basofiler, plasmacytoiddendritiske celler, plasmaceller og NK-celler kan også falde inden for dette område. Ved at anvende forskellige farver på hændelserne i hver gate, er det muligt at følge de forskellige populationer i løbet af hele analysen.

Figur 6: Dette punktdiagram over CD15 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD15 udtrykkes på granulocytter (blå) og på lavere niveau på monocytter (grøn).

Figur 7: Dette punktdiagram over CD123 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD123 udtrykkes ved et højt niveau af basofiler og plasmacytoiddendritiske celler og ved et lavere niveau på CD34-positive myeloidprogenitorer og monocytter (grøn).

Figur 8: Dette punktdiagram over CD117 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD117 udtrykkes variabelt på CD34-positive myeloidprogenitorer, tidlige promyelocytter og tidlige erythroide præmarkører og ved et højt niveau på mastceller. CD117 udtrykkes også på delmængder af reaktiveNK-celler og neoplastiske plasmaceller. Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD117.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

26

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M2-cellerør

Figur 9: Dette punktdiagram over CD13 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD13 udtrykkes på granulocytter (blå) og modne monocytter (grøn) og variabelt på myeloidprogenitorer.

Figur 10: Dette punktdiagram over CD33 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD33 udtrykkes ved et højt niveau påmonocytter (grøn) og ved et lavere niveau på granulocytter (blå). CD33 udtrykkes også på basofiler, en delmængde af NK-celler (rød) og en delmængde af CD34-positive myeloidprogenitorer.

Figur 11: Dette punktdiagram over CD34 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD34 er en markør for tidlige hæmatopoietiske progenitorer. Det udtrykkes normalt på myeloidblaster, umodne B- og T-celler (lymfoblaster). Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34. CD34-positive progenitorer udgør normalt mindre end0,01 %af de hvide blodlegemer i perifert blod.

Figur 12: Dette punktdiagram over CD38 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD38 er en aktiveringsmarkør. Det udtrykkes ved det højeste niveau af plasmaceller, ved et moderat niveau af umodne myeloide og lymfoide progenitorer, på monocytter (grøn) og ved et variabelt lavt niveau på aktiverede modne lymfocytter (rød).

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

27

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB

M2-cellerør

Figur 13: Dette punktdiagram over HLA-DR vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. HLA-DR udtrykkes på antigen-præsenterende celler, herunder monocytter(grøn)ogplasmacytoiddendritiskeceller.DetudtrykkesdesudenpåCD34- positive progenitorer, modne B-celler (rød, nederst til højre) og i aktiverede T-celler.

Figur 14: Dette punktdiagram over CD19 vs. Side Scatter (Sidespredning) viser alle levedygtige celler. CD19 udtrykkes på umodne ogmodneB-celler (rød, nederst til højre) samt i de fleste plasmaceller. Disse celler har normalt lav til moderat sidespredning.

Figur 15. Dette CD34 vs. CD117-punktdiagram viser alle levedygtige celler. CD34 udtrykkes påmyeloidblaster og tidlige umodne B-cellepræmarkører. CD117 udtrykkes på myeloidblaster, promyelocytter og tidlige erythroide præmarkører, men negativt på tidlige B-cellepræmarkører. Modne granulocytter, monocytter og lymfocytter er negative for CD34 og CD117. CD34- og CD117-positive progenitorer udgør normalt mindre end 0,01 % af de hvide blodlegemer i perifert blod.

Figur 16. Dette CD33 vs. CD13-punktdiagram viser alle levedygtige celler. CD33 og CD13 udtrykkes påmonocytter (grøn), granulocytter (blå), basofiler ogCD34-positive progenitorer. Lymfocytter (rød) udtrykker generelt hverken CD13 eller CD33.

Indholdsfortegnelse > Ingen immunfænotypisk abnormitet > Case 1: Normalt helblod

Every Event Matters

28

Beckman Coulter • ClearLLab 10C-paneler • C33356 AB