ClearLLab 10C - TR - sürüm turque

Animated publication

LÖSEMİ / LENFOMA* ANALİZİ İÇİN CE ANTİKOR KOMBİNASYONLARI C LEAR LL AB 10C P ANELLERI

VAKA ÇALIŞMASI KİTABI

Her Olay Önemlidir * Yalnızca Non-Hodgkin Lenfoma

1

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

İÇINDEKILER

GIRIŞ..............................................................................................3 ARKA PLAN.................................................................................3 İMMÜNOFENOTIPLEME IÇIN KONSENSÜS TAVSIYELERI......................................................4 CLEARLLAB 10C PANELLERININ KULLANIM AMACI.......4 CLEARLLAB 10C PANELLERI..................................................4 CLEARLLAB KOMPANZASYON KITI......................................5 VAKA SEÇİMİ VE YORUMLAMA..............................................5 İLGILI BELGELER........................................................................6 REFERANSLAR...........................................................................6 VAKALAR.....................................................................................7 İMMÜNOFENOTIPIK ANORMALLIK YOK..............................7 PERİFERİK TAM KAN.............................................................. 7 Vaka 1: Normal Tam Kan.....................................................7 KEMIK ILIĞI................................................................................32 Vaka 2: Normal Kemik İliği.............................................32 LENF NODU............................................................................. 56 Vaka 3: Normal Lenf Düğümü......................................56 B HÜCRESI KÖKENININ NEOPLASTIK PROSESI............. 80 B LENFOBLASTIK LÖSEMI/ LENFOBLASTIK LENFOMA............................................... 80 Vaka 4: B Akut Lenfoblastik Lösemi/ Lenfoblastik Lenfoma..................................................... 80 B LENFOBLASTIK LÖSEMI/ LENFOBLASTIK LENFOMA..............................................105 Vaka 5: B Akut Lenfoblastik Lösemi/ Lenfoblastik Lenfoma....................................................105 KRONIK LENFOSITIK LÖSEMI/ KÜÇÜK LENFOSITIK LENFOMA.....................................130 Vaka 6: Kronik Lenfositik Lösemi/ Küçük Lenfositik Lenfoma...........................................130 KRONIK LENFOSITIK LÖSEMI/ KÜÇÜK LENFOSITIK LENFOMA.....................................154 Vaka 7: Kronik Lenfositik Lösemi/ Küçük Lenfositik Lenfoma........................................... 154 MANTLE HÜCRELI LENFOMA......................................... 178 Vaka 8: Mantle Hücreli Lenfoma................................178 PLAZMA HÜCRELI MIYELOM.........................................202 Vaka 9: Plazma Hücreli Miyelom..............................202

FOLIKÜLER LENFOMA...................................................... 226 Vaka 10: Foliküler Lenfoma......................................... 226 GERMINAL MERKEZ KÖKENLI B HÜCRELI LENFOMA...............................................................................250 Vaka 11: Germinal merkez kökenli B hücreli lenfoma................................................................................250 OLGUN B HÜCRELI LENFOMA...................................... 274 Vaka 12: Olgun B Hücreli Lenfoma...........................274 OLGUN B HÜCRELI LENFOMA......................................298 Vaka 13: Olgun B Hücreli Lenfoma.......................... 298 T HÜCRESI KÖKENININ NEOPLASTIK PROSESI........... 322 T LENFOBLASTIK LÖSEMI/LENFOBLASTIK LENFOMA............................................................................... 322 Vaka 14: T Lenfoblastik Lösemi/ T Lenfoblastik Lenfoma............................................... 322 T LENFOBLASTIK LÖSEMI/LENFOBLASTIK LENFOMA...............................................................................346 Vaka 15: T Lenfoblastik Lösemi/ T Lenfoblastik Lenfoma...............................................346 T BÜYÜK GRANÜLER LENFOMA..................................370 Vaka 16: T Hücreli Lenfoproliferatif Hastalık....... 370 T BÜYÜK GRANÜLER LENFOMA..................................394 Vaka 17: T hücreli lenfoproliferatif hastalık..........394 MİYELOİD KÖKENININ NEOPLASTIK PROSESI..............418 AKUT MIYELOID LÖSEMI...................................................418 Vaka 18: Akut Miyeloid Lösemi................................... 418 AKUT MIYELOID LÖSEMI..................................................442 Vaka 19: Akut Monositik Lösemi...............................442 AKUT MIYELOID LÖSEMI..................................................466 Vaka 20: Akut Miyeloid Lösemi-NOS....................466 AKUT MIYELOID LÖSEMI................................................. 490 Vaka 21: Akut Promiyelositik Lösemi..................... 490 AKUT MIYELOID LÖSEMI...................................................514 Vaka 22: Akut Monositik Lösemi............................... 514 MIYELODISPLASTIK SENDROM.................................... 538 Vaka 23: Miyelodisplastik Sendrom........................ 538 MIYELODISPLASTIK SENDROM....................................562 Vaka 24: Miyelodisplastik Sendrom........................ 562

Her Olay Önemlidir

2

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

GIRIŞ Bu vaka çalışması kitabı, Beckman Coulter Navios ve Navios EX akış sitometrilerinde Lösemi ve Lenfoma analizine yönelik Beckman Coulter’ın ClearLLab 10C Panelleri CE-IVD işaretli reaktif kullanılarak oluşturulan akış sitometrik immünofenotipleme verilerinin analizine yardımcı olması için tasarlanmıştır. Çeşitli lenfoid ve miyeloid neoplazmların tipik bulgularına özgü örnek vakalarla birlikte, altta yatan neoplastik prosesi işaret eden ancak immünofenotipik anormallik belirlenmeyen klinik ve/veya laboratuvar bulguları olan hastaların vakaları dahil edilmiştir. Numune tipleri periferik tam kan, kemik iliği ve lenf nodlarıdır. Her vaka, hastaların demografik bilgilerini ve klinik geçmişini açıklayan bir klinik senaryo, bu vaka çalışması kitabı kullanıcısı tarafından yeniden analiz edilmesi için vakaya özgü liste modu veri dosyaları, liste modu verileriyle kullanılacak olan ClearLLab 10C spesifik analiz protokolleri ve temin edilen protokollerle yapılan analizi gösteren bir rapor içermektedir. Her raporda, immünofenotipik bulgularla birlikte potansiyel tehlikelerin vurgulandığı analiz notları vardır. NOT: Vaka çalışması kitabı örnekleri yalnızca gösterim amaçlı olarak sağlanmıştır ve hematolenfoid neoplazmlarının tüm kategorileri sunulmayabilir ve olası tüm immünofenotipik varyantlar açıklanmamış veya ortaya konmamıştır. ARKA PLAN Akış sitometrili immünofenotipleme, numunede mevcut olan her bir hücre için spesifik antijenlerin varlığını ve yokluğunu değerlendirir. Birlikte ele alındığında bu sonuçlar, her bir hücre için, beklenen bir popülasyonla tutarlı (yani normal) veya o örnek tipinde beklenen popülasyonla tutarsız (yani atipik) bir immünofenotipik profil oluşturur. Şüpheli hematolenfoid maligniteleri olan hastalardan alınan örnekler değerlendirilirken, çeşitli adımlar dahil edilir 1 :

• Örnekteki tüm hücre popülasyonlarının değerlendirilmesi.

• Her hücre popülasyonunun “normal” veya “atipik” olarak atanması.

• Atipik popülasyonun, antijen varlığı veya yokluğuna göre ve ayrıca, florokrom etiketli antikorlarla boyanmaya ilişkin artan veya azalan yoğunluğa göre ayrıntılı karakterizasyonu. • Mevcut olduğunda, in situ hibridizasyon, karyotipleme ve moleküler tanı gibi genotipleme çalışmaları, klinik geçmiş, histoloji, sitoloji, immünohistokimya gibi ek bilgiler dahil edilerek atipik immünofenotipin yorumlanması.

Her Olay Önemlidir

3

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

İMMÜNOFENOTIPLEME IÇIN KONSENSÜS TAVSIYELERI Bilinen veya şüpheli hematolenfoidmaligniteleri olan hastalardan alınan örneklerin akış sitometrili immünofenotiplemesine ilişkin konsensüs tavsiyeleri, geçtiğimiz yirmi yılda ortaya çıkmıştır ve bilimsel literatürde çeşitli kılavuzlar yayınlanmıştır. Akış sitometrili immünofenotipleme, Hematopoietik ve Lenfoid Doku Tümörlerine ilişkin WHO sınıflandırmasına 2008 yılından bu yana dahildir 2 . Testlerin pre-analitik, analitik ve post-analitik ayrıntıları da dahil olmak üzere akış sitometrisi test validasyonu ve tıbbi endikasyonlar, 2006 Bethesda Uluslararası Konsensüs Konferansı tavsiyelerinde 3,4,5 ve hücre bazlı floresan testlerine ilişkin ICSH/ICCS uygulama kılavuzlarında ele alınmaktadır 6,7,8 . ClearLLab 10C PANELLERININ KULLANIM AMACI ClearLLab 10C Panelleri, Navios ve Navios EX akış sitometrilerinde çok parametreli immünofenotiplemeyle hücre popülasyonlarının niteliksel tanımına yönelik olarak in vitro diyagnostik kullanım için tasarlanmıştır. Bu reaktifler, şu hematopoietik neoplazmlara sahip veya sahip olduğundan kuşku duyulan hematolojik açıdan anormal hastalarda ayırıcı tanıya yardımcı olarak kullanılır: kronik lösemi, akut lösemi, Non-Hodgkin lenfoma, miyelom, miyelodisplastik sendrom (MDS) ve/veya miyeloproliferatif neoplazm (MPN). Reaktifler periferik tam kan (K 2 EDTA, Asit Sitrat Dekstroz (ACD) veya Heparinde toplanır), kemik iliği (K 2 EDTA, ACD veya Heparinde toplanır) ve lenf nodu örnekleri ile kullanılabilir. Sonuçların yorumu, bir patolog ya da eşdeğer uzman tarafından, diğer klinik bulgular ve laboratuvar bulgularıyla birlikte onaylanmalıdır.

Bu reaktifler, aşağıda listelenen yüzey antijenleri için çok parametreli, kalitatif sonuçlar sağlar:

ClearLLab 10C Panelleri

Mavi Lazer

Kırmızı Lazer

Mor Lazer

APC- A750 PB KRO

PN

Tüp

FITC PE ECD PC5.5 PC7 APC APC- A700

B96805 B Hücresi Tüpü

Kappa Lambda CD10 CD5 CD200 CD34 CD38 CD20 CD19 CD45

B96806 T Hücresi Tüpü

CD4 CD2 CD56 CD5 CD34 CD7

CD8

CD3 CD45

TCR γδ

B96807 M1 Hücresi Tüpü

CD16

CD7

CD10 CD13 CD64 CD34 CD14 HLA-DR CD11b CD45

B96808 M2 Hücresi Tüpü

CD15 CD123 CD117 CD13 CD33 CD34 CD38 HLA-DR CD19 CD45

Her Olay Önemlidir

4

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

ClearLLab KOMPANZASYON KITI

Mavi Lazer

Kırmızı Lazer

Mor Lazer

APC- A750 PB KRO

PN

FITC

PE

ECD PC5.5

PC7

APC APC- A700

B74074

CD4

CD4

CD3

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD8

Yukarıdaki reaktif, örnek hazırlama ile sitometre ayarı için reaktiflerle ve veri toplama ile analiz için yazılımla kullanılmak üzere standart hale getirilmiş bir biçimde temin edilir. ClearLLab 10C Panelleri, Bethesda kılavuzlarında özetlendiği şekilde, standardizasyon tavsiyelerine uygundur 2 . ClearLLab 10C Panelleri’ne ilişkin ek bilgiler beckman.com/ClearLLab adresinde bulunabilir. VAKA SEÇİMİ VE YORUMLAMA Bu vaka çalışması kitabında sunulan veriler, beckman.com adresinde bulunabilecek ClearLLab 10C Panel Instructions For Use (IFU) (ClearLLab 10C Panel Kullanma Talimatı) içinde ayrıntılı şekilde verilen prosedür izlenerek oluşturulmuştur. Klinik çalışma verilerinden temsili vakalar seçilmiştir ve aşağıdakiler tarafından incelenmiş, açıklama getirilmiş ve yorumlanmıştır:

Brent Wood MD PhD Profesör, Tıp ve Patoloji Laboratuvarı Bölüm Başkanı, Hematopatoloji Direktör, Hematopatoloji Laboratuvarı ve SCCA Patolojisi Tıbbi Direktör, SCCA Laboratuvarları University of Washington, Seattle, WA, ABD Xueyan Chen, MD, PhD Asistan Profesör, Tıp Laboratuvarı Direktör Yardımcısı, Hematopatoloji Laboratuvarı University of Washington, Seattle, WA

Yi Zhou, MD PhD Asistan Profesör Tıp Laboratuvarı Departmanı University of Washington, Seattle, WA

Analiz Protokolleri: ClearLLab 10C analiz protokolünü indirin. Analiz: Vakaya özgü Kaluza C analiz dosyalarını indirin.

Her Olay Önemlidir

5

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

REFERANSLAR 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms. F.E. Craig, K.A. Foon. Blood. 2008; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Swerdlow SH, et al. Blood. 2016;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Arber DA, et al. Blood 2016 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia. Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications. Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S5-13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia. Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues. Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):291-308. doi: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations. Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):309-14. doi: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria. Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):315-23. doi: 10.1002/cyto.b.2110 İLGILI BELGELER • ClearLLab 10C Application System Guide (ClearLLab 10C Uygulama Sistem Kılavuzu), PN C28529AA • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use (Kaluza C Akış Sitometrisi Yazılımı Kullanma Talimatı), PN C20173 • Navios Flow Cytometer Instructions For Use (Navios Akış Sitometresi Kullanma Talimatı), PN 774516AG • Navios EX Flow Cytometer Instructions For Use (Navios EX Akış Sitometresi Kullanma Talimatı), PN B77120AB • ClearLLab 10C Panels Instructions For Use (ClearLLab 10C Paneller Kullanma Talimatı), PN C00197 • ClearLLab Compensation Beads Instructions For Use (ClearLLab Compensation Beads Kullanma Talimatı), PN C00201 • ClearLLab Compensation Kit Instructions For Use (ClearLLab Kompanzasyon Kiti Kullanma Talimatı), PN B74074 • ClearLLab Control Cells Instructions For use (ClearLLab Control Cells Kullanma Talimatı), PN B99884 • ClearLLab Control Cells QC Analysis Protocols Download Addendum (ClearLLab Control Cells QC Analizi Protokol İndirme Eki), PN C33271AA

Her Olay Önemlidir

6

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

VAKALAR

Vakalara aşağıdaki Renk Önceliği Geçidi uygulanır:

Lenfositler (Ly (Ly) Geçidi)/NK hücreler: kırmızı

Monositler (Mo (Mo) geçidi): yeşil Granülositler (Gr (Gr) geçidi): mavi

CD45dim: mor Diğer Atipik popülasyonlar: deniz mavisi CD45 negatif popülasyon: gri

CD19+ B hücreleri: turuncu CD3+ T hücreleri: açık mavi

İMMÜNOFENOTIPIK ANORMALLIK YOK Akış sitometrisi, lökosit popülasyonlarının karakterizasyonu için bir yöntemdir. Kronik lösemi, akut lösemi, Non-Hodgkin lenfoma, miyelom, miyelodisplastik sendrom (MDS) ve/veya miyeloproliferatif neoplazm (MPN) gibi hematopoietik neoplazma sahip veya sahip olduğundan kuşku duyulan hematolojik açıdan anormal hastalarda ayırıcı tanıya yardımcı olabilir. Bu klinik durumlarda atipik popülasyonların tanımlanmasında, tam kan, kemik iliği ve lenf nodu doku örneklerinde mevcut olan normal hücre popülasyonlarına aşinalık kritik önemdedir. Aşağıda, ClearLLab 10C panelleriyle boyanan normal örneklere ilişkin örnekler verilmiştir.

PERİFERİK TAM KAN Vaka 1: Normal Tam Kan

Klinik Senaryo

65 yaşındaki bu erkekte trombositopeni vardır. Bir periferik tam kan örneği, ClearLLab 10C Panelleri kullanılarak akış sitometrili immünofenotipleme yapılması için gönderilir.

Akış Sitometrili İmmünofenotipleme

B Hücresi Tüpü

Şekil 1: Bu Time (Zaman) vs CD45 (CD45) nokta grafiği geçitsizdir ve toplanan tüm olayları sıralı olarak göstermektedir. Bu grafik, örnek alımı esnasındaki sıvı pertürbasyonunu değerlendirmek içindir. Stabil alım, zaman içerisinde olayların üniformpaterniyle görülür. Stabil paternden sapan olaylar, Time (Zaman) geçidinde dışarıda bırakılabilir.

Şekil 2: FS INT (FS İNT) vs FS PEAK (FS PİK) nokta grafiğinde, Time (Zaman) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, tüm hücre çiftleri veya agregatlarının dışarıda bırakılması içindir. Tekil olayları, INT (İNT) vs PEAK (PİK) için doğrusal ilişki gösterir ve Singlets (Tekliler) geçidine eklenir, çiftlilerse doğrusal ilişkinin dışında yer alır.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

7

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

B Hücresi Tüpü

Şekil 3: Bu Side Scatter (Yana Yayılım) vs Forward Scatter (İleri Yayılım) nokta grafiğinde Singlets (Tekliler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, genelde düşük ileri yayılımı olan hücre kalıntılarının dışarıda bırakılması içindir. Erken apoptotik hücrelerin orta seviyede yüksek yana yayılımı da vardır, geç apoptotik ve nekrotik hücrelerin ise değişken düşük yana yayılımı vardır. Canlı hücreler, Cells (Hücreler) geçidine dahil edilmektedir.

Şekil 4: Bu CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, Cells (Hücreler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, CD45 pozitif olarak geçitlenmiş olan çeşitli beyaz kan hücresi alt gruplarını vurgulamak içindir. CD45 negatif popülasyon genelde kırmızı kan hücrelerini, trombosit agregatlarını, doku kalıntılarını veya hematopoietik olmayan hücreleri içerir.

Şekil 5: Bu CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, CD45+ (CD45+) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu nokta grafiği, periferik kan, kemik iliği ve lenf düğümü örneklerinde tipik olarak bulunan, lenfositler (Ly (Ly) geçidi, kırmızı/turuncu), monositler (Mo (Mo) geçidi, yeşil) ve granülositler (Gr (Gr) Geçidi, mavi) gibi çeşitli beyaz kan hücresi popülasyonlarının ayırt edilmesini sağlar. CD45dim (CD45 belirsiz) geçidi (mor), tipik olarak, miyeloblastlar ve immatür B hücreler gibi erken progenitörlerin bulunduğu alanı kapsar. Bu alanda bazofiller, plazmasitoid dendritik hücreler, plazma hücreleri ve NK hücreler de görülebilir. Her geçidin oluşturduğu olaylara farklı renkler uygulanarak, analiz boyunca çeşitli popülasyonlar tanımlanabilir.

Şekil 6: Bu CD19 (CD19) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, Cells (Hücreler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. CD19+ (CD19+) geçidi, CD19 pozitif hücreleri tanımlar. CD19, olgun ve immatür B hücrelerle birlikte çoğu plazma hücresinde eksprese edilir. Bu hücreler tipik olarak, düşük ila orta seviyede yana yayılıma sahiptir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

8

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

B Hücresi Tüpü

Şekil 7: Bu Kappa (Kappa) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. Yüzey kappa hafif zinciri, olgun B hücrelerinde (turuncu) ve ileri evre immatür B hücrelerinde eksprese edilir. Kappa pozitif B hücrelerinin oranı normalde, kappa negatif (lambda pozitif) B hücrelerinden yüksektir. Fc reseptörü aracılı immünoglobulin bağlanması nedeniyle, monositlerde (yeşil) belirgin kappa pozitifliği görülür. Kappa hafif zinciri pozitif hücreler, grafiğin sağ tarafında gösterilmektedir.

Şekil 8: Bu Lambda (Lambda) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. Yüzey lambda hafif zinciri, olgun B hücrelerinde (turuncu) ve ileri evre immatür B hücrelerinde eksprese edilir. Lambda pozitif B hücrelerinin oranı normalde, lambda negatif (kappa pozitif) B hücrelerinden düşüktür. Fc reseptörü aracılı immünoglobulin bağlanması nedeniyle, monositlerde (yeşil) belirgin lambda pozitifliği görülür. Lambda hafif zinciri pozitif hücreler, grafiğin sağ tarafında gösterilmektedir.

Şekil 9: Bu CD10 (CD10) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD10, immatür B hücrelerinde, olgun germinal merkez B hücrelerinde ve olgun granülositlerde (mavi) eksprese edilir. Düşük yana yayılımı olan lenfoid hücrelerin aksine granülositlerin yüksek yana yayılımı vardır.

Şekil 10: Bu CD5 (CD5) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD5, immatür ve olgun T hücrelerinde (kırmızı, sağ alt) eksprese edilir ve olgun B hücrelerin bir alt grubunda (turuncu) belirsiz biçimde eksprese edilir. Bu lenfoid hücreler tipik olarak düşük seviyede yana yayılıma sahiptir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

9

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

B Hücresi Tüpü

Şekil 11: Bu CD200 (CD200) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD200 tipik olarak B hücrelerinde eksprese edilir, ancak bazı neoplastik B hücrelerinde negatiftir. Özellikle, mantle hücreli lenfomanın (genelde CD200 negatif), kronik lenfositik lösemi/küçük lenfositik lenfomadan (genelde CD200 pozitif) ayırt edilmesinde yararlıdır.

Şekil 12: Bu CD34 (CD34) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD34, erken hematopoietik progenitörlerin belirtecidir. Hematopoietik kök hücrelerde, erken miyeloid progenitörlerde (miyeloblastlar) ve immatür B ile T hücrelerinde (lenfoblastlar) eksprese edilir. Olgun granülositler, monositler ve lenfositler CD34 için negatiftir. CD34 pozitif progenitörler normalde, periferik kandaki beyaz kan hücrelerinin %0,01’inden azını temsil eder.

Şekil 13: Bu CD38 (CD38) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD38 bir aktivasyon belirtecidir. Plazma hücrelerinde en yüksek seviyede, immatür miyeloid ve lenfoid progenitörlerde orta seviyede, monositlerde (yeşil) düşük seviyede ve aktive olgun lenfositlerde değişken seviyede eksprese edilir.

Şekil 14: Bu CD20 (CD20) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD20, olgun B hücrelerinde (turuncu) ve olgun T hücrelerinin bir alt grubunda değişken olarak düşük seviyede eksprese edilir. İleri evre immatür B hücrelerinde değişken seviyede eksprese edilir. CD20 pozitif hücreler genelde, düşük yana yayılımla lenfosit geçidindedir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

10

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

B Hücresi Tüpü

Şekil 15. Bu Lambda (Lambda) vs Kappa (Kappa) nokta grafiğinde, tüm CD19+ hücreler gösterilmektedir. Erken immatür B hücreler (mor), yüzey immünoglobulini hafif zincirleri eksprese etmez, yani kappa veya lambda hafif zinciri için negatiftir. Olgun B hücreler poliklonal olup kappa veya lambda hafif zinciri eksprese eder. Normal kappa-lambda oranı 1,4 olup değer 1 ile 2 arasında değişir. Bağlı plazma immünoglobulini nedeniyle daha yüksek arka plan yaygın görülen bir durumdur.

Şekil 16. Bu CD19 (CD19) vs CD20 (CD20) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. Olgun B hücreler hem CD19 hem de CD20 (turuncu) eksprese eder. Bazı neoplastik B hücreler, düşük CD19 veya CD20 ekspresyonu sergileyebilir.

Şekil 17. Bu CD19 (CD19) vs CD10 (CD10) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. B hücreler CD19 pozitiftir (turuncu). CD10 pozitif olgun B hücreler, lenf düğümlerindeki germinal merkezlere dağılmıştır ve periferik kan ile kemik iliği aspiratlarında ileri evre immatür B hücrelerin küçük bir alt grubu bulunur.

Şekil 18. Bu CD38 (CD38) vs CD10 (CD10) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. CD38, plazma hücrelerinde en yüksek seviyede, immatür B hücrelerinde orta seviyede ve germinal merkez B hücrelerinde düşük seviyede eksprese edilir. Çoğu olgun B hücre (turuncu), düşük seviyede CD38 ekspresyonu sergiler veya hiç sergilemez. T hücreler (kırmızı), aktivasyon durumuna bağlı olarak değişken CD38 ekspresyonu sergiler.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

11

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

B Hücresi Tüpü

Şekil 19. Bu CD20 (CD20) vs CD10 (CD10) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. Çoğu olgun B hücresi, CD10 olmadan üniform yüksek seviyede CD20 eksprese eder.

Şekil 20. Bu CD19 (CD19) vs CD5 (CD5) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. CD5, T hücrelerinde (kırmızı, sol üst) eksprese edilir, normal olgun B hücrelerinin bir alt grubunda (turuncu) düşük seviyede eksprese edilir ve bazı neoplastik B hücresi alt türlerinde eksprese edilir.

Şekil 21. Bu CD20 (CD20) vs CD200 (CD200) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. Çoğu olgun B hücre (turuncu), düşük ila orta seviyede CD200 eksprese eder.

Şekil 22. Bu CD5 (CD5) vs CD200 (CD200) nokta grafiğinde, Lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. Çoğu olgun B hücre normalde CD200 eksprese ederken, bir alt grup değişken olarak CD5 eksprese eder. Kronik lenfositik lösemi/ küçük lenfositik lenfomadaki neoplastik B hücreler tipik olarak CD5 ve CD200 eksprese ederken, mantle hücreli lenfoma tipik olarak CD5 eksprese edip, CD200 eksprese etmez.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

12

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

T Hücresi Tüpü

Şekil 1: Bu Time (Zaman) vs CD45 (CD45) nokta grafiği geçitsizdir ve toplanan tüm olayları sıralı olarak göstermektedir. Bu grafik, örnek alımı esnasındaki sıvı pertürbasyonunu değerlendirmek içindir. Stabil alım, zaman içerisinde olayların üniformpaterniyle görülür. Stabil paternden sapan olaylar, Time (Zaman) geçidinde dışarıda bırakılabilir.

Şekil 2: FS INT (FS İNT) vs FS PEAK (FS PİK) nokta grafiğinde, Time (Zaman) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, tüm hücre çiftleri veya agregatlarının dışarıda bırakılması içindir. Tekil olayları, INT (İNT) vs PEAK (PİK) için doğrusal ilişki gösterir ve Singlets (Tekliler) geçidine eklenir, çiftlilerse doğrusal ilişkinin dışında yer alır.

Şekil 3: Bu Side Scatter (Yana Yayılım) vs Forward Scatter (İleri Yayılım) nokta grafiğinde Singlets (Tekliler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, genelde yüksek yana yayılımla düşük ileri yayılım olan hücre kalıntılarının dışarıda bırakılması içindir. Erken apoptotik hücrelerin orta seviyede yüksek yana yayılımı da vardır, geç apoptotik ve nekrotik hücrelerin ise değişken düşük yana yayılımı vardır. Canlı hücreler, Cells (Hücreler) geçidine dahil edilmektedir.

Şekil 4: Bu CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, Cells (Hücreler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, CD45 pozitif olan çeşitli beyaz kan hücresi türlerini vurgulamak içindir. CD45 negatif popülasyon genelde, kırmızı kan hücrelerini, trombosit agregatlarını veya hematopoietik olmayan hücreleri içerir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

13

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

T Hücresi Tüpü

Şekil 5: Bu CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, CD45+ (CD45+) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu nokta grafiği, periferik kan, kemik iliği ve lenf düğümü örneklerinde tipik olarak bulunan, lenfositler (Ly (Ly) geçidi, kırmızı/açık mavi), monositler (Mo (Mo) geçidi, yeşil) ve granülositler (Gr (Gr) Geçidi, mavi) gibi çeşitli beyaz kan hücresi popülasyonlarının ayırt edilmesini sağlar. CD45dim (CD45 belirsiz) geçidi (mor), tipik olarak miyeloblastlar ve immatür B hücrelerin bulunduğu alanı kapsar. Bu alanda bazofiller, plazmasitoid dendritik hücreler, plazma hücreleri ve NK hücreler de yer alabilir. Her geçidin içerdiği olaylara farklı renkler uygulanarak, analiz boyunca çeşitli popülasyonlar izlenebilir.

Şekil 6: Bu CD3 (CD3) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD3+ (CD3+) geçidi, yüzey CD3 ekspresyonu olan (açık mavi) hücreleri tanımlar. CD3, T hücreler için yüksek düzeyde spesifiktir ve yalnızca, olgun T hücreler ile ileri evre immatür T hücrelerin yüzeyinde eksprese edilir. Bu hücreler tipik olarak, düşük ila orta seviyede yana yayılıma sahiptir.

Şekil 8: Bu CD4 (CD4) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD4, immatür ve olgun T hücrelerin bir alt grubunda yüksek seviyede eksprese edilir (açık mavi). CD4, monositik hücrelerde (yeşil), CD4 pozitif T hücrelerinden daha düşük bir seviyede eksprese edilir.

Şekil 7: Bu TCR γδ (TCR γδ ) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. TCR γδ , T hücre reseptörünün bir alt birimidir ve sitotoksik T hücrelerin küçük bir alt grubunda eksprese edilir. Bu hücreler tipik olarak düşük seviyede yana yayılıma (açık mavi) sahiptir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

14

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

T Hücresi Tüpü

Şekil 9: Bu CD2 (CD2) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD2, hemen hemen tüm immatür ve olgun T hücrelerinde eksprese edilen bir antijendir (açık mavi). CD2 aynı zamanda, NK hücrelerde (kırmızı, sağ alt) ve düşük seviyede monositlerde (yeşil) eksprese edilir.

Şekil 10: Bu CD56 (CD56) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD56 normalde, NK hücrelerin majör bir alt grubunda (kırmızı), doğal katil aktiviteli T hücrelerinde (NK/T hücreler) ve çoğu gama/delta T hücresinde (açık mavi) eksprese edilir. CD56 ayrıca, hem reaktif hem de neoplastik koşullarda monositik hücrelerde de (yeşil) kısmen eksprese edilir.

Şekil 11: Bu CD5 (CD5) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD5, çoğu immatür ve olgun T hücrede (açık mavi) ve düşük seviyede olgun B hücrelerin bir alt grubunda eksprese edilir. Çok erken immatür T hücreleri ve gama/delta T hücrelerinde tipik olarak çok az CD5 ekspresyonu görülür veya hiç görülmez. NK hücrelerin küçük bir alt grubu CD5 eksprese eder.

Şekil 12: Bu CD34 (CD34) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD34, erken hematopoietik progenitörlerin belirtecidir. Hematopoietik kök hücrelerde, erken miyeloid progenitörlerde (miyeloblastlar) ve immatür B ile T hücrelerinde (lenfoblastlar) eksprese edilir. Olgun granülositler, monositler ve lenfositler CD34 için negatiftir. CD34 pozitif progenitörler normalde, periferik kandaki beyaz kan hücrelerinin %0,01’inden azını temsil eder.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

15

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

T Hücresi Tüpü

Şekil 13: Bu CD7 (CD7) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD7, immatür T hücrelerinde, T hücresi gelişiminin en erken evresinde eksprese edilir ve T hücresi olgunlaşırken devam ederek olgun T hücrelerinde değişken şekilde eksprese edilir (açık mavi). Ayrıca, NK hücrelerde (kırmızı, sağ alt) üniform eksprese edilir ve bir plazmasitoid dendritik hücrelerin bir alt grubu ile soya bağlı bir CD34 pozitif progenitör alt grubunda belirsiz biçimde eksprese edilir.

Şekil 14: Bu CD8 (CD8) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD8, immatür ve olgun T hücrelerinin bir alt grubunda eksprese edilir (açık mavi) ve sitotoksik olgun T hücresi popülasyonunu tanımlar. NK hücrelerde ve gama-delta T hücrelerinde düşük seviyede değişken olarak eksprese edilir.

Şekil 15. Bu CD3 (CD3) vs CD56 (CD56) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. Tüm olgun T hücrelerinde mevcut olduğundan ve diğer soylardan hücreler tarafından eksprese edilmediğinden, T hücreleri CD3 ekspresyonuyla tanımlanır. NK hücreler tanımları itibarıyla yüzey CD3’ü eksprese etmez, ancak majör bir alt grupta CD56 eksprese edilir (kırmızı, sol üst). Özellikle doğal katil aktiviteli T hücreleri (NK/T hücreler) ve gama-delta T hücreleri olmak üzere, olgun T hücrelerinin küçük alt grupları da CD56 eksprese eder.

Şekil 16. Bu CD5 (CD5) vs CD3 (CD3) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. CD3 ve CD5, çoğu olgun T hücresinde birlikte eksprese edilir (açık mavi), bununla birlikte, büyük granüler lenfosit morfolojisi olan küçük bir sitotoksik T hücresi alt grubunda genelde CD5 düşük seviyede eksprese edilir veya hiç eksprese edilmez. CD5, çoğu NK hücrede eksprese edilmez.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

16

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

T Hücresi Tüpü

Şekil 17. Bu CD7 (CD7) vs CD2 (CD2) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. CD2 ve CD7, olgun T hücrelerin (açık mavi) ve NK hücrelerin (kırmızı, sağ üst) büyük çoğunluğunda birlikte eksprese edilir.

Şekil 18. Bu CD8 (CD8) vs CD4 (CD4) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. CD3 pozitif T hücreler (açık mavi), CD4 pozitif (yardımcı) ve CD8 pozitif (sitotoksik) alt gruplar içerir. CD4 pozitif T hücreler genelde CD8 pozitif T hücreleri sayıca geçer; periferik kanda CD4:CD8 oranı 1:1 ila 4:1’dir. Zaman zaman CD4 ve CD8 çift negatif ya da çift pozitif T hücreleri de görülür. Çift negatif T hücreleri tipik olarak çoğunlukla gama/delta T hücrelerinden oluşur. CD4 pozitif, ancak CD3 negatif hücrelerin (kırmızı, sol orta) lenfosit geçidindeki monositler olduğu belirtilmelidir. CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) geçitlemesinin, saf lenfosit tanımlamasına tek başına olanak tanımadığını gösterir.

Şekil 19. Bu CD3 (CD3) vs CD4 (CD4) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. Tüm CD4 pozitif T hücreler CD3 eksprese eder. Monositler ve plazmasitoid dendritik hücreler, CD4’ü, CD4 pozitif T hücrelerinden daha düşük bir seviyede eksprese eder ve CD3 eksprese etmez. NK hücrelerde CD3 ve CD4 ekspresyonu olmaz.

Şekil 20. Bu CD3 (CD3) vs CD8 (CD8) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. Tüm CD8 pozitif T hücreler CD3 eksprese eder (açık mavi). NK hücrelerin küçük bir alt grubu, CD3 olmadan, CD8 de (kırmızı, sol üst) eksprese eder.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

17

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

T Hücresi Tüpü

Şekil 21. Bu CD3 (CD3) vs TCR γδ (TCR γδ ) nokta grafiğinde, lenfosit geçidindeki (Ly) tüm hücreler gösterilmektedir. T hücrelerin küçük bir alt grubunda, CD3 ile birlikte eksprese edilen TCR gama/delta ekspresyonu da vardır. CD3 ve TCR arasındaki yüksek düzeyde doğrusal ilişkinin nedeni, sabit 1:1 orana sahip heterodimerik kompleks olarak mevcut olmalarıdır, yani biri yüksek seviyede eksprese edildiğinde, diğeri de yüksek seviyede eksprese edilir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

18

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M1 Hücresi Tüpü

Şekil 1: Bu Time (Zaman) vs CD45 (CD45) nokta grafiği geçitsizdir ve toplanan tüm olayları sıralı olarak göstermektedir. Bu grafik, örnek alımı esnasındaki sıvı pertürbasyonunu değerlendirmek içindir. Stabil alım, zaman içerisinde olayların üniformpaterniyle görülür. Stabil paternden sapan olaylar, Time (Zaman) geçidinde dışarıda bırakılabilir.

Şekil 2: FS INT (FS İNT) vs FS PEAK (FS PİK) nokta grafiğinde, Time (Zaman) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, tüm hücre çiftleri veya agregatlarının dışarıda bırakılması içindir. Tekil olayları, INT (İNT) vs PEAK (PİK) için doğrusal ilişki gösterir ve Singlets (Tekliler) geçidine eklenir, çiftlilerse doğrusal ilişkinin dışında yer alır.

Şekil 3: Bu Side Scatter (Yana Yayılım) vs Forward Scatter (İleri Yayılım) nokta grafiğinde Singlets (Tekliler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, genelde yüksek yana yayılımla düşük ileri yayılım olan hücre kalıntılarının dışarıda bırakılması içindir. Erken apoptotik hücrelerin orta seviyede yüksek yana yayılımı da vardır, geç apoptotik ve nekrotik hücrelerin ise değişken düşük yana yayılımı vardır. Canlı hücreler, Cells (Hücreler) geçidine dahil edilmektedir.

Şekil 4: Bu CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, Cells (Hücreler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, CD45 pozitif olarak geçitlenmiş olan çeşitli beyaz kan hücresi alt gruplarını vurgulamak içindir. CD45 negatif popülasyon genelde kırmızı kan hücrelerini, trombosit agregatlarını, doku kalıntılarını veya hematopoietik olmayan hücreleri içerir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

19

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M1 Hücresi Tüpü

Şekil 5: Bu CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, CD45+ (CD45+) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu nokta grafiği, periferik kan, kemik iliği ve lenf düğümü örneklerinde tipik olarak bulunan, lenfositler (Ly (Ly) geçidi, kırmızı), monositler (Mo (Mo) geçidi, yeşil) ve granülositler (Gr (Gr) Geçidi, mavi) gibi çeşitli beyaz kan hücresi popülasyonlarının ayırt edilmesini sağlar. CD45dim (CD45 belirsiz) geçidi (mor), tipik olarak miyeloblastlar ve immatür B hücrelerin bulunduğu alanı kapsar. Bu alanda bazofiller, plazmasitoid dendritik hücreler, plazma hücreleri ve NK hücreler de yer alabilir. Her geçidin içerdiği olaylara farklı renkler uygulanarak, analiz boyunca çeşitli popülasyonlar izlenebilir.

Şekil 6: Bu CD16 (CD16) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD16, olgun granülositlerde en yüksek seviyede eksprese edilir (mavi). Çoğu NK hücre (kırmızı, sağ alt) ve benzer şekilde aktive monositlerin bir alt grubu da (yeşil) CD16 eksprese eder.

Şekil 7: Bu CD7 (CD7) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD7, immatür T hücrelerinde, T hücre gelişiminin en erken evresinde eksprese edilir ve T hücresi olgunlaşırken devam ederek olgun T hücrelerinde değişken şekilde eksprese edilir (kırmızı, sağ alt). Ayrıca, NK hücrelerde eksprese edilir ve plazmasitoid dendritik hücrelerin bir alt grubu ile soya bağlı progenitör alt grubunda belirsiz biçimde eksprese edilir.

Şekil 8: Bu CD10 (CD10) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD10, immatür B hücrelerinde, olgun germinal merkez B hücrelerinde ve olgun granülositlerde (mavi) eksprese edilir. Düşük yana yayılımı olan lenfoid hücrelerin aksine granülositlerin yüksek yana yayılımı vardır.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

20

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M1 Hücresi Tüpü

Şekil 9: Bu CD13 (CD13) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD13, olgunlaşmakta olan granülositlerde (mavi), olgun monositlerde (yeşil) ve miyeloid progenitörlerde (mor) eksprese edilir.

Şekil 10: Bu CD64 (CD64) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD64, olgun monositlerde (yeşil) en yüksek seviyede eksprese edilir. CD64, hareketsiz olgun granülositlerde iyi eksprese edilmez (mavi), ancak granülosit aktivasyonuyla birlikte ekspresyon artar. CD64, lenfositlerde (kırmızı) veya çoğu CD34 pozitif progenitörde eksprese edilmez. Aktive olgun monositler CD64’ü daha düşük seviyede eksprese eder ve daha düşük yana yayılıma sahiptir.

Şekil 11: Bu CD34 (CD34) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD34, erken hematopoietik progenitörlerin belirtecidir. Hematopoietik kök hücrelerde, erken miyeloid progenitörlerde (miyeloblastlar) ve immatür B ile T hücrelerinde (lenfoblastlar) eksprese edilir. Olgun granülositler, monositler ve lenfositler CD34 için negatiftir. CD34 pozitif progenitörler normalde, periferik kandaki beyaz kan hücrelerinin %0,01’inden azını temsil eder.

Şekil 12: Bu CD14 (CD14) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD14, olgun monositlerde yüksek seviyede (yeşil) ve olgun granülositlerde düşük seviyede (mavi) eksprese edilir. Aktive olgunmonositler CD14’ü daha düşük seviyede eksprese eder ve daha düşük yana yayılıma sahiptir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

21

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M1 Hücresi Tüpü

Şekil 13: Bu HLA-DR (HLA-DR) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. HLA-DR, monositler (yeşil) ve plazmasitoid dendritik hücreler gibi antijen veren hücrelerde eksprese edilir. CD34 pozitif progenitörlerde, immatür ve olgun B hücrelerinde ve aktive T hücrelerinde de eksprese edilir.

Şekil 14: Bu CD11b (CD11b) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD11b, granülositler (mavi) ve monositlerde (yeşil) eksprese edilir. CD11b, NK hücrelerde ve bazofillerde de eksprese edilir.

Şekil 15. Bu CD11b (CD11b) vs CD16 (CD16) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD11b, monositlerde (yeşil), immatür ve olgun granülositlerde (mavi) ve NK hücrelerde (kırmızı) eksprese edilir. CD16, immatür ve olgun granülositlerde (mavi) ve NK hücrelerin bir alt grubunda (kırmızı, sağ üst) eksprese edilir. Aktive olgun monositler CD16’yı değişken seviyede eksprese eder ve CD11b pozitiftir.

Şekil 16. Bu CD16 (CD16) vs CD13 (CD13) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD13, granülositlerde (mavi), monositlerde (yeşil), bazofillerde ve CD34 pozitif progenitörlerde eksprese edilir. CD16, olgunlaşmakta olan granülositlerde (mavi) ve NK hücrelerin bir alt grubunda (kırmızı, sağ alt) eksprese edilir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

22

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M1 Hücresi Tüpü

Şekil 17. Bu CD13 (CD13) vs CD34 (CD34) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD13, granülositlerde (mavi), monositlerde (yeşil), bazofillerde ve CD34 pozitif progenitörlerde eksprese edilir. CD34, erken hematopoietik progenitörlerde eksprese edilir. Olgun granülositler, monositler ve lenfositler CD34 için negatiftir.

Şekil 18. Bu CD14 (CD14) vs CD64 (CD64) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD64, monositlerde yüksek seviyede (yeşil) ve granülositlerde düşük seviyede (mavi) eksprese edilir. CD14, monositlerde yüksek seviyede ve granülositlerde düşük seviyede (mavi) eksprese edilir. Aktive olgun monositler CD14 ve CD64’ü değişken şekilde düşük seviyede eksprese eder.

Şekil 19. Bu CD14 (CD14) vs CD16 (CD16) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD14, monositlerde yüksek seviyede (yeşil) ve granülositlerde düşük seviyede (mavi, sol üst) eksprese edilir. CD16, granülositlerde ve NK hücrelerin bir alt grubunda (kırmızı, sol orta) eksprese edilir. Aktive olgun monositler CD14 ve CD16’yı değişken şekilde düşük seviyede eksprese eder.

Şekil 20. Bu HLA-DR (HLA-DR) vs CD10 (CD10) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. HLA-DR, monositlerde (Yeşil), B hücrelerinde, plazmasitoid dendritik hücrelerde ve CD34 pozitif progenitörlerde eksprese edilir. CD10, olgun granülositlerde eksprese edilir (mavi).

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

23

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M1 Hücresi Tüpü

Şekil 21. Bu CD7 (CD7) vs CD13 (CD13) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD7, T hücrelerinde ve NK hücrelerde eksprese edilir (kırmızı, sağ alt). CD13, granülositlerde (mavi), monositlerde (yeşil), bazofillerde ve CD34 pozitif progenitörlerde eksprese edilir. CD13 ve CD7’nin birlikte eksprese edilmesi genelde görülmez.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

24

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M2 Hücresi Tüpü

Şekil 1: Bu Time (Zaman) vs CD45 (CD45) nokta grafiği geçitsizdir ve toplanan tüm olayları sıralı olarak göstermektedir. Bu grafik, örnek alımı esnasındaki sıvı pertürbasyonunu değerlendirmek içindir. Stabil alım, zaman içerisinde olayların üniformpaterniyle görülür. Stabil paternden sapan olaylar, Time (Zaman) geçidinde dışarıda bırakılabilir.

Şekil 2: FS INT (FS İNT) vs FS PEAK (FS PİK) nokta grafiğinde, Time (Zaman) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, tüm hücre çiftleri veya agregatlarının dışarıda bırakılması içindir. Tekil olayları, INT (İNT) vs PEAK (PİK) için doğrusal ilişki gösterir ve Singlets (Tekliler) geçidine eklenir, çiftlilerse doğrusal ilişkinin dışında yer alır.

Şekil 3: Bu Side Scatter (Yana Yayılım) vs Forward Scatter (İleri Yayılım) nokta grafiğinde Singlets (Tekliler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, genelde düşük ileri yayılımı olan hücre kalıntılarının dışarıda bırakılması içindir. Erken apoptotik hücrelerin orta seviyede yüksek yana yayılımı da vardır, geç apoptotik ve nekrotik hücrelerin ise değişken düşük yana yayılımı vardır. Canlı hücreler, Cells (Hücreler) geçidine dahil edilmektedir.

Şekil 4: Bu CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, Cells (Hücreler) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu grafik, CD45 pozitif olarak geçitlenmiş olan çeşitli beyaz kan hücresi alt gruplarını vurgulamak içindir. CD45 negatif popülasyon genelde kırmızı kan hücrelerini, trombosit agregatlarını, doku kalıntılarını veya hematopoietik olmayan hücreleri içerir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

25

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M2 Hücresi Tüpü

Şekil 5: Bu CD45 (CD45) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, CD45+ (CD45+) geçidindeki olaylar gösterilmektedir. Bu nokta grafiği, periferik kan, kemik iliği ve lenf düğümü örneklerinde tipik olarak bulunan, lenfositler (Ly (Ly) geçidi, kırmızı), monositler (Mo (Mo) geçidi, yeşil) ve granülositler (Gr (Gr) Geçidi, mavi) gibi çeşitli beyaz kan hücresi popülasyonlarının ayırt edilmesini sağlar. CD45dim (CD45 belirsiz) geçidi (mor), tipik olarak miyeloblastlar ve immatür B hücrelerin bulunduğu alanı kapsar. Bu alanda bazofiller, plazmasitoid dendritik hücreler, plazma hücreleri ve NK hücreler de yer alabilir. Her geçidin içerdiği olaylara farklı renkler uygulanarak, analiz boyunca çeşitli popülasyonlar izlenebilir.

Şekil 6: Bu CD15 (CD15) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD15, granülositlerde eksprese edilir (mavi) ve monositlerde düşük seviyede (yeşil) eksprese edilir.

Şekil 7: Bu CD123 (CD123) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD123, bazofiller ile plazmasitoid dendritik hücrelerde yüksek seviyede ve CD34 pozitif miyeloid progenitörler ile monositlerde düşük seviyede (yeşil) eksprese edilir.

Şekil 8: Bu CD117 (CD117) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD117, CD34 pozitif miyeloid progenitörlerde, erken promiyelositler ve erken eritroid prekursörlerde değişken şekilde eksprese edilir ve mast hücrelerinde yüksek seviyede eksprese edilir. CD117, reaktif NK hücreler ve neoplastik plazma hücrelerinin alt gruplarında da eksprese edilir. Olgun granülositler, monositler ve lenfositler CD117 için negatiftir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

26

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

M2 Hücresi Tüpü

Şekil 9: Bu CD13 (CD13) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD13, granülositlerde (mavi) ve olgun monositlerde (yeşil) eksprese edilir ve miyeloid progenitörlerinde değişken şekilde eksprese edilir.

Şekil 10: Bu CD33 (CD33) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD33, monositlerde yüksek seviyede (yeşil) ve granülositlerde düşük seviyede (mavi) eksprese edilir. CD33 ayrıca, bazofillerde, NK hücrelerin bir alt grubunda (kırmızı) ve CD34 pozitif miyeloid progenitörlerin bir alt grubunda da eksprese edilir.

Şekil 11: Bu CD34 (CD34) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD34, erken hematopoietik progenitörlerin belirtecidir. Tipik olarak, miyeloid blastlarda, immatür B ve T hücrelerinde (lenfoblastlar) eksprese edilir. Olgun granülositler, monositler ve lenfositler CD34 için negatiftir. CD34 pozitif progenitörler normalde, periferik kandaki beyaz kan hücrelerinin %0,01’inden azını temsil eder.

Şekil 12: Bu CD38 (CD38) vs Side Scatter (Yana Yayılım) nokta grafiğinde, tüm canlı hücreler gösterilmektedir. CD38 bir aktivasyon belirtecidir. Plazma hücrelerinde en yüksek seviyede, immatür miyeloid ve lenfoid progenitörlerde orta seviyede, monositlerde (yeşil) düşük seviyede ve aktive olgun lenfositlerde değişken şekilde düşük seviyede (kırmızı) eksprese edilir.

İçindekiler > İmmünofenotipik Anormallik Yok > Vaka 1: Normal Tam Kan

Her Olay Önemlidir

27

Beckman Coulter • ClearLLab 10C Panelleri • C33363 AB

Made with FlippingBook Learn more on our blog