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用于白血病/淋巴瘤* 分析的 CE 抗体组合 C LEAR LL AB 10C 方案 组 病例手册

分析无小事 仅适用于非霍奇金淋巴瘤

1 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

目录

滤泡性淋巴瘤. ............................................................. 226 10 号病例滤泡性淋巴瘤........................................ 226 生发中心源性 B 细胞淋巴瘤. ....................................... 250 11 号病例生发中心源性 B 细胞淋巴瘤.................. 250 成熟 B 细胞淋巴瘤....................................................... 274 12 号病例成熟 B 细胞淋巴瘤................................ 274 成熟 B 细胞淋巴瘤....................................................... 298 13 号病例成熟 B 细胞淋巴瘤................................ 298 T 细胞源性肿瘤生成过程.................................................322 T 细胞成淋巴细胞性白血病/成淋巴细胞性淋巴瘤........ 322 14 号病例T 细胞成淋巴细胞性白血病/. T 细胞成淋巴细胞性淋巴瘤.................................. 322 T 细胞成淋巴细胞性白血病/成淋巴细胞性淋巴瘤........ 346 15 号病例T 细胞成淋巴细胞性白血病/. T 细胞成淋巴细胞性淋巴瘤.................................. 346 T 大颗粒淋巴瘤. .......................................................... 370 16 号病例:T 细胞淋巴组织增生性疾病................. 370 T 大颗粒淋巴瘤. .......................................................... 394 17 号病例:T 细胞淋巴组织增生性疾病................. 394 骨髓源性肿瘤生成过程....................................................418 急性髓性白血病........................................................... 418 18 号病例:急性髓性白血病.................................. 418 急性髓性白血病........................................................... 442 19 号病例:急性单核细胞白血病........................... 442 急性髓性白血病........................................................... 466 20 号病例:急性髓性白血病-NOS. ........................ 466 急性髓性白血病........................................................... 490 21 号病例:急性早幼粒细胞白血病. ...................... 490 急性髓性白血病........................................................... 514 22 号病例:急性单核细胞白血病........................... 514 骨髓增生异常综合征.................................................... 538 23 号病例:骨髓增生异常综合征........................... 538 骨髓增生异常综合征.................................................... 562 24 号病例:骨髓增生异常综合征........................... 562

引言. .................................................................................3 背景. .................................................................................3 免疫表型分型的共识建议....................................................4 ClearLLab 10C 方案组预期用途..........................................4 ClearLLab 10C 方案组. ......................................................4 ClearLLab 补偿套件...........................................................5 病例选择和分析..................................................................5 相关文档............................................................................6 参考文献............................................................................6 病例. .................................................................................7 未见免疫表型异常. .............................................................7 外周全血.......................................................................... 7 1 号病例:正常全血................................................... 7 骨髓............................................................................... 32 2 号病例:正常骨髓................................................. 32 淋巴结........................................................................... 56 3 号病例:正常淋巴结. ............................................ 56 B 细胞源性肿瘤生成过程...................................................80 B 成淋巴细胞性白血病/成淋巴细胞性淋巴瘤................. 80 4 号病例B 细胞急性成淋巴细胞性白血病/. 成淋巴细胞性淋巴瘤. ............................................. 80 B 成淋巴细胞性白血病/成淋巴细胞性淋巴瘤............... 105 5 号病例B 细胞急性成淋巴细胞性白血病/. 成淋巴细胞性淋巴瘤. ........................................... 105 慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤. .................... 130 6 号病例慢性淋巴细胞白血病/. 小淋巴细胞淋巴瘤................................................ 130 慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤. .................... 154 7 号病例慢性淋巴细胞白血病/. 小淋巴细胞淋巴瘤................................................ 154 被套细胞淋巴瘤........................................................... 178 8 号病例被套细胞淋巴瘤...................................... 178 浆细胞骨髓瘤. ............................................................. 202 9 号病例浆细胞骨髓瘤.......................................... 202

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2 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

引言 本病例手册用于协助对贝克曼库尔特Navios 和Navios EX 流式细胞仪上使用贝克曼库尔特 ClearLLab 10C 方案组 CE-IVD 标记的 白血病和淋巴瘤试剂生成的流式细胞分析免疫表型数据进行分析。 病例手册包含具有不同淋巴肿瘤和髓系肿瘤的典型特征的样本病例,以及临床和/或实验室检查结果显示潜在肿瘤生成过程但未见 免疫表型异常的病例。所用的标本类型包括外周全血、骨髓和淋巴结。 每个病例都包含描述患者的人口统计学资料和临床病史的临床简介,包含病例特定 Listmode(列表模式)数据文件以供该病例手册 的用户重新执行分析,包含 ClearLLab 10C 特定分析方案以供与 Listmode(列表模式)数据配合使用,还包含一份所提供方案的分 析报告。每份报告均包含分析注解,用于指明免疫表型分析结果和潜在问题。 注释:病例手册示例仅供参考,其既未呈现所有类型的血液淋巴肿瘤,也未介绍或展示所有可能的免疫表型变体。 背景 流式细胞分析免疫表型分型适用于评估样本中的每个细胞是否存在特异性抗原。在整合后,这些结果可为与样本类型中的预期群体 一致(即正常)或不一致(即异常)的每个细胞生成免疫表型谱。在评估疑似血液淋巴组织恶性肿瘤患者的样本时,需要执行几个步骤 1 : • 评估样本中的所有细胞群。 • 将每个细胞群分为“正常”或“异常”。 • 根据是否存在抗原以及荧光标记的抗体染色强度的增强或减弱,对异常细胞群进行详细的特性鉴定。 • 分析异常免疫表型,并结合可用的其他信息(如临床病史、组织学、细胞学、免疫组织化学)以及基因分型检测(如原位杂交、核型 分析和分子诊断)。

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3 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

免疫表型分型的共识建议 在过去的二十年中,行业在对已知或疑似血液淋巴组织恶性肿瘤患者的样本进行流式细胞分析免疫表型分型方面已形成若干共识建 议,并且已在科学文献中发表一些指南。 自 2008 年以来,流式细胞分析免疫表型分型已被纳入WHO 对造血和淋巴组织肿瘤的分类 2 。 2006 年贝塞斯达国际共识会议建议 3,4,5 和 ICSH/ICCS 基于细胞的荧光分析实践指南 6,7,8 提出了医学适应症和流式细胞分析验证,包 括检测的分析前、分析和后分析细节。 ClearLLab 10C 方案组预期用途 ClearLLab 10C 方案组是一种体外诊断技术,适用于在 Navios 和 Navios EX 流式细胞仪上通过多参数免疫表型对细胞群进行定性 鉴定。这些试剂用于辅助鉴别诊断患有或可能患有以下造血系统肿瘤的血液学异常患者:慢性白血病、急性白血病、非霍奇金氏淋巴 瘤、骨髓瘤、骨髓增生异常综合征 (MDS) 和/或骨髓增殖性肿瘤 (MPN)。这些试剂可与外周全血(采集于含 K 2 EDTA、酸性枸橼酸盐葡 萄糖 [ACD] 或肝素的试管中)、骨髓(采集于含 K 2 EDTA、ACD 或肝素的试管中)以及淋巴结标本配合使用。结果判读应由病理学家或

相关专业人士结合其他临床或实验室发现进行确证。 这些试剂可针对下列表面抗原提供多参数的定性结果: ClearLLab 10C 方案组 蓝色激光器

红色激光器

紫色激光器

部件号 (PN) 试管

FITC

PE

ECD PC5.5 PC7

APC APC- A700 APC- A750 PB KRO

κ

λ

B96805 B 细胞试管 B96806 T 细胞试管 B96807 M1 细胞试管 B96808 M2 细胞试管

CD10

CD5

CD200 CD34

CD38

CD20

CD19

CD45 CD45

CD4 CD7

CD2

CD56 CD13

CD5

CD34 CD34 CD34

CD7

CD8

CD3

TCR γδ

CD16 CD15

CD10

CD64 CD33

CD14 CD38

HLA-DR CD11b CD45

CD123 CD117 CD13

HLA-DR CD19

CD45

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4 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

ClearLLab 补偿套件 蓝色激光器

红色激光器

紫色激光器

部件号 (PN) B74074

APC- A700

APC- A750

FITC

PE

ECD PC5.5

PC7 CD4

APC CD4

PB

KRO

CD4 CD8 上述试剂以标准化形式提供,适用于与样本制备和细胞分析仪设置试剂以及数据采集和分析软件配合使用。ClearLLab 10C 方案组 符合 Bethesda 指南所述的标准化建议 2 。 有关 ClearLLab 10C 方案组的更多信息,请访问 beckman.com/ClearLLab 。 病例选择和分析 本病例手册中的数据是根据 beckman.com 上提供的 ClearLLab 10C Panel Instructions For Use(ClearLLab 10C 方案组使用说 明,IFU)中详述的程序而生成。 代表性病例选自临床试验数据,并由以下人员进行了审查、注释和解释: Brent Wood 医学和哲学双博士. 检验医学与病理学教授. 血液病理科主任. 血液病理学实验室和 SCCA 病理学主任. SCCA 实验室医疗主任. CD4 CD3 CD4 CD4 CD4 CD4

美国华盛顿州西雅图华盛顿大学 Xueyan Chen,医学和哲学双博士. 检验医学助理教授. 血液病理学实验室副主任. 华盛顿州西雅图华盛顿大学 Yi Zhou,医学和哲学双博士. 助理教授. 检验医学系. 华盛顿州西雅图华盛顿大学

分析方案: 下载 ClearLLab 10C 分析方案。 分析: 下载病例特定 Kaluza C 分析文件。

分析无小事

5 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

参考文献 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms.F.E.Craig, K.A. Foon.Blood.2008; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues.IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms.Swerdlow SH, et al.Blood.2016;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia.Arber DA, et al.Blood 2016 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia.Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom.2007;72 Suppl 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications.Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom.2007;72 Suppl 1:S5-13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia.Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom.2007;72 Suppl 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues. Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom.2013 Sep-Oct;84(5):291-308. doi: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations.Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; ICSH/ICCS Working Group.Cytometry B Clin Cytom.2013 Sep-Oct;84(5):309-14. doi: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria.Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; ICSH/ICCS Working Group.Cytometry B Clin Cytom.2013 Sep-Oct;84(5):315-23. doi: 10.1002/cyto.b.2110 • Navios Flow Cytometer Instructions For Use(Navios 流式细胞仪使用说明),PN 774537AG • Navios EX Flow Cytometer Instructions For Use(Navios EX 流式细胞仪使用说明),PN B73085 • ClearLLab 10C Panels Instructions For Use(ClearLLab 10C 方案组使用说明),PN C00197 • ClearLLab Compensation Beads Instructions For Use(ClearLLab 补偿微球使用说明),PN C00201 • ClearLLab Compensation Kit Instructions For Use(ClearLLab 补偿套件使用说明),PN B74074 • ClearLLab Control Cells Instructions For use(ClearLLab 质控品细胞使用说明),PN B99884 • ClearLLab Control Cells QC Analysis Protocols Download Addendum(ClearLLab 质控品细胞 QC 分析方案下载附加文件) ,PN C33279AA 相关文档 • ClearLLab 10C Application System Guide(ClearLLab 10C 应用系统指南),PN C28537AA • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use(Kaluza C 流式细胞仪软件使用说明),PN C11002

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6 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

病例 病例使用以下颜色优先顺 序门控:

淋巴细胞 . (门控 Ly)/NK 细胞:红色 CD19+ B 细胞:橙色 CD3+ T 细胞:浅绿色

单核细胞 . (门控Mo):绿色 粒细胞 . (门控 Gr):蓝色

CD45dim(CD45 阴暗): 紫色 其他异常细胞群:青色 CD45 阴性细胞群:灰色

未见免疫表型异常 流式细胞术是对白细胞群进行特性鉴定的一种手段,可用于辅助鉴别诊断患有或可能患有以下造血系统肿瘤的血液学异常患者:慢性白血病、 急性白血病、非霍奇金氏淋巴瘤、骨髓瘤、骨髓增生异常综合征 (MDS) 和/或骨髓增殖性肿瘤 (MPN)。在这些临床疾病中识别异常细胞群的关 键是熟悉全血、骨髓和淋巴结组织样本中存在的正常细胞群。以下是用 ClearLLab 10C 方案组染色的正常样本示例。 外周全血 1 号病例:正常全血 临床简介 这名 65 岁的男性患有血小板减少症。提交了一份外周全血样本,以便使用 ClearLLab 10C 方案组进行流式细胞分析免疫表型分型。 流式细胞分析免疫表型分型 B 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 7 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光的细胞碎片。早 期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有可变的较弱侧向角散 射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。此 图用于突出显示被门控为 CD45 阳性的不同白细胞亚群。CD45 阴性细胞群通常包含红细 胞、血小板细胞团、组织碎片或非造血细胞。

图5:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了CD45+门控中的颗粒。此散点 图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控Ly,红色/ 橙色)、单核细胞(门控Mo,绿色)和粒细胞(门控Gr,蓝色)。CD45dim(CD45阴暗)门控(紫 色)覆盖的区域通常分布着早期祖细胞,即原粒细胞和未成熟B细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞 样树突状细胞、浆细胞和NK细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同 颜色,可以在整个分析期间识别不同群体。

图6:此CD19vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。CD19+ 门控可识别 CD19 阳性细胞。CD19 表达于成熟和未成熟 B 细胞以及大多数浆细胞上。这些 细胞通常有低至中等的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 8 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图 7:此 Kappa (κ) vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。表面 κ 轻链 表达于成熟 B 细胞(橙色)和后期未成熟 B 细胞上。κ 阳性 B 细胞的比例通常大于 κ 阴性(λ 阳性)B 细胞。Fc 受体会介导免疫球蛋白结合,因此可以在单核细胞(绿色)上观察到显著的 κ 阳性。κ 轻链阳性细胞显示于图右侧。

图8:此Lambda (λ) vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。表面λ轻链 表达于成熟 B 细胞(橙色)和后期未成熟 B 细胞上。λ 阳性 B 细胞的比例通常小于 λ 阴性(κ 阳性)B 细胞。Fc 受体会介导免疫球蛋白结合,因此可以在单核细胞(绿色)上观察到显著的 λ 阳性。λ 轻链阳性细胞显示于图右侧。

图9:此CD10 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD10表达于未成 熟B细胞、成熟生发中心B细胞和成熟粒细胞(蓝色)上。粒细胞有较高的侧向角散射光,相 比之下,淋巴样细胞有较低的侧向角散射光。

图 10:此 CD5 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD5 表达于未成 熟和成熟 T 细胞(红色,右下角)上,并较弱地表达于部分成熟 B 细胞(橙色)上。这些淋巴样 细胞通常有较低的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 9 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图11:此CD200vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD200通常表达 于B细胞上,但在某些肿瘤B细胞上呈阴性。它专用于区分被套细胞淋巴瘤(通常为CD200 阴性)和慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤(通常为 CD200 阳性)。

图 12:此 CD34 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34 是一种早 期造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T 细胞(淋巴母细胞)上。成熟粒细胞、单核细胞和淋巴细胞为CD34阴性。通常,CD34阳性祖细 胞在外周血白细胞中占比不到 0.01%。

图 13:此 CD38 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD38 是一种 活化标志物。它在浆细胞上有最高表达水平;在未成熟髓系和淋巴样祖细胞上有中等表达 水平;在单核细胞(绿色)上有较低表达水平;在活化的成熟淋巴细胞上有可变的表达水平。

图 14:此 CD20 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD20 表达于成 熟B细胞(橙色)上,而部分成熟T细胞有可变的较低CD20表达水平。它可变地表达于后期 未成熟 B 细胞上。CD20 阳性细胞通常位于淋巴细胞门控内,并具有较低的侧向角散射光。

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B 细胞试管

图 16.此 CD19 vs CD20 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。成熟 B 细胞表达 CD19 和 CD20(橙色)。某些肿瘤 B 细胞可能表现出较低的 CD19 或 CD20 表达。

图 15.此 Lambda (λ) vs Kappa (κ) 散点图显示了所有 CD19+ 细胞。早期未成熟 B 细胞(紫 色)不表达表面免疫球蛋白轻链,即 κ 或 λ 轻链阴性。成熟 B 细胞为表达 κ 或 λ 轻链的多克 隆细胞。正常 κ/λ 比为 1.4,范围介于 1 至 2。粘附性血浆免疫球蛋白通常会导致背景增加。

图 18.此 CD38 vs CD10 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。浆细胞有最高的 CD38 表达水平;未成熟 B 细胞有中等的 CD38 表达水平;生发中心 B 细胞有较低的 CD38 表达水平。大多数成熟 B 细胞(橙色)表现出较低乃至无 CD38 表达。视乎活化状态,T 细胞( 红色)可表现出可变的 CD38 表达。

图 17.此 CD19 vs CD10 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。B 细胞为 CD19 阳 性(橙色)。CD10阳性成熟B细胞分布于淋巴结的生发中心内,一小部分后期未成熟B细胞 存在于外周血和骨髓吸取物内。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 11 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图19.此CD20 vs CD10散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟B细胞 具有一致的较高 CD20 表达水平而不表达 CD10。

图 20.此 CD19 vs CD5 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。CD5 表达于 T 细 胞(红色,左上角)和某些肿瘤 B 细胞亚型上,而部分正常成熟 B 细胞(橙色)有可变的较低 CD5 表达水平。

图 21.此 CD20 vs CD200 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟 B 细 胞(橙色)有低至中等的 CD200 表达水平。

图 22.此 CD5 vs CD200 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟 B 细 胞通常表达 CD200,部分细胞可变地表达 CD5。慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤 中的肿瘤 B 细胞通常表达 CD5 和 CD200,而被套细胞淋巴瘤通常表达 CD5,但无 CD200。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 12 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

T 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光和较强侧向角散 射光的细胞碎片。早期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有 可变的较弱侧向角散射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此 CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了 Cells(细胞)门控中的颗粒。 此图用于突出显示不同类型的 CD45 阳性白细胞。CD45 阴性细胞群通常包含红细胞、血小 板细胞团或非造血细胞。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 13 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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T 细胞试管

图5:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了CD45+门控中的颗粒。此散点 图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控Ly,红色/ 浅绿色)、单核细胞(门控Mo,绿色)和粒细胞(门控Gr,蓝色)。CD45dim(CD45阴暗)门控( 紫色)覆盖的区域通常分布着原粒细胞和未成熟 B 细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细 胞、浆细胞和 NK 细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同颜色,可以 在整个分析期间追踪不同群体。

图 6:此 CD3 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD3+ 门控可识别 带有表面 CD3 表达的细胞(浅绿色)。CD3 具有高度的 T 细胞特异性,并仅表达于成熟 T 细 胞和后期未成熟 T 细胞的表面上。这些细胞通常有低至中等的侧向角散射光。

图 8:此 CD4 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。部分未成熟和成 熟 T 细胞具有较高的 CD4 表达水平(浅绿色)。CD4 也表达于单核细胞(绿色)上,其表达水 平低于 CD4 阳性 T 细胞。

图 7:此 TCR γδ vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。TCR γδ 是 T 细 胞受体的亚单位,并表达于一小部分细胞毒性 T 细胞上。这些细胞通常有较低的侧向角散 射光(浅绿色)。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 14 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

T 细胞试管

图 10:此 CD56 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD56 通常表达 于 NK 细胞(红色)的主要亚群、具有自然杀伤细胞活性的 T 细胞(NK/T 细胞)和许多伽马/ 德耳塔T细胞(浅绿色)上。在反应性和肿瘤情况下,CD56还部分表达于单核细胞(绿色)上。

图9:此CD2 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD2是表达于几乎 所有未成熟和成熟 T 细胞(浅绿色)上的抗原。CD2 也表达于 NK 细胞(红色,右下角)上,且 单核细胞(绿色)有较低的 CD2 表达水平。

图 12:此 CD34 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34 是一种早 期造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T 细胞(淋巴母细胞)上。成熟粒细胞、单核细胞和淋巴细胞为CD34阴性。通常,CD34阳性祖细 胞在外周血白细胞中占比不到 0.01%。

图11:此CD5 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD5表达于大多数 未成熟和成熟T细胞(浅绿色)上,而部分成熟B细胞有较低的CD5表达水平。极早期未成熟 T 细胞和伽马/德耳塔 T 细胞通常有极少乃至没有 CD5 表达。一小部分 NK 细胞表达 CD5。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 15 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

T 细胞试管

图 13:此 CD7 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD7 表达于处于 最早T细胞发育阶段的未成熟T细胞上,并在整个T细胞成熟过程中持续存在,以便可变地 表达于成熟 T 细胞(浅绿色)上。它还一致地表达于 NK 细胞(红色,右下角)上,并较弱地表 达于部分浆细胞样树突状细胞和部分谱系定向 CD34 阳性祖细胞上。

图 14:此 CD8 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD8 表达于部分 未成熟和成熟T细胞(浅绿色)上,并可界定细胞毒性成熟T细胞群。它在NK细胞和伽马-德 耳塔 T 细胞上有可变的较低表达水平。

图15.此CD3 vs CD56散点图显示了淋巴细胞门控(Ly)内的所有细胞。T细胞可通过CD3表 达界定,因为它存在于所有成熟T细胞上,并且其他谱系细胞不表达CD3。根据定义,NK细胞 不表达表面CD3,但主要亚群(红色,左上角)表达CD56。一小部分成熟T细胞也表达CD56 ,尤其是具有自然杀伤细胞活性(NK/T 细胞)的 T 细胞和伽马-德耳塔 T 细胞。

图 16.此 CD5 vs CD3 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。CD3 和 CD5 共同表 达于大多数成熟 T 细胞(浅绿色)上,但小部分拥有大颗粒淋巴细胞形态的细胞毒性 T 细胞 通常显示较低乃至无 CD5 表达。大多数 NK 细胞不表达 CD5。

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分析无小事

T 细胞试管

图 18.此 CD8 vs CD4 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。CD3 阳性 T 细胞(浅 绿色)包含 CD4 阳性(辅助性)和 CD8 阳性(细胞毒性)亚群。CD4 阳性 T 细胞通常多于 CD8 阳性 T 细胞,且在外周血中,CD4:CD8 比率为 1:1 至 4:1。偶尔还存在 CD4 和 CD8 双阴性或 双阳性 T 细胞。通常,双阴性 T 细胞主要包括伽马/德耳塔 T 细胞。需要注意的是,CD4 为阳 性但CD3 为阴性的细胞(红色,中部左侧)是淋巴细胞门控所包含的单核细胞。此情况表明, 单独的 CD45 vs Side scatter(侧向角散射光)门控无法鉴别纯淋巴细胞。

图 17.此 CD7 vs CD2 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。CD2 和 CD7 共同表 达于绝大多数成熟 T 细胞(浅绿色)和 NK 细胞(红色,右上角)上。

图 19.此 CD3 vs CD4 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。所有 CD4 阳性 T 细 胞表达CD3。单核细胞和浆细胞样树突状细胞的CD4 表达水平低于CD4 阳性T细胞,并且 它们缺少 CD3 表达。NK 细胞缺少 CD3 和 CD4 的表达。

图20.此CD3 vs CD8散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。所有CD8阳性T细胞 表达 CD3(浅绿色)。一小部分 NK 细胞也表达 CD8(红色,左上角),但无 CD3。

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分析无小事

T 细胞试管

图 21.此 CD3 vs TCR γδ 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。一小部分 T 细胞 表达 TCR 伽马/德耳塔(与 CD3 共同表达)。由于 CD3 和 TCR 表现为拥有 1:1 固定比率的 二聚体复合物,因此两者之间存在高度线性关系,以至于一种物质表达的增加可表明另一 种物质表达的增加。

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分析无小事

M1 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光和较强侧向角散 射光的细胞碎片。早期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有 可变的较弱侧向角散射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。此 图用于突出显示被门控为 CD45 阳性的不同白细胞亚群。CD45 阴性细胞群通常包含红细 胞、血小板细胞团、组织碎片或非造血细胞。

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分析无小事

M1 细胞试管

图 5:此 CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了 CD45+ 门控中的颗粒。此散 点图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控 Ly, 红色)、单核细胞(门控 Mo,绿色)和粒细胞(门控 Gr,蓝色)。CD45dim(CD45 阴暗)门控( 紫色)覆盖的区域通常分布着原粒细胞和未成熟 B 细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细 胞、浆细胞和 NK 细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同颜色,可以 在整个分析期间追踪不同群体。

图 6:此 CD16 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。成熟粒细胞(蓝 色)的 CD16 表达水平最高。大多数 NK 细胞表达 CD16(红色,右下角),而部分活化的单核 细胞(绿色)也是如此。

图8:此CD10 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD10表达于未成 熟 B 细胞、成熟生发中心 B 细胞和成熟粒细胞(蓝色)上。粒细胞有较高的侧向角散射光,相 比之下,淋巴样细胞有较低的侧向角散射光。

图7:此CD7 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD7表达于处于最 早T细胞发育阶段的未成熟T细胞上,并在整个T细胞成熟过程中持续存在,以便可变地表 达于成熟 T 细胞(红色,右下角)上。它还表达于 NK 细胞上,并较弱地表达于部分浆细胞样 树突状细胞和部分谱系定向祖细胞上。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 20 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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M1 细胞试管

图9:此CD13 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD13表达于正在 成熟的粒细胞(蓝色)、成熟单核细胞(绿色)和髓系祖细胞(紫色)上。

图 10:此 CD64 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。成熟单核细胞( 绿色)的CD64表达水平最高。休眠的成熟粒细胞(蓝色)未良好表达CD64,但在粒细胞活化 后,表达有所增加。淋巴细胞(红色)或大多数CD34阳性祖细胞不表达CD64。活化的成熟单 核细胞表达 CD64 的水平较低并具有较低的侧向角散射光。

图 11:此 CD34 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34 是一种早 期造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T 细胞(淋巴母细胞)上。成熟粒细胞、单核细胞和淋巴细胞为 CD34 阴性。通常,CD34 阳性祖 细胞在外周血白细胞中占比不到 0.01%。

图 12:此 CD14 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。成熟单核细胞( 绿色)的CD14表达水平较高,而成熟粒细胞(蓝色)的CD14表达水平较低。活化的成熟单核 细胞表达 CD14 的水平较低并具有较低的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 21 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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M1 细胞试管

图13:此HLA-DR vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。HLA-DR表达 于抗原呈递细胞上,包括单核细胞(绿色)和浆细胞样树突状细胞。它还表达于CD34阳性祖 细胞、未成熟和成熟 B 细胞及活化的 T 细胞上。

图 14:此 CD11b vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD11b 表达于 粒细胞(蓝色)和单核细胞(绿色)上。CD11b 还表达于 NK 细胞和嗜碱性粒细胞上。

图15.此CD11b vs CD16散点图显示了所有活细胞。CD11b表达于单核细胞(绿色)、未成熟 和成熟粒细胞(蓝色)和NK细胞(红色)上。CD16表达于未成熟和成熟粒细胞(蓝色)和部分 NK细胞(红色,右上角)上。活化的成熟单核细胞表达CD16的水平不定,并且为CD11b阳性。

图 16.此 CD16 vs CD13 散点图显示了所有活细胞。CD13 表达于粒细胞(蓝色)、单核细胞( 绿色)、嗜碱性粒细胞和 CD34 阳性祖细胞上。CD16 表达于正在成熟的粒细胞(蓝色)和部 分 NK 细胞(红色,右下角)上。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 22 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M1 细胞试管

图 17.此 CD13 vs CD34 散点图显示了所有活细胞。CD13 表达于粒细胞(蓝色)、单核细胞( 绿色)、嗜碱性粒细胞和CD34阳性祖细胞上。CD34表达于早期造血祖细胞上。成熟粒细胞、 单核细胞和淋巴细胞为 CD34 阴性。

图18.此CD14vsCD64散点图显示了所有活细胞。单核细胞(绿色)有较高的CD64表达水平, 而粒细胞(蓝色)有较低的CD64表达水平。单核细胞有较高的CD14表达水平,而粒细胞(蓝 色)有较低的CD14表达水平。活化的成熟单核细胞表达CD14和CD64的水平不定且较低。

图 19.此 CD14 vs CD16 散点图显示了所有活细胞。单核细胞(绿色)有较高的 CD14 表达水 平,而粒细胞(蓝色,左上角)有较低的 CD14 表达水平。CD16 表达于粒细胞(蓝色)和部分 NK 细胞(红色,中左侧)上。活化的成熟单核细胞表达 CD14 和 CD16 的水平不定且较低。

图 20.此 HLA-DR vs CD10 散点图显示了所有活细胞。HLA-DR 表达于单核细胞(绿色)、B 细胞、浆细胞样树突状细胞和 CD34 阳性祖细胞上。CD10 表达于成熟粒细胞(蓝色)上。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 23 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M1 细胞试管

图 21.此 CD7 vs CD13 散点图显示了所有活细胞。CD7 表达于 T 细胞和 NK 细胞(红色,右 下角)上。CD13 表达于粒细胞(蓝色)、单核细胞(绿色)、嗜碱性粒细胞和 CD34 阳性祖细胞 上。通常,CD13 不与 CD7 共同表达。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 24 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光的细胞碎片。早 期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有可变的较弱侧向角散 射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。此 图用于突出显示被门控为 CD45 阳性的不同白细胞亚群。CD45 阴性细胞群通常包含红细 胞、血小板细胞团、组织碎片或非造血细胞。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 25 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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M2 细胞试管

图6:此CD15 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD15表达于粒细 胞(蓝色)上,而单核细胞(绿色)表达 CD15 的水平较低。

图 5:此 CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了 CD45+ 门控中的颗粒。此散 点图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控 Ly, 红色)、单核细胞(门控 Mo,绿色)和粒细胞(门控 Gr,蓝色)。CD45dim(CD45 阴暗)门控( 紫色)覆盖的区域通常分布着原粒细胞和未成熟 B 细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细 胞、浆细胞和 NK 细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同颜色,可以 在整个分析期间追踪不同群体。

图 8:此 CD117 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34 阳性髓 系祖细胞、早期早幼粒细胞和早期红细胞前体有可变的 CD117 表达,而肥大细胞有较高的 CD117 表达水平。CD117 还表达于部分反应性 NK 细胞和肿瘤浆细胞上。成熟粒细胞、单核 细胞和淋巴细胞为 CD117 阴性。

图 7:此 CD123 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。嗜碱性粒细胞 和浆细胞样树突状细胞有较高的 CD123 表达水平,而 CD34 阳性髓系祖细胞和单核细胞( 绿色)有较低的 CD123 表达水平。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 26 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图9:此CD13 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD13表达于粒细 胞(蓝色)和成熟单核细胞(绿色)上,在骨髓祖细胞上的表达水平不定。

图10:此CD33 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。单核细胞(绿色) 有较高的 CD33 表达水平,而粒细胞(蓝色)有较低的 CD33 表达水平。CD33 还表达于嗜碱 性粒细胞、部分 NK 细胞(红色)和部分 CD34 阳性髓系祖细胞上。

图 11:此 CD34 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34 是一种 早期造血祖细胞的标志物。它通常表达于骨髓原始细胞、未成熟 B 和 T 细胞(淋巴母细胞) 上。成熟粒细胞、单核细胞和淋巴细胞为 CD34 阴性。通常,CD34 阳性祖细胞在外周血白细 胞中占比不到 0.01%。

图12:此CD38 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD38是一种活化 标志物。它在浆细胞上有最高表达水平;在未成熟髓系和淋巴样祖细胞上有中等表达水平;在 单核细胞(绿色)上有较低表达水平;在活化的成熟淋巴细胞(红色)上有可变的较低表达水平。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 27 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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M2 细胞试管

图13:此HLA-DR vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。HLA-DR表达 于抗原呈递细胞上,包括单核细胞(绿色)和浆细胞样树突状细胞。它还表达于CD34阳性祖 细胞、成熟 B 细胞(红色,右下角)及活化的 T 细胞上。

图14:此CD19vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD19表达于未成熟 和成熟B细胞(红色,右下角)以及大多数浆细胞上。这些细胞通常有低至中等的侧向角散射光。

图15.此CD34 vs CD117散点图显示了所有活细胞。CD34表达于骨髓原始细胞和早期未成 熟B细胞前体上。CD117表达于骨髓原始细胞、早幼粒细胞和早期红细胞前体上,但在早期 B细胞前体上呈阴性。成熟粒细胞、单核细胞和淋巴细胞为CD34和CD117阴性。通常,CD34 和 CD117 阳性祖细胞在外周血白细胞中占比不到 0.01%。

图16.此CD33vsCD13散点图显示了所有活细胞。CD33和CD13表达于单核细胞(绿色)、粒 细胞(蓝色)、嗜碱性粒细胞和CD34 阳性祖细胞上。淋巴细胞(红色)不表达CD13 或CD33。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 28 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图 17.此 CD38 vs CD34 散点图显示了所有活细胞。CD38 是一种活化标志物。CD38 一致地 表达于有可变 CD34 的谱系定向早期祖细胞上。成熟粒细胞、单核细胞和淋巴细胞为 CD34 阴性,表达 CD38 的水平不定。通常,CD34 阳性祖细胞在外周血白细胞中占比不到 0.01%。

图 18.此HLA-DR vs CD34 图显示了所有活细胞。HLA-DR 表达于 B 细胞、单核细胞(绿色)、 浆细胞样树突状细胞和CD34阳性祖细胞上。CD34表达于早期祖细胞上。成熟粒细胞、单核 细胞和淋巴细胞为CD34阴性。通常,CD34阳性祖细胞在外周血白细胞中占比不到0.01%。

图19.此CD19 vs CD123散点图显示了所有活细胞。CD19表达于B细胞上。CD123表达于 嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细胞、单核细胞(绿色)和 CD34 阳性祖细胞上。CD19 阳性 B 细胞(红色,右侧)通常无明显的 CD123 表达。自发荧光(主要来自嗜酸性粒细胞)导致正 在成熟的粒细胞(蓝色)存在显著的 CD19 阳性。

图 20.此 CD19 vs CD34 散点图显示了所有活细胞。CD19 表达于 B 细胞上。CD34 表达于早 期祖细胞上。成熟粒细胞、单核细胞和淋巴细胞为 CD34 阴性。通常,CD34 阳性祖细胞在外 周血白细胞中占比不到 0.01%。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 29 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图 21.此 CD38 vs CD19 散点图显示了所有活细胞。CD38 一致地表达于浆细胞和谱系定向 早期祖细胞上。成熟CD19阳性B细胞(红色,上方)表达CD38的水平中等。自发荧光(主要 来自嗜酸性粒细胞)导致正在成熟的粒细胞(蓝色)存在显著的 CD19 阳性。

图22.此HLA-DR vs CD15散点图显示了所有活细胞。CD15表达于粒细胞(蓝色)和单核细胞 (绿色)上。HLA-DR 表达于 B 细胞、单核细胞(绿色)、浆细胞样树突状细胞和 CD34 阳性祖 细胞上。成熟粒细胞不表达 HLA-DR(蓝色)。

图 23.此 HLA-DR vs CD123 散点图显示了所有活细胞。HLA-DR 表达于 B 细胞、单核细胞 (绿色)、浆细胞样树突状细胞和 CD34 阳性祖细胞上。成熟粒细胞不表达 HLA-DR(蓝色) 。CD123表达于嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细胞、单核细胞(绿色)和CD34阳性祖细胞上。

图 24.此 CD19 vs CD33 散点图显示了所有活细胞。CD19 表达于 B 细胞(红色,右下角) 上。CD33 表达于单核细胞(绿色)和粒细胞(蓝色)上。CD19 阳性 B 细胞通常不表达 CD33。 自发荧光(主要来自嗜酸性粒细胞)导致正在成熟的粒细胞(蓝色)存在显著的 CD19 阳性。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 30 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

流式细胞分析免疫表型分型的结果 在此案例中,流式细胞分析免疫表型分型检查未发现免疫表型异常的群体。形态检测未发现白细胞异常。请注意,建议结合临床、形态 学和实验室数据考虑,不可单单依据此测定来判断恶性进展。

目录 > 未见免疫表型异常 > 1 号病例:正常全血 31 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

骨髓 2 号病例:正常骨髓 临床简介 这名 37 岁的男性患有贫血症。提交了一份骨髓样本,以便使用 ClearLLab 10C 方案组进行流式细胞分析免疫表型分型。 流式细胞分析免疫表型分型

B 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 32 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

B 细胞试管

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光的细胞碎片。早 期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有可变的较弱侧向角散 射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。此 图用于突出显示被门控为 CD45 阳性的不同白细胞亚群。CD45 阴性细胞群通常包含红细 胞、血小板细胞团、组织碎片或非造血细胞。

图 5:此 CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了 CD45+ 门控中的颗粒。此散 点图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控 Ly, 红色)、单核细胞(门控Mo,绿色)和粒细胞(门控Gr,蓝色)。CD45dim(CD45阴暗)门控(紫 色)覆盖的区域通常分布着早期祖细胞,即原粒细胞和未成熟B细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞 样树突状细胞、浆细胞和NK细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同 颜色,可以在整个分析期间识别不同群体。

图6:此CD19vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。CD19+ 门控可识别CD19阳性细胞。CD19表达于成熟(橙色)和未成熟B细胞(紫色)以及大多数浆 细胞上。这些细胞通常有低至中等的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 33 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图 7:此 Kappa (κ) vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。表面 κ 轻链 表达于成熟 B 细胞(橙色)和后期未成熟 B 细胞上。κ 阳性 B 细胞的比例通常大于 κ 阴性(λ 阳性)B 细胞。Fc 受体会介导免疫球蛋白结合,因此可以在单核细胞(绿色)上观察到显著的 κ 阳性。κ 轻链阳性细胞显示于图右侧。

图8:此Lambda (λ) vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。表面λ轻链 表达于成熟 B 细胞(橙色)和后期未成熟 B 细胞上。λ 阳性 B 细胞的比例通常小于 λ 阴性(κ 阳性)B 细胞。Fc 受体会介导免疫球蛋白结合,因此可以在单核细胞(绿色)上观察到显著的 λ 阳性。λ 轻链阳性细胞显示于图右侧。

图 9:此 CD10 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD10 表达于未 成熟 B 细胞(紫色)、成熟生发中心 B 细胞和成熟粒细胞(蓝色)上。粒细胞有较高的侧向角 散射光,相比之下,淋巴样细胞有较低的侧向角散射光。

图 10:此 CD5 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD5 表达于成熟 和未成熟 T 细胞上,并较弱地表达于部分成熟 B 细胞(橙色)上。这些淋巴样细胞通常有较 低的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 34 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图11:此CD200vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD200通常表达 于B细胞上,但在某些肿瘤B细胞上呈阴性。它专用于区分被套细胞淋巴瘤(通常为CD200 阴性)和慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤(通常为 CD200 阳性)。

图12:此CD34 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34是一种早期 造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T细 胞(淋巴母细胞)上。在 CD45dim(CD45 阴暗)门控(紫色)中,CD34 阳性祖细胞通常有低至 中等的侧向角散射光,且未成熟B细胞的祖细胞有低于未成熟髓系祖细胞的侧向角散射光。

图 13:此 CD38 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD38 是一种活 化标志物。它在浆细胞上有最高表达水平;在未成熟髓系和淋巴样祖细胞(紫色)上有中等表 达水平;在单核细胞(绿色)上有较低表达水平;在活化的成熟淋巴细胞(红色)上有可变的较 低表达水平。CD34 阳性造血干细胞可变地表达较低乃至零水平的 CD38。

图 14:此 CD20 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD20 表达于成 熟B细胞(橙色)上,而部分成熟T细胞有可变的较低CD20表达水平。它可变地表达于后期 未成熟 B 细胞上。CD20 阳性细胞通常位于淋巴细胞门控内,并具有较低的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 35 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图 16.此 CD19 vs CD20 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。成熟 B 细胞表达 CD19和CD20(橙色)。未成熟B细胞表达CD19并有可变的较低CD20表达水平。某些肿瘤 B 细胞可能表现出较低的 CD19 或 CD20 表达。

图 15.此 Lambda (λ) vs Kappa (κ) 散点图显示了所有 CD19+ 细胞。早期未成熟 B 细胞(紫 色)不表达表面免疫球蛋白轻链,即 κ 或 λ 轻链阴性。成熟 B 细胞为表达 κ 或 λ 轻链的多克 隆细胞。正常 κ/λ 比为 1.4,范围介于 1 至 2。粘附性血浆免疫球蛋白通常会导致背景增加。

图 18.此 CD38 vs CD10 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。浆细胞有最高的 CD38 表达水平;未成熟 B 细胞有中等的 CD38 表达水平;生发中心 B 细胞有较低的 CD38 表达水平。大多数成熟 B 细胞有较低乃至无 CD38 表达水平。视乎活化状态,T 细胞(红色) 可表现出可变的 CD38 表达。在淋巴细胞门控中,少数 CD10 阳性和 CD38 中等表达细胞代 表了后期未成熟 B 细胞,不过,大多数未成熟 B 细胞位于 CD45dim(CD45 阴暗)门控中。

图 17.此 CD19 vs CD10 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。B 细胞为 CD19 阳性(橙色)。CD10 阳性成熟 B 细胞分布于淋巴结的生发中心内,一小部分后期未成熟 B 细胞存在于外周血和骨髓吸取物内。未成熟 B 细胞通常为 CD10 阳性,但它们大多出现于 CD45dim(CD45 阴暗)门控中。

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分析无小事

B 细胞试管

图 19.此 CD20 vs CD10 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟 B 细 胞具有一致的较高 CD20 表达水平。具有可变的较低 CD20 水平的极少数 CD10 阳性 B 细 胞代表后期未成熟 B 细胞。

图 20.此 CD19 vs CD5 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。部分正常成熟 B 细 胞有可变的较低 CD5 表达水平,且 CD5 还表达于某些肿瘤 B 细胞亚型上。

图 21.此 CD20 vs CD200 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟 B 细 胞有低至中等的 CD200 表达水平(橙色)。

图 22.此 CD5 vs CD200 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟 B 细 胞通常表达 CD200,部分细胞可变地表达 CD5。慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤 中的肿瘤 B 细胞通常表达 CD5 和 CD200,而被套细胞淋巴瘤通常表达 CD5,但无 CD200。

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分析无小事

T 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光的细胞碎片。早 期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有可变的较弱侧向角散 射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。此 图用于突出显示被门控为CD45阳性的不同白细胞亚群。CD45阴性细胞群(灰色)通常包含 红细胞、血小板细胞团、组织碎片或非造血细胞。

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T 细胞试管

图5:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了CD45+门控中的颗粒。此散点 图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控Ly,红色/ 浅绿色)、单核细胞(门控Mo,绿色)和粒细胞(门控Gr,蓝色)。CD45dim(CD45阴暗)门控( 紫色)覆盖的区域通常分布着原粒细胞和未成熟 B 细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细 胞、浆细胞和 NK 细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同颜色,可以 在整个分析期间识别不同群体。

图 6:此 CD3 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD3+ 门控可识别 带有表面 CD3 表达的细胞(浅绿色)。CD3 具有高度的 T 细胞特异性,并仅表达于成熟 T 细 胞和后期未成熟 T 细胞的表面上。这些细胞通常有低至中等的侧向角散射光。

图8:此CD4 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。部分未成熟和成熟T 细胞具有较高的CD4表达水平(浅绿色)。CD4也表达于单核细胞(绿色)上,其表达水平低于 CD4+ T 细胞。在骨髓中,多个谱系的未成熟祖细胞也有较低水平的该种表达。

图 7:此 TCR γδ

vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。TCR γδ

是 T 细

胞受体的亚型,并表达于一小部分细胞毒性 T 细胞(浅绿色)上。

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T 细胞试管

图 10:此 CD56 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD56 通常表达 于 NK 细胞(红色)的主要亚群、具有自然杀伤细胞活性的 T 细胞(NK/T 细胞)和许多伽马/ 德耳塔T细胞(浅绿色)上。在反应性和肿瘤情况下,CD56还部分表达于单核细胞(绿色)上。

图9:此CD2 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD2是表达于几乎 所有未成熟和成熟 T 细胞(浅绿色)上的抗原。CD2 也表达于 NK 细胞(红色,右下角)上,且 单核细胞(绿色)有较低的 CD2 表达水平。

图12:此CD34 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34是一种早期 造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T细 胞(淋巴母细胞)上。在 CD45dim(CD45 阴暗)门控(紫色)中,CD34 阳性祖细胞通常有低至 中等的侧向角散射光,且未成熟B细胞的祖细胞有低于未成熟髓系祖细胞的侧向角散射光。

图11:此CD5 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD5表达于大多数 未成熟和成熟T细胞(浅绿色)上,而部分成熟B细胞有较低的CD5表达水平。极早期未成熟 T 细胞和伽马/德耳塔 T 细胞通常有极少乃至没有 CD5 表达。一小部分 NK 细胞表达 CD5。

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T 细胞试管

图 13:此 CD7 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD7 表达于处于 最早T细胞发育阶段的未成熟T细胞上,并在整个T细胞成熟过程中持续存在,以便可变地 表达于成熟T细胞(浅绿色)上。它还一致地表达于NK细胞(红色)上,并较弱地表达于部分 浆细胞样树突状细胞和部分谱系定向 CD34 阳性祖细胞上。

图 14:此 CD8 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD8 表达于部分 未成熟和成熟T细胞(浅绿色)上,并可界定细胞毒性成熟T细胞群。它在NK细胞和伽马-德 耳塔 T 细胞上有可变的较低表达水平。

图15.此CD3 vs CD56散点图显示了淋巴细胞门控(Ly)内的所有细胞。T细胞可通过CD3表 达界定,因为它存在于所有成熟T细胞上,并且其他谱系细胞不表达CD3。根据定义,NK细胞 不表达表面CD3,但主要亚群(红色,左上角)表达CD56。一小部分成熟T细胞也表达CD56 ,尤其是具有自然杀伤细胞活性(NK/T 细胞)的 T 细胞和伽马-德耳塔 T 细胞。

图 16.此 CD5 vs CD3 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。CD3 和 CD5 共同表 达于大多数成熟 T 细胞(浅绿色)上,但小部分拥有大颗粒淋巴细胞形态的细胞毒性 T 细胞 通常显示较低乃至无 CD5 表达。大多数 NK 细胞不表达 CD5。

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T 细胞试管

图 18.此 CD8 vs CD4 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。CD3 阳性 T 细胞(浅 绿色)包含 CD4 阳性(辅助性)和 CD8 阳性(细胞毒性)亚群。CD4 阳性 T 细胞通常多于 CD8 阳性 T 细胞,且在外周血中,CD4:CD8 比率为 1:1 至 4:1。偶尔还存在 CD4 和 CD8 双阴性或 双阳性 T 细胞。通常,双阴性 T 细胞主要包括伽马/德耳塔 T 细胞。需要注意的是,CD4 为阳 性但CD3 为阴性的细胞(红色,中部左侧)是淋巴细胞门控所包含的单核细胞。此情况表明, 单独的 CD45 vs Side scatter(侧向角散射光)门控无法鉴别纯淋巴细胞。

图 17.此 CD7 vs CD2 散点图显示了淋巴细胞门控内的所有细胞。CD2 和 CD7 共同表达于 绝大多数成熟 T 细胞(浅绿色)和 NK 细胞(红色,右上角)上。

图 19.此 CD3 vs CD4 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。所有 CD4 阳性 T 细 胞表达CD3。单核细胞和浆细胞样树突状细胞的CD4 表达水平低于CD4 阳性T细胞,并且 它们缺少 CD3 表达。NK 细胞缺少 CD3 和 CD4 的表达。

图20.此CD3 vs CD8散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。所有CD8阳性T细胞 表达 CD3(浅绿色)。一小部分 NK 细胞也表达 CD8(红色,左上角),但无 CD3。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 42 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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T 细胞试管

图 21.此 CD3 vs TCR γδ 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。一小部分 T 细胞 表达 TCR 伽马/德耳塔(与 CD3 共同表达)。由于 CD3 和 TCR 表现为拥有 1:1 固定比率的 二聚体复合物,因此两者之间存在高度线性关系,以至于一种物质表达的增加可表明另一 种物质表达的增加。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 43 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M1 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光的细胞碎片。早 期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有可变的较弱侧向角散 射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。此 图用于突出显示被门控为CD45阳性的不同白细胞亚群。CD45阴性细胞群(灰色)通常包含 红细胞、血小板细胞团、组织碎片或非造血细胞。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 44 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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M1 细胞试管

图 5:此 CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了 CD45+ 门控中的颗粒。此散 点图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控 Ly, 红色)、单核细胞(门控Mo,绿色)和粒细胞(门控Gr,蓝色)。CD45dim(CD45阴暗)门控(紫 色)覆盖的区域通常分布着早期祖细胞,即原粒细胞和未成熟B细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞 样树突状细胞、浆细胞和NK细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同 颜色,可以在整个分析期间识别不同群体。

图 6:此 CD16 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。成熟粒细胞有最 高的 CD16 表达水平,而晚幼粒细胞和杆状核细胞(蓝色)有可变的较低 CD16 表达水平。大 多数 NK 细胞表达 CD16(红色),而部分活化的单核细胞(绿色)也是如此。

图8:此CD10 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD10表达于未成 熟B细胞(紫色)、成熟生发中心B细胞和成熟粒细胞(蓝色)上。粒细胞有较高的侧向角散射 光,相比之下,淋巴样细胞有较低的侧向角散射光。

图7:此CD7 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD7表达于处于最 早T细胞发育阶段的未成熟T细胞上,并在整个T细胞成熟过程中持续存在,以便可变地表 达于成熟T细胞(红色)上。它还一致地表达于NK细胞(红色)上,并较弱地表达于部分浆细 胞样树突状细胞和部分谱系定向祖细胞(紫色)上。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 45 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M1 细胞试管

图 9:此 CD13 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD13 表达于正 在成熟的粒细胞上,且视乎成熟状态(蓝色),强度可能有所不同。它在早幼粒细胞上有可变 的较高表达水平;在中幼粒细胞上有较低表达水平,且随着中幼粒细胞成长为粒细胞,该表 达水平会不断增加。成熟单核细胞(绿色)有较高的 CD13 表达水平;未成熟单核细胞有较 低的 CD13 表达水平;髓系祖细胞(紫色)有可变的 CD13 表达。

图10:此CD64 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。成熟和未成熟单 核细胞(绿色)有最高的CD64表达水平,而早幼粒细胞和中幼粒细胞(蓝色)有略低的CD64 表达水平。休眠的成熟粒细胞(蓝色)未良好表达CD64,但在粒细胞活化后,表达有所增加。淋 巴样细胞或大多数 CD34+ 祖细胞不表达 CD64。

图 12:此 CD14 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。成熟单核细胞( 绿色)有较高的 CD14 表达水平,而未成熟单核细胞有可变的较低 CD14 表达水平。成熟粒 细胞也有较低的 CD14 表达水平。

图11:此CD34vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34是一种早期 造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T细 胞(淋巴母细胞)上。在CD45dim(CD45阴暗)门控(紫色)中,CD34阳性祖细胞通常有低至 中等的侧向角散射光,且未成熟B细胞的祖细胞有低于未成熟髓系祖细胞的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 46 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M1 细胞试管

图 14:此 CD11b vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD11b 表达于 正在成熟的粒细胞(从早幼粒细胞后期阶段开始)(蓝色)和单核细胞(绿色)上。CD11b 还表 达于 NK 细胞(红色)和嗜碱性粒细胞(紫色)上。

图13:此HLA-DR vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。HLA-DR表达 于抗原呈递细胞上,包括单核细胞(绿色)和浆细胞样树突状细胞。它还表达于CD34+祖细胞 (紫色)、成熟(红色,右下角)和未成熟(紫色)B 细胞及活化的 T 细胞(红色)上。

图16.此CD16 vs CD13散点图显示了所有活细胞。CD13表达于正在成熟的粒细胞(蓝色)、 单核细胞(绿色)、嗜碱性粒细胞和CD34+祖细胞(紫色)上。CD16表达于正在成熟的粒细胞 (蓝色)和部分 NK 细胞(红色)上。在粒细胞成熟期间,无 CD16 的早幼粒细胞(蓝色,左侧) 有CD13的可变表达;当早幼粒细胞成长为中幼粒细胞(蓝色,左下角)时,细胞会失去CD13 表达。随后,当中幼粒细胞从拥有少量 CD16 的晚幼粒细胞成长为拥有较高 CD13 和 CD16 表达的成熟粒细胞(蓝色,右上角)时,它们会同时获得 CD13 和 CD16。

图 15.此 CD11b vs CD16 散点图显示了所有活细胞。CD11b 表达于单核细胞(绿色)、正在 成熟的粒细胞(蓝色)、NK 细胞(红色)和嗜碱性粒细胞(紫色)上。CD16 表达于正在成熟的 粒细胞(蓝色)和部分NK细胞(红色)上。在粒细胞成熟期间,大多数早幼粒细胞缺少CD11b 和 CD16(蓝色,左下角);当早幼粒细胞成长为中幼粒细胞(蓝色,右下角)时,细胞会获得 CD11b。随后,晚幼粒细胞会获得少量 CD16,且随着细胞不断成熟,CD16 表达水平会逐步 增加,并在细胞成长为成熟粒细胞时达到最高值。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 47 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M1 细胞试管

图 18.此 CD14 vs CD64 散点图显示了所有活细胞。单核细胞(绿色)有较高的 CD64 表达水 平,而正在成熟的粒细胞(蓝色)有较低的 CD64 表达水平。成熟单核细胞有较高的 CD14 表 达水平,而成熟粒细胞(蓝色)有较低的CD14表达水平。未成熟单核细胞表现出较高的CD64 表达,但无CD14(蓝色,左上角);在成长为成熟单核细胞期间,细胞会在保持高水平CD64的 同时逐步获得CD14(绿色)。未成熟粒细胞有CD64中等表达,但无CD14(蓝色,左侧);当细 胞转变为成熟粒细胞(蓝色,底部)时,细胞会获得 CD14 并失去 CD64。

图 17.此 CD13 vs CD34 散点图显示了所有活细胞。CD13 表达于正在成熟的粒细胞(蓝色) 、单核细胞(绿色)、嗜碱性粒细胞和 CD34 阳性祖细胞(紫色)上。CD34 表达于早期造血祖 细胞上。CD34 阳性 B 细胞的祖细胞(紫色)或成熟淋巴样细胞(红色)未良好表达 CD13。

图 19.此 HLA-DR vs CD10 散点图显示了所有活细胞。HLA-DR 表达于单核细胞、B 细胞、浆 细胞样树突状细胞和 CD34+ 祖细胞(紫色)上。CD10 表达于成熟粒细胞(蓝色)和未成熟 B 细胞(紫色)上。未成熟 B 细胞表达 CD10 和 HLA-DR(紫色)。

图 20.此 CD7 vs CD13 散点图显示了所有活细胞。CD7 表达于 T 细胞和 NK 细胞(红色) 上。CD13 表达于正在成熟的粒细胞(蓝色)、单核细胞(绿色)、嗜碱性粒细胞和 CD34 阳性 祖细胞(紫色)上。通常,CD13 不与 CD7 共同表达。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 48 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光的细胞碎片。早 期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有可变的较弱侧向角散 射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。此 图用于突出显示被门控为 CD45 阳性的不同白细胞亚群。CD45 阴性细胞群通常包含红细 胞、血小板细胞团、组织碎片或非造血细胞。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 49 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图 5:此 CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了 CD45+ 门控中的颗粒。此散 点图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控 Ly, 红色)、单核细胞(门控 Mo,绿色)和粒细胞(门控 Gr,蓝色)。CD45dim(CD45 阴暗)门控( 紫色)覆盖的区域通常分布着原粒细胞和未成熟 B 细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细 胞、浆细胞和 NK 细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同颜色,可以 在整个分析期间识别不同群体。

图 6:此 CD15 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。从早期定向到髓 单核细胞成熟期间,CD15 表达于未成熟和成熟粒细胞(蓝色)上。单核细胞(绿色)也有较低 的 CD15 表达水平。

图8:此CD117 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34+髓系祖细 胞、早期早幼粒细胞和早期红细胞前体有可变的CD117表达,而肥大细胞(蓝色,右侧)有较 高的 CD117 表达水平。CD117 还表达于部分反应性 NK 细胞和肿瘤浆细胞上。

图7:此CD123 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。嗜碱性粒细胞和 浆细胞样树突状细胞(紫色)有较高的CD123表达水平,而CD34阳性髓系祖细胞(紫色)和 单核细胞(绿色)有较低的 CD123 表达水平。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 50 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图10:此CD33 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。未成熟和成熟单 核细胞(绿色)有较高的 CD33 表达水平;未成熟粒细胞(蓝色)有略低的 CD33 表达水平;成 熟粒细胞(蓝色)有最低的 CD33 表达水平。CD33 还表达于嗜碱性粒细胞、部分NK 细胞(红 色)和部分 CD34+ 髓系祖细胞(紫色)上。

图 9:此 CD13 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD13 表达于正 在成熟的粒细胞上,且视乎成熟状态(蓝色),强度可能有所不同。它在早幼粒细胞上有可变 的较高表达水平;在中幼粒细胞上有较低表达水平,且随着中幼粒细胞成长为粒细胞,该表 达水平会不断增加。成熟单核细胞(绿色)有较高的 CD13 表达水平;未成熟单核细胞有较 低的 CD13 表达水平;髓系祖细胞(紫色)有可变的 CD13 表达。

图 12:此 CD38 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD38 是一种活 化标志物。它在浆细胞上有最高表达水平;在未成熟髓系和淋巴样祖细胞(紫色)上有中等表 达水平;在单核细胞(绿色)上有较低表达水平;在活化的成熟淋巴细胞(红色)上有可变的较 低表达水平。CD34 阳性造血干细胞可变地表达较低乃至零水平的 CD38。

图11:此CD34vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34是一种早期 造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T细 胞(淋巴母细胞)上。在CD45dim(CD45阴暗)门控(紫色)中,CD34阳性祖细胞通常有低至 中等的侧向角散射光,且未成熟B细胞的祖细胞有低于未成熟髓系祖细胞的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 51 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图 14:此 CD19 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了 Cells(细胞)门控中的颗 粒。CD19+ 门控可识别 CD19 阳性细胞。CD19 表达于成熟和未成熟 B 细胞以及大多数浆细 胞上。这些细胞通常有低至中等的侧向角散射光。

图13:此HLA-DR vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。HLA-DR表达 于抗原呈递细胞上,包括单核细胞(绿色)和浆细胞样树突状细胞。它还表达于CD34阳性祖 细胞(紫色)、成熟(红色)和未成熟(紫色)B 细胞及活化的 T 细胞(红色)上。

图 16.此 CD38 vs CD34 散点图显示了所有活细胞。CD38 一致地表达于有可变 CD34 的谱 系定向早期祖细胞(紫色)上。造血干细胞具有最高的 CD34 水平及可变的较低 CD38 水平( 紫色,在此样本中并不多)。浆细胞(紫色,最右侧)的显著可变CD34表达是由超出可见刻度 的极高水平 CD38 导致的补偿伪影。

图15.此CD33 vs CD13散点图显示了所有活细胞。CD33和CD13表达于单核细胞(绿色)、 正在成熟的粒细胞(蓝色)、嗜碱性粒细胞和CD34阳性祖细胞(紫色)上。单核细胞不仅有一 致的较高 CD33 表达水平,还有可变性更高的 CD13。相比更加成熟的粒细胞(蓝色,左侧), 未成熟粒细胞有较高的CD33表达水平和较低的CD13表达水平(蓝色,底部)。大部分淋巴 细胞不表达 CD13 或 CD33(红色)。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 52 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图 17.此 CD19 vs CD33 散点图显示了所有活细胞。CD19 表达于 B 细胞(红色和紫色) 上。CD33表达于单核细胞(绿色)和正在成熟的粒细胞(蓝色)上。B细胞通常不大量表达CD33 。自发荧光(主要来自嗜酸性粒细胞)导致正在成熟的粒细胞(蓝色)存在显著的CD19阳性。

图 18.此 HLA-DR vs CD34 图显示了所有活细胞。HLA-DR 表达于 B 细胞、单核细胞(绿色) 、浆细胞样树突状细胞和 CD34+ 祖细胞(紫色)上。CD34 表达于早期祖细胞上。早期祖细胞 可变地表达CD34和HLA-DR(紫色),且早期单核细胞(紫色,右侧)有最高水平的HLA-DR。

图19.此CD19vsCD123散点图显示了所有活细胞。CD19表达于B细胞上。CD123表达于嗜 碱性粒细胞、浆细胞样树突状细胞、单核细胞(绿色)和CD34+祖细胞(紫色)上。CD19阳性B 细胞通常无CD123的明显表达。CD123阳性嗜碱性粒细胞和浆细胞样树突状细胞不表达CD19 。自发荧光(主要来自嗜酸性粒细胞)导致正在成熟的粒细胞(蓝色)存在显著的CD19阳性。

图 20.此 CD19 vs CD34 散点图显示了所有活细胞。CD19 表达于 B 细胞上。CD34 表达于早 期祖细胞上。早期未成熟B细胞为CD19和CD34阳性,而后期B细胞不表达CD34。CD34+ 髓系祖细胞不表达 CD19。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 53 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

分析无小事

M2 细胞试管

图 21.此 CD38 vs CD19 散点图显示了所有活细胞。CD38 一致地表达于浆细胞和谱系定向 早期祖细胞(紫色)上。在此样本中,大多数祖细胞为表达CD19和中等CD38的B细胞的祖 细胞(紫色)。成熟 CD19+ B 细胞(红色,上方)的 CD38 表达水平较低。浆细胞不仅表现出明 显超出刻度的极高 CD38 表达(紫色,最右侧),还表达可变的 CD19。自发荧光(主要来自嗜 酸性粒细胞)导致正在成熟的粒细胞(蓝色)存在显著的 CD19 阳性。

图 22.此 HLA-DR vs CD15 散点图显示了所有活细胞。CD15 表达于正在成熟的粒细胞(蓝 色)和单核细胞(绿色)上。HLA-DR表达于B细胞、单核细胞(绿色)、浆细胞样树突状细胞和 CD34阳性祖细胞(紫色)上。正在成熟的粒细胞不表达HLA-DR(蓝色),但获得CD15的最初 形态除外。CD34+ 髓系祖细胞(紫色)表达 HLA-DR,但仅短暂性表达 CD15。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 54 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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流式细胞分析免疫表型分型的结果 在此案例中,流式细胞分析免疫表型分型检查未发现免疫表型异常的群体。请注意,建议结合临床和实验室数据考虑,不可单单依据 此测定来判断恶性进展。同时进行的形态学、免疫组织化学和细胞遗传学检查结果可证实无造血系统肿瘤。

目录 > 未见免疫表型异常 > 2 号病例:正常骨髓 55 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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淋巴结 3 号病例:正常淋巴结 临床简介 这名 53 岁的女性存在肿块/病变。提交了一份淋巴结活检样本,以便使用 ClearLLab 10C 方案组进行流式细胞分析免疫表型分型。 流式细胞分析免疫表型分型

B 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

目录 > 未见免疫表型异常 > 3 号病例:正常淋巴结 56 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光的细胞碎片。早期凋 亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有可变的较弱侧向角散射光。 活细胞包含于Cells(细胞)门控内。务必排除无活性细胞,以便最大程度减少组织样本的伪影。

图 4:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。此 图用于突出显示被门控为 CD45 阳性的不同白细胞亚群。CD45 阴性细胞群通常包含红细 胞、血小板细胞团、组织碎片或非造血细胞。

图5:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了CD45+门控中的颗粒。此散点 图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控Ly,红色) 、单核细胞(门控Mo,绿色)和粒细胞(门控Gr,蓝色)。CD45dim(CD45阴暗)门控(紫色)通 常分布着早期祖细胞,即原粒细胞和未成熟B细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细胞、浆 细胞和NK细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同颜色,可以在整个 分析期间识别不同群体。在此病例中,白细胞主要由淋巴细胞组成,这是组织的典型特征。

图6:此CD19vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了Cells(细胞)门控中的颗粒。CD19+ 门控可识别 CD19 阳性细胞。CD19 表达于成熟和未成熟 B 细胞以及大多数浆细胞上。这些 细胞通常有低至中等的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 3 号病例:正常淋巴结 57 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图 7:此 Kappa (κ) vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。表面 κ 轻链 表达于成熟 B 细胞(橙色)和后期未成熟 B 细胞上。κ 阳性 B 细胞的比例通常大于 κ 阴性(λ 阳性)B 细胞。κ 轻链阳性细胞显示于图右侧。

图8:此Lambda (λ) vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。表面λ轻链 表达于成熟 B 细胞(橙色)和后期未成熟 B 细胞上。λ 阳性 B 细胞的比例通常小于 λ 阴性(κ 阳性)B 细胞。λ 轻链阳性细胞显示于图右侧。

图9:此CD10 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD10表达于未成 熟B细胞、成熟生发中心B细胞和成熟粒细胞上。部分CD19 阳性B细胞(橙色)表达CD10 ,该 B 细胞可能是滤泡中心 B 细胞。

图 10:此 CD5 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD5 表达于 T 细 胞(红色)上,并较弱地表达于部分成熟 B 细胞(橙色)上。这些淋巴样细胞通常有较低的侧 向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 3 号病例:正常淋巴结 58 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图11:此CD200vsSideScatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD200通常表达 于B细胞上,但在某些肿瘤B细胞上呈阴性。它专用于区分被套细胞淋巴瘤(通常为CD200 阴性)和慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤(通常为 CD200 阳性)。

图 12:此 CD34 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34 是一种早 期造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T 细胞(淋巴母细胞)上。成熟淋巴细胞为 CD34 阴性。

图 13:此 CD38 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD38 是一种活 化标志物。它在浆细胞上有最高表达水平;在未成熟髓系和淋巴样祖细胞上有中等表达水平; 在单核细胞上有较低表达水平;在活化的成熟淋巴细胞(红色和橙色)上有可变表达水平。

图 14:此 CD20 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD20 表达于成 熟B细胞(橙色)上,而部分成熟T细胞有可变的较低CD20表达水平。它可变地表达于后期 未成熟 B 细胞上。CD20 阳性细胞通常位于淋巴细胞门控内,并具有较低的侧向角散射光。

目录 > 未见免疫表型异常 > 3 号病例:正常淋巴结 59 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图 16.此 CD19 vs CD20 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。成熟 B 细胞表达 CD19 和 CD20(橙色)。某些肿瘤 B 细胞可能表现出较低的 CD19 或 CD20 表达。

图 15.此 Lambda (λ) vs Kappa (κ) 散点图显示了所有 CD19+ 细胞。成熟 B 细胞为表达 κ 或 λ 轻链的多克隆细胞。正常 κ/λ 比为 1.4,范围介于 1 至 2。粘附性血浆免疫球蛋白通常 会导致背景增加。

图18.此CD38 vs CD10散点图显示了淋巴细胞门控内的所有细胞。浆细胞有最高的CD38表 达水平;未成熟B细胞有中等的CD38表达水平;生发中心B细胞有较低的CD38表达水平。 大多数成熟 B 细胞(橙色)表现出较低乃至无 CD38 表达。淋巴结中的生发中心 B 细胞表达 CD10,而表达CD38的水平不定。视乎活化状态,T细胞(红色)可表现出可变的CD38表达。

图 17.此 CD19 vs CD10 散点图显示了淋巴细胞门控内的所有细胞。B 细胞为 CD19 阳性( 橙色)。CD10 阳性成熟 B 细胞分布于淋巴结的生发中心内,一小部分后期未成熟 B 细胞存 在于外周血和骨髓吸取物内。此处所见的阴暗 CD10 阳性是生发中心 B 细胞的典型特征。

目录 > 未见免疫表型异常 > 3 号病例:正常淋巴结 60 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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B 细胞试管

图 20.此 CD19 vs CD5 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。CD5 表达于 T 细 胞(红色,左上角)和某些肿瘤 B 细胞亚型上,而部分正常成熟 B 细胞(橙色)有可变的较低 CD5 表达水平。

图19.此CD20 vs CD10散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟B细胞 (橙色)具有一致的较高 CD20 表达水平。淋巴结中的生发中心 B 细胞以低水平表达 CD10。

图 22.此 CD5 vs CD200 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟 B 细 胞通常以低至中等水平表达 CD200,部分 B 细胞表达 CD5 的水平不定。慢性淋巴细胞白血 病/小淋巴细胞淋巴瘤中的肿瘤 B 细胞通常表达 CD5 和 CD200,而被套细胞淋巴瘤通常表 达 CD5,但无 CD200。

图 21.此 CD20 vs CD200 散点图显示了淋巴细胞门控 (Ly) 内的所有细胞。大多数成熟 B 细 胞(橙色)有低至中等的 CD200 表达水平。

目录 > 未见免疫表型异常 > 3 号病例:正常淋巴结 61 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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T 细胞试管

图 1:此Time(时间)vs CD45 散点图无门控,并显示了按顺序采集的所有颗粒。此图用于评 估样本采集期间的流体扰乱。随着时间推移,如果颗粒分布模式始终如一,则表示采集稳定。 在 Time(时间)门控中可排除偏离稳定模式的颗粒。

图 2:此 FS INT (FS INT) vs FS PEAK(FS 峰)散点图显示了 Time(时间)门控中的颗粒。此图 用于排除细胞双连体或细胞团。单细胞颗粒不仅显示了 INT (INT) vs PEAK(峰)的线性关系, 还包含于 Singlets(单细胞)门控内,而双连体位于线性关系之外。

图 3:此 Side Scatter(侧向角散射光)vs Forward Scatter(前向角散射光)散点图显示了 Singlets(单细胞)门控中的颗粒。此图用于排除通常有较弱前向角散射光和较强侧向角散 射光的细胞碎片。早期凋亡细胞也有略微较强的侧向角散射光,而晚期凋亡和坏死细胞有 可变的较弱侧向角散射光。活细胞包含于 Cells(细胞)门控内。

图 4:此 CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了 Cells(细胞)门控中的颗粒。 此图用于突出显示不同类型的 CD45 阳性白细胞。CD45 阴性细胞群通常包含红细胞、血小 板细胞团或非造血细胞。

目录 > 未见免疫表型异常 > 3 号病例:正常淋巴结 62 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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T 细胞试管

图5:此CD45 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了CD45+门控中的颗粒。此散点 图可以区分外周血、骨髓和淋巴结样本中常见的多个白细胞群,包括淋巴细胞(门控Ly,红色/ 浅绿色)、单核细胞(门控Mo,绿色)和粒细胞(门控Gr,蓝色)。CD45dim(CD45阴暗)门控( 紫色)覆盖的区域通常分布着原粒细胞和未成熟 B 细胞。嗜碱性粒细胞、浆细胞样树突状细 胞、浆细胞和 NK 细胞也可能出现在此区域。通过对各门控包含的颗粒应用不同颜色,可以 在整个分析期间追踪不同群体。在此案例中,白细胞主要由淋巴细胞组成。

图 6:此 CD3 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD3+ 门控可识别 带有表面 CD3 表达的细胞(浅绿色)。CD3 具有高度的 T 细胞特异性,并仅表达于成熟 T 细 胞和后期未成熟 T 细胞的表面上。这些细胞通常有低至中等的侧向角散射光。

图 8:此CD4 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。部分未成熟和成熟 T细胞具有较高的CD4表达水平(浅绿色)。CD4也表达于单核细胞(绿色)上,其表达水平低 于 CD4 阳性 T 细胞,但在此病例中基本不存在。

图 7:此 TCR γδ vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。TCR γδ 是 T 细 胞受体的亚单位,并表达于一小部分细胞毒性 T 细胞上。这些细胞通常有较低的侧向角散 射光(以浅绿色显示)。

目录 > 未见免疫表型异常 > 3 号病例:正常淋巴结 63 Beckman Coulter • ClearLLab 10C 方案组• C33371 AB

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T 细胞试管

图 9:此 CD2 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD2 是表达于几 乎所有未成熟和成熟 T 细胞(浅绿色)上的抗原。CD2 也表达于 NK 细胞上,且单核细胞(绿 色)有较低的 CD2 表达水平。

图 10:此 CD56 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD56 通常表达 于 NK 细胞(红色,右下角)的主要亚群、具有自然杀伤细胞活性的 T 细胞(NK/T 细胞)和许 多伽马/德耳塔 T 细胞(浅绿色)上。在反应性和肿瘤情况下,CD56 还部分表达于单核细胞( 绿色)上。NK 细胞在正常组织中不常见。

图11:此CD5 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD5表达于大多数 未成熟和成熟T细胞(浅绿色)上,而部分成熟B细胞有较低的CD5表达水平。极早期未成熟 T 细胞和伽马/德耳塔 T 细胞通常有极少乃至没有 CD5 表达。一小部分 NK 细胞表达 CD5。

图 12:此 CD34 vs Side Scatter(侧向角散射光)散点图显示了所有活细胞。CD34 是一种早 期造血祖细胞的标志物。它表达于造血干细胞、早期髓系祖细胞(原粒细胞)和未成熟B和T 细胞(淋巴母细胞)上。成熟淋巴细胞为CD34阴性。组织中很少包含CD34阳性的祖细胞群。

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