ClearLLab 10C - Versão estoniana

CE-ANTIKEHA KOMBINATSIOONID LEUKEEMIA/LÜMFOOMI* ANALÜÜSIMISEKS C LEAR LL AB 10C P ANEELID

JUHTUMIKOGUMIK

Iga sündmus loeb * Ainult mitte-Hodgkini lümfoom

1

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

SISUKORD

SISSEJUHATUS............................................................................3 TAUST.............................................................................................3 KONSENSUSE SOOVITUSED IMMUNOFENOTÜÜPIA JAOKS...............................................4 CLEARLLAB 10C PANEELIDE SIHTOTSTARVE.................4 CLEARLLAB 10C PANEELID....................................................4 CLEARLLAB COMPENSATION KIT.......................................5 JUHTUMI VALIK JA TÕLGENDAMINE..................................5 SEOTUD DOKUMENDID...........................................................6 VIITED............................................................................................6 JUHTUMID.....................................................................................7 IMMUNOFENOTÜÜPSED KÕRVALEKALDED PUUDUVAD.............................................7 PERIFEERNE TÄISVERI........................................................... 7 1. juhtum. Normaalne täisveri...........................................7 LUUÜDI.........................................................................................32 2. juhtum. Normaalne luuüdi.........................................32 LÜMFISÕLM............................................................................... 56 3. juhtum. Normaalne lümfisõlm.................................56 B-RAKU PÄRITOLU NEOPLASTILINE PROTSESS..........80 B-LÜMFOBLASTNE LEUKEEMIA / B-LÜMFOBLASTNE LÜMFOOM......................................80 4. juhtum. Äge B-lümfoblastne leukeemia / B-lümfoblastne lümfoom............................................... 80 B-LÜMFOBLASTNE LEUKEEMIA / B-LÜMFOBLASTNE LÜMFOOM.....................................105 5. juhtum. Äge B-lümfoblastne leukeemia / B-lümfoblastne lümfoom..............................................105 KROONILINE LÜMFOTSÜÜTILINE LEUKEEMIA / VÄIKE LÜMFOTSÜÜTILINE LÜMFOOM.......................130 6. juhtum. Krooniline lümfotsüütiline leukeemia / väike lümfotsüütiline lümfoom..................................130 KROONILINE LÜMFOTSÜÜTILINE LEUKEEMIA / VÄIKE LÜMFOTSÜÜTILINE LÜMFOOM.......................154 7. juhtum. Krooniline lümfotsüütiline leukeemia / väike lümfotsüütiline lümfoom..................................154 MANTELRAKULINE LÜMFOOM.....................................178 8. juhtum. Mantelrakuline lümfoom......................... 178 PLASMARAKULINE MÜELOOM....................................202 9. juhtum. Plasmarakuline müeloom.....................202 FOLLIKULAARNE LÜMFOOM........................................226 10. juhtum. Follikulaarne lümfoom..........................226

GERMINAALTSENTRIST PÄRINEV B-RAKULINE LÜMFOOM..................................................250 11. juhtum. Germinaaltsentrist pärinev B-rakuline lümfoom.........................................................250 KÜPSETE B-RAKKUDE LÜMFOOM............................. 274 12. juhtum. Küpsete B-rakkude lümfoom............ 274 KÜPSETE B-RAKKUDE LÜMFOOM.............................298 13. juhtum. Küpsete B-rakkude lümfoom............298 T-RAKU PÄRITOLU NEOPLASTILINE PROTSESS........322 T-LÜMFOBLASTNE LEUKEEMIA / LÜMFOBLASTNE LÜMFOOM.........................................322 14. juhtum. T-lümfoblastne leukeemia / T-lümfoblastne lümfoom..............................................322 T-LÜMFOBLASTNE LEUKEEMIA / LÜMFOBLASTNE LÜMFOOM.........................................346 15. juhtum. T-lümfoblastne leukeemia / T-lümfoblastne lümfoom..............................................346 T-RAKULINE SUUR GRANULAARNE LÜMFOOM................................................................................370 16. juhtum. T-rakuline lümfoproliferatiivne haigus......................................................................................370 T-RAKULINE SUUR GRANULAARNE LÜMFOOM................................................................................394 17. juhtum. T-rakuline lümfoproliferatiivne haigus......................................................................................394 MÜELOIDSET PÄRITOLU NEOPLASTILINE PROTSESS.................................................................................418 ÄGE MÜELOIDNE LEUKEEMIA.......................................418 18. juhtum. Äge müeloidne leukeemia...................418 ÄGE MÜELOIDNE LEUKEEMIA..................................... 442 19. juhtum. Äge monotsüütne leukeemia...........442 ÄGE MÜELOIDNE LEUKEEMIA..................................... 466 20. juhtum. Äge müeloidne leukeemia – NOS......................................................................................... 466 ÄGE MÜELOIDNE LEUKEEMIA.....................................490 21. juhtum. Äge promüelotsüütne leukeemia.............................................................................490 ÄGE MÜELOIDNE LEUKEEMIA.......................................514 22. juhtum. Äge monotsüütne leukeemia...........514 MÜELODÜSPLASTILINE SÜNDROOM.......................538 23. juhtum. Müelodüsplastiline sündroom.........538 MÜELODÜSPLASTILINE SÜNDROOM.......................562 24. juhtum. Müelodüsplastiline sündroom.........562

Iga sündmus loeb

2

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

SISSEJUHATUS See juhtumikogumik on koostatud selleks, et aidata analüüsida voolutsütomeetrilise immunofenotüüpia andmeid, mis on loodud leukeemia ja lümfoomi analüüsimiseks Beckman Coulteri ClearLLab 10C paneelide CE-IVD-märgistusega reaktiivi abil voolutsütomeetrites Beckman Coulter Navios ja Navios EX. Siia on koondatud mitmesuguste lümfoidsetele ja müeloidsetele kasvajatele iseloomulike leidude näidisjuhtumid, samuti juhtumid patsientide kohta, kellel on kliinilised ja/või laboratoorsed leiud, mis viitavad aluseks olevale neoplastilisele protsessile, kuid mille puhul immunofenotüüpseid kõrvalekaldeid ei tuvastatud. Proovide tüübid hõlmavad perifeerset täisverd, luuüdi ja lümfisõlmi. Iga juhtum sisaldab kliinilist vinjetti, mis kirjeldab patsiendi demograafiat ja kliinilist ajalugu, juhtumipõhiseid loendirežiimi andmefaile, mille põhjal saab selle juhtumikogumiku kasutaja teha kordusanalüüsi, ClearLLab 10C kohaseid analüüsiprotokolle, mida kasutatakse koos loendirežiimi andmetega, ja aruannet, mis näitab analüüsi koos esitatud protokollidega. Iga aruanne sisaldab analüüsimärkusi, mis tõstavad esile immunofenotüüpseid tulemusi ja võimalikke lõkse. MÄRKUS. Juhtumikogumiku näited on vaid näitlikud ja kõik hematolümfoidsete kasvajate kategooriad ei pruugi olla esindatud, samuti ei ole kirjeldatud või esitletud kõiki võimalikke immunofenotüüpseid variante. TAUST Voolutsütomeetria immunofenotüüpia hindab konkreetsete antigeenide olemasolu ja puudumist iga proovis sisalduva eraldi raku puhul. Koos vaadelduna tekitavad need tulemused iga raku immunofenotüüpse profiili, mis on selles proovi tüübis oodatud populatsiooniga kooskõlas (st normaalne) või pole oodatud populatsiooniga kooskõlas (st kõrvalekalduv). Hematolümfoidsete pahaloomuliste kasvajate kahtlusega patsientide proovide hindamine hõlmab mitut etappi 1 .

• Proovi kõigi rakupopulatsioonide hindamine.

• Iga rakupopulatsiooni määramine normaalseks või kõrvalekalduvaks.

• Kõrvalekalduva populatsiooni üksikasjalik iseloomustamine antigeenide olemasolu või puudumise alusel, samuti fluorokroomiga märgistatud antikehade värvimise suurema või väiksema intensiivsuse alusel. • Kõrvalekaldega immunofenotüübi tõlgendamine, lisades võimaluse korral teavet, nagu kliiniline ajalugu, histoloogia, tsütoloogia, immunohistokeemia ja genotüübiuuringud, nagu in situ hübridisatsioon, karüotüüp ja molekulaardiagnostika.

Iga sündmus loeb

3

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

KONSENSUSE SOOVITUSED IMMUNOFENOTÜÜPIA JAOKS Viimase kahe aastakümne jooksul on kerkinud esile konsensuse soovitused proovide voolutsütomeetrilise immunofenotüüpia jaoks hematolümfoidsete pahaloomuliste kasvajate või nende kahtlusega patsientide puhul ja teaduskirjanduses on avaldatud mitmesuguseid suuniseid. Voolutsütomeetriline immunofenotüüpia kuulub Maailma Terviseorganisatsiooni vereloome- ja lümfikudede kasvajate klassifikatsiooni aastast 2008 2 . Meditsiinilised näidustused ja voolutsütomeetria analüüsi valideerimist, sh analüüsieelseid, -aegseid ja -järgseid analüüsimise üksikasju, käsitletakse 2006. aasta Bethesda rahvusvahelise konsensusekonverentsi soovitustes 3,4,5 ja ICSH/ICCS-i praktilistes suunistes rakupõhiste fluorestsentsanalüüside puhul 6,7,8 . ClearLLab 10C PANEELIDE SIHTOTSTARVE ClearLLab 10C paneelid on ette nähtud in vitro diagnostiliseks kasutamiseks rakupopulatsioonide kvalitatiivsel tuvastamisel mitme parameetri immunofenotüpiseerimisega voolutsütomeetritel Navios ja Navios EX. Neid reaktiive kasutatakse abivahendina nende hematoloogiliselt kõrvalekalduvate patsientide diferentsiaaldiagnostikas, kellel esineb või kellel kahtlustatakse järgmisi vereloomekasvajaid: krooniline leukeemia, äge leukeemia, mitte-Hodgkini lümfoom, müeloom, müelodüsplastiline sündroom (MDS) ja/või müeloproliferatiivsed kasvajad (MPN). Reaktiive saab kasutada perifeerse täisverega (kogutakse K 2 EDTA-s, happelise tsitraadi dekstroosis (ACD) või hepariinis), luuüdi (kogutakse K 2 EDTA-s, ACD-s või hepariinis) ja lümfisõlmede proovidega. Tulemuste tõlgendamist peaks kinnitama patoloog või samaväärne spetsialist koos teiste kliiniliste ja laboratoorsete avastustega.

Need reaktiivid pakuvad allpool loetletud pinnaantigeenide jaoks mitme parameetriga kvalitatiivseid tulemusi.

ClearLLab 10C paneelid

Sinine laser

Punane laser

Violetne laser

antigeeni esitlevad

Osa number Katsuti

APC- A700

APC- A750 PB KRO

FITC PE ECD PC5.5 PC7

rakud (APC)

B96805 B-rakkude katsuti

Kapa Lambda CD10 CD5 CD200 CD34

CD38 CD20 CD19 CD45

B96806 T-rakkude katsuti

CD4 CD2 CD56 CD5

CD34

CD7

CD8 CD3 CD45

TCR γδ

B96807 M1-rakkude katsuti

CD16

CD7

CD10 CD13 CD64

CD34

CD14 HLA-DR CD11b CD45

B96808 M2-rakkude katsuti

CD15 CD123 CD117 CD13 CD33

CD34

CD38 HLA-DR CD19 CD45

Iga sündmus loeb

4

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

ClearLLab COMPENSATION KIT

Sinine laser

Punane laser

Violetne laser

antigeeni esitlevad

Osa number

APC- A700

APC- A750 PB KRO

FITC

PE

ECD PC5.5 PC7

rakud (APC)

B74074

CD4

CD4

CD3

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD8

Eespool nimetatud reaktiiv antakse standardkujul kasutamiseks koos reaktiividega proovi ettevalmistamiseks ja tsütomeetri seadistamiseks, koos tarkvaraga andmehõiveks ning analüüsimiseks. ClearLLab 10C paneelid on kooskõlas standardimissoovitustega Bethesda suunistes 2 . Lisateave ClearLLab 10C paneelide kohta on saadaval lehel beckman.com/ClearLLab . JUHTUMI VALIK JA TÕLGENDAMINE Selles juhtumikogumikus esitatud andmed on genereeritud ClearLLab 10C paneeli kasutusjuhistes ( beckman.com ) antud protseduuri kohaselt. Näidisjuhtumid on valitud kliinilise katse andmete hulgast ja need on üle vaadanud, neid on kommenteerinud ja tõlgendanud:

Brent Wood MD PhD meditsiini- ja patoloogialabori professor, hematopatoloogia divisjoni juht hematopatoloogia labori ja SCCA patoloogia direktor SCCA laborite meditsiinidirektor Washingtoni Ülikool, Seattle, WA, USA

Xueyan Chen, MD, PhD meditsiinilabori professori assistent hematopatoloogia labori asedirektor Washingtoni Ülikool, Seattle, WA Yi Zhou, MD PhD professori assistent laborimeditsiini teaduskond Washingtoni Ülikool, Seattle, WA

Analüüsiprotokollid: laadige alla ClearLLab 10C analüüsiprotokoll. Analüüs: laadige alla juhtumipõhised Kaluza C analüüsifailid.

Iga sündmus loeb

5

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

VIITED 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms. F.E. Craig, K.A. Foon. Blood. 2008; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Swerdlow SH, et al. Blood. 2016;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Arber DA, et al. Blood 2016 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia. Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications. Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S5-13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia. Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72 Suppl 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues. Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):291-308. doi: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations. Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):309-14. doi: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria. Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; ICSH/ICCS Working Group. Cytometry B Clin Cytom. 2013 Sep-Oct;84(5):315-23. doi: 10.1002/cyto.b.2110 SEOTUD DOKUMENDID • ClearLLab 10C Application System Guide (ClearLLab 10C rakenduse süsteemi juhend), PN C28533AA • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use (Kaluza C voolutsütomeetria tarkvara kasutusjuhised), PN C25276 • Navios Flow Cytometer Instructions For Use (Voolutsütomeetri Navios kasutusjuhised), PN B74394AC • Voolutsütomeetri Navios EX kasutusjuhised, PN B77123AC • ClearLLab 10C paneelide kasutusjuhised, PN C00197 • Kompensatsioonigraanulite ClearLLab Compensation Beads kasutusjuhised, PN C00201 • Komplekti ClearLLab Compensation Kit kasutusjuhised, PN B74074 • Kontrollrakkude ClearLLab Control Cells kasutusjuhised, PN B99884 • Kontrollrakkude ClearLLab Control Cells kvaliteedikontrolli analüüsiprotokollide allalaadimise lisa, PN C33275AA

Iga sündmus loeb

6

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

JUHTUMID

Juhtumite puhul kohaldatakse järgmist piiritlust värvide tähtsusjärjestuse alusel.

Lümfotsüüdid (piiritlus Ly) / NK-rakud: punane CD19+ B-rakud: oranž CD3+ T-rakud: rohekassinine

Monotsüüdid (piiritlus Mo): roheline Granulotsüüdid (piiritlus Gr): sinine

CD45dim: lilla Täiendavad kõrvalekalduvad populatsioonid: sinakasroheline CD45-negatiivne populatsioon: hall

IMMUNOFENOTÜÜPSED KÕRVALEKALDED PUUDUVAD Voolutsütomeetria on leukotsüüdipopulatsioonide iseloomustamise vahend. Sellest võib olla abi selliste hematoloogiliselt kõrvalekalduvate patsientide diferentsiaaldiagnostikas, kellel esineb või kellel kahtlustatakse järgmisi vereloomekasvajaid: krooniline leukeemia, äge leukeemia, mitte-Hodgkini lümfoom, müeloom, müelodüsplastiline sündroom (MDS) ja/või müeloproliferatiivsed kasvajad (MPN). Kõrvalekalduvate populatsioonide tuvastamisel nendes kliinilistes olukordades on äärmiselt tähtis täisvere, luuüdi ja lümfisõlme koeproovide normaalsete rakupopulatsioonide tundmine. Järgmised on ClearLLab 10C paneelidega värvitud normaalsete proovide näited.

PERIFEERNE TÄISVERI 1. juhtum. Normaalne täisveri

Kliiniline vinjett

Sellel 65-aastasel meessoost isikul on näha trombotsütopeenia. Perifeerse täisvere proov edastatakse voolutsütomeetriliseks immunofenotüüpiaks ClearLLab 10C paneelidega.

Voolutsütomeetriline immunofenotüüpia

B-rakkude katsuti

Joonis 1. See aja vs. CD45 punktdiagrammon piiritluseta ja näitab kõiki järjest kogutud sündmusi. Diagrammi eesmärk on hinnata vedelikuga seotud tervikhäiret proovi valmendamise ajal. Stabiilset valmendamist tähistab ühtlane sündmustemuster aja jooksul. Stabiilsest mustrist kõrvalekalduvad sündmused võib piiritlusest Time (Aeg) välja arvata.

Joonis 2. See punktdiagramm FS INT vs. FS PEAK näitab sündmusi piiritluses Time (Aeg). Diagrammi eesmärk on välistada rakudublette või -kogumeid. Üksiksündmused näitavad parameetrite INT ja PEAK vahelist lineaarset seost ning on kaasatud piiritlusse Singlets (Üksikud), samas kui dubletid jäävad lineaarsest seosest väljapoole.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

7

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

B-rakkude katsuti

Joonis 3. See külghajumise vs. pärihajumise punktdiagrammnäitab sündmusi piiritluses Singlets (Üksikud). Diagrammi eesmärk on välistada rakujäägid, millel tavaliselt on vähenenudpärihajumine.Varastelapoptootilistelrakkudelonsamutikergeltsuurenenud külghajumine, samas kui hilistel apoptootilistel ja nekrootilistel rakkudel on varieeruvalt vähenenud külghajumine. Elujõulised rakud on kaasatud piiritlusse Cells (Rakud).

Joonis 4. See CD45 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab sündmusi piiritluses Cells (Rakud). Diagrammi eesmärk on tuua esile erinevad leukotsüütide alamrühmad, mis on piiritletud CD45-positiivsetena. CD45 negatiivne populatsioon sisaldab tavaliselt erütrotsüüte, trombotsüütide kogumeid, koejääke või mitte-vereloome rakke.

Joonis 6. See CD19 vs. külghajumise punktdiagramm näitab sündmusi piiritluses Cells (Rakud). CD19+ piiritlus tuvastab CD19-positiivsed rakud. CD19 ekspresseerub küpsetel ja ebaküpsetel B-rakkudel, samuti enamikul plasmarakkudel. Neil rakkudel on tavaliselt nõrk kuni mõõdukas külghajumine.

Joonis 5. See CD45 vs. külghajumise punktdiagramm näitab sündmusi piiritluses CD45+. Punktdiagramm võimaldab eristada mitut leukotsüütide populatsiooni, mis tavaliselt leiduvad perifeerses vere, luuüdi ja lümfisõlme proovides, kaasa arvatud lümfotsüüdid (piiritlus Ly, punane/oranž), monotsüüdid (piiritlus Mo, roheline) ja granulotsüüdid (piiritlus Gr, sinine). CD45dim-piiritlus (lilla) katab ala, mille tavaliselt hõivavad varased eelrakud, st müeloblastid ja ebaküpsed B-rakud. Selles alas võivad esineda ka basofiilid, plasmatsütoidsed dendriitrakud, plasmarakud ja NK-rakud. Iga piiritlusega hõlmatud sündmuste puhul erinevate värvide kasutamisel võib analüüside käigus tuvastada erinevaid populatsioone.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

8

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

B-rakkude katsuti

Joonis 7. See kapa vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. Pinna kapa-kergahel ekspresseerub küpsetel B-rakkudel (oranž) ja hilise staadiumi ebaküpsetel B-rakkudel. Kapa-positiivsete B-rakkude osakaal on tavaliselt suurem kui kapa-negatiivsete (lambda-positiivsete) B-rakkude osakaal. Immunoglobuliini Fc retseptoriga vahendatud sidumise tõttu on nähamonotsüütidel (roheline) selget kapa- positiivsust. Kapa-kergahela positiivsed rakud on näidatud diagrammi paremal küljel.

Joonis 8. See lambda vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. Pinna lambda-kergahel ekspresseerub küpsetel B-rakkudel (oranž) ja hilise staadiumi ebaküpsetel B-rakkudel. Lambda-positiivsete B-rakkude osakaal on tavaliselt väiksem kui lambda-negatiivsete (kapa-positiivsete) B-rakkude osakaal. Immunoglobuliini Fc-retseptoriga vahendatud sidumise tõttu on näha monotsüütidel (roheline) selget lambda-positiivsust. Lambda-kergahela positiivsed rakud on näidatud diagrammi paremal küljel.

Joonis 9. See CD10 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD10 ekspresseerub ebaküpsetel B-rakkudel, küpsetel germinaaltsentri B-rakkudel ja küpsetel granulotsüütidel (sinine). Granulotsüütidel on tugev külghajumine erinevalt lümfoidrakkudest, millel on nõrk külghajumine.

Joonis 10. See CD5 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD5 ekspresseerub ebaküpsetel ja küpsetel T-rakkudel (punane, all paremal), samuti ebaselgelt küpsete B-rakkude alamrühmal (oranž). Neil lümfoidrakkudel on tavaliselt nõrk külghajumine.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

9

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

B-rakkude katsuti

Joonis 11. See CD200 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD200 ekspresseerub tavaliselt B-rakkudel, kuid on mõningate neoplastiliste B-rakkude puhul negatiivne. See on eriti kasulik mantelrakulise lümfoomi (tavaliselt CD200-negatiivne) eristamiseks kroonilisest lümfotsüütilisest leukeemiast / väikesest lümfotsüütilisest lümfoomist (tavaliselt CD200-positiivne).

Joonis 12. See CD34 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD34 on varaste vereloome eelrakkude marker. See ekspresseerub vereloome tüvirakkudel, varastel müeloidsetel eelrakkudel (müeloblastid) ning küpsetel B- ja T-rakkudel (lümfoblastid). Küpsed granulotsüüdid, monotsüüdid ja lümfotsüüdid on CD34 suhtes negatiivsed. CD34-positiivsed eelrakud moodustavad tavaliselt alla 0,01% perifeerse vere leukotsüütidest.

Joonis 14. See CD20 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD20 ekspresseerub küpsetel B-rakkudel (oranž) ja varieeruvalt madalal tasemel küpsete T-rakkude alamrühmal. See ekspresseerub varieeruvalt hilise staadiumi ebaküpsetel B-rakkudel. CD20-positiivsed rakud on tavaliselt nõrga külghajumisega lümfotsüütide piiritluses.

Joonis 13. See CD38 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD38 on aktiveerimismarker. See ekspresseerub kõrgeimal tasemel plasmarakkudel, mõõdukaltasemelebaküpsetelmüeloidsetel ja lümfoidseteleelrakkudel,madalaltasemel monotsüütidel (roheline) ja varieeruval tasemel aktiveerunud küpsetel lümfotsüütidel.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

10

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

B-rakkude katsuti

Joonis 15. See lambda vs. kapa punktdiagramm näitab kõiki CD19+ rakke. Varased ebaküpsed B-rakud (lilla) ei ekspresseeri pinna immunoglobuliini kergahelaid, st negatiivseidkaskapa-või lambda-kergahelasuhtes.KüpsedB-rakudonpolüklonaalsed, ekspresseerides kas kapa- või lambda-kergahelat. Normaalne kapa-lambda suhe on 1,4 vahemikus 1 kuni 2. Külguvast plasma immunoglobuliinist tingitud suurenenud taust on tavaline.

Joonis 16. See CD19 vs. CD20 punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). Küpsed B-rakud ekspresseerivad nii CD19 kui ka CD20 (oranž). Osad neoplastilised B-rakud võivad näidata CD19 või CD20 ekspressiooni vähenemist.

Joonis 18. See CD38 vs. CD10 punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). CD38 ekspresseerub kõrgeimal tasemel plasmarakkudel, mõõdukal tasemelebaküpsetelB-rakkudel jamadalaltasemelgerminaaltsentriB-rakkudel.Enamik küpsetest B-rakkudest (oranž) näitab CD38 madalat kuni puuduvat ekspressiooni. T-rakud (punane) näitavadolenevalt aktiveerimisolekustmuutlikkuCD38 ekspressiooni.

Joonis 17. SeeCD19 vs. CD10punktdiagrammnäitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). B-rakud on CD19-positiivsed (oranžid). CD10-positiivsed küpsed B-rakud levivad lümfisõlmedes germinaaltsentrites ning väike alamrühmhilise staadiumi ebaküpseid B-rakke esineb perifeerses veres ja luuüdi aspiraatides.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

11

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

B-rakkude katsuti

Joonis 19. See CD20 vs. CD10 punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). Enamik küpsetest B-rakkudest ekspresseerib ühtlaselt kõrgel tasemel CD20 ilma CD10-ta.

Joonis 20. See CD19 vs. CD5 punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). CD5 ekspresseerub T-rakkudel (punane, ülal vasakul), ekspresseerub varieeruvalt madalal tasemel normaalsete küpsete B-rakkude (oranž) alamrühmal ja ekspresseerub mõningate neoplastiliste B-rakkude alamrühmadel.

Joonis 22. See CD5 vs. CD200 punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). Enamik küpsetest B-rakkudest ekspresseerib tavaliselt CD200 koos alamrühmaga, mis ekspresseerib varieeruvalt CD5. Neoplastilised B-rakud kroonilise lümfotsüütilise leukeemia / väikese lümfotsüütilise lümfoomi korral ekspresseerivad tavaliselt CD5 ja CD200, kusjuures mantelrakuline lümfoom ekspresseerib tavaliselt CD5, kuid mitte CD200.

Joonis 21. See CD20 vs. CD200 punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). Enamik küpsetest B-rakkudest (oranž) ekspresseerib CD200madalal kuni mõõdukal tasemel.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

12

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

T-rakkude katsuti

Joonis 1. See aja vs. CD45 punktdiagrammon piiritluseta ja näitab kõiki järjest kogutud sündmusi. Diagrammi eesmärk on hinnata vedelikuga seotud tervikhäiret proovi valmendamise ajal. Stabiilset valmendamist tähistab ühtlane sündmustemuster aja jooksul. Stabiilsest mustrist kõrvalekalduvad sündmused võib piiritlusest Time (Aeg) välja arvata.

Joonis 2. See punktdiagramm FS INT vs. FS PEAK näitab sündmusi piiritluses Time (Aeg). Diagrammi eesmärk on välistada rakudublette või -kogumeid. Üksiksündmused näitavad parameetrite INT ja PEAK vahelist lineaarset seost ning on kaasatud piiritlusse Singlets (Üksikud), samas kui dubletid jäävad lineaarsest seosest väljapoole.

Joonis 3. See külghajumise vs. pärihajumise punktdiagrammnäitab sündmusi piiritluses Singlets (Üksikud). Diagrammi eesmärk on välistada rakujäägid, millel tavaliselt on pärihajumine vähenenud ja külghajumine suurenenud. Varastel apoptootilistel rakkudel on samuti kergelt suurenenud külghajumine, samas kui hilistel apoptootilistel ja nekrootilistel rakkudel on varieeruvalt vähenenud külghajumine. Elujõulised rakud on kaasatud piiritlusse Cells (Rakud).

Joonis 4. See CD45 vs. külghajumise punktdiagramm näitab sündmusi piiritluses Cells (Rakud). Diagrammi eesmärk on tuua esile erinevad leukotsüütide tüübid, mis on CD45-positiivsed. CD45 negatiivne populatsioon sisaldab tavaliselt erütrotsüüte, trombotsüütide kogumeid või mitte-vereloome rakke.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

13

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

T-rakkude katsuti

Joonis 5. See CD45 vs. külghajumise punktdiagramm näitab sündmusi piiritluses CD45+. Punktdiagramm võimaldab eristada mitut leukotsüütide populatsiooni, mis tavaliselt leiduvad perifeerses vere, luuüdi ja lümfisõlme proovides, kaasa arvatud lümfotsüüdid (piiritlus Ly, punane/rohekassinine), monotsüüdid (piiritlus Mo, roheline) ja granulotsüüdid (piiritlus Gr, sinine). CD45dim-piiritlus (lilla) katab ala, mille tavaliselt hõivavad müeloblastid ja ebaküpsed B-rakud. Sellesse alasse võivad langeda ka basofiilid, plasmatsütoidsed dendriitrakud, plasmarakud ja NK-rakud. Iga piiritlusega hõlmatud sündmuste puhul erinevate värvide kasutamisel võib analüüside käigus jälgida erinevaid populatsioone.

Joonis 6. See CD3 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD3+ piiritlus tuvastab rakud, mille pinnal ekspresseerub CD3 (rohekassinine). CD3 on väga spetsiifiline T-rakkudele, ekspresseerudes ainult küpsete T-rakkude ja hilise staadiumi ebaküpsete T-rakkude pinnal. Neil rakkudel on tavaliselt nõrk kuni mõõdukas külghajumine.

Joonis 8. See CD4 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD4 ekspresseerub ebaküpsete ja küpsete T-rakkude alamrühmal kõrgel tasemel (rohekassinine). CD4 ekspresseerub kamonotsüütilistel rakkudel (roheline)madalamal tasemel kui CD4-positiivsete T-rakkude puhul.

Joonis 7. See TCR γδ vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. TCR γδ on T-rakkude retseptori allüksus ja ekspresseerub tsütotoksiliste T-rakkude väikesel alamrühmal. Neil rakkudel on tavaliselt nõrk külghajumine (rohekassinine).

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

14

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

T-rakkude katsuti

Joonis 9. See CD2 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD2 on antigeen, mida ekspresseerivad peaaegu kõik ebaküpsed ja küpsed T-rakud (rohekassinine). CD2 ekspresseerub ka NK-rakkudel (punane, paremal all) ja madalal tasemel monotsüütidel (roheline).

Joonis 10. See CD56 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD56 ekspresseerub tavaliselt NK-rakkude suurel alamrühmal (punane), loomulike tappurrakkudena toimivatel T-rakkudel (NK/T-rakud) ja paljudel gamma/delta T-rakkudel (rohekassinine). CD56 ekspresseerub osaliselt monotsüütilistes rakkudes (roheline) nii reaktiivsetes kui ka neoplastilistes tingimustes.

Joonis 11. See CD5 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD5 ekspresseerub enamikul ebaküpsetel ja küpsetel T-rakkudel (rohekassinine) jamadalal tasemel küpsete T-rakkude alamrühmal. Väga varastel ebaküpsetel T-rakkudel ja gamma/delta T-rakkudel on tavaliselt vähene või puuduv CD5 ekspressioon. Väike NK-rakkude alamrühm ekspresseerib CD5.

Joonis 12. See CD34 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD34 on varaste vereloome eelrakkude marker. See ekspresseerub vereloome tüvirakkudel, varastel müeloidsetel eelrakkudel (müeloblastid) ning küpsetel B- ja T-rakkudel (lümfoblastid). Küpsed granulotsüüdid, monotsüüdid ja lümfotsüüdid on CD34 suhtes negatiivsed. CD34-positiivsed eelrakud moodustavad tavaliselt alla 0,01% perifeerse vere leukotsüütidest.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

15

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

T-rakkude katsuti

Joonis 13. See CD7 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. CD7 ekspresseerub ebaküpsetel T-rakkudel T-rakkude varajaseimas staadiumis ja püsib kogu T-rakkude küpsemise vältel, ekspresseerudes varieeruvalt küpsetel T-rakkudel (rohekassinine). See ekspresseerub ka ühtlaselt NK-rakkudel (punane, paremal all) ning ebaselgelt plasmatsütoidsete dendriitrakkude alamrühmal ja põlvnemisliiniga seotud CD34-positiivsete eelrakkude alamrühmal.

Joonis 14. See CD8 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD8 ekspresseerub ebaküpsete ja küpsete T-rakkude alamrühmal (rohekassinine) ja määratleb tsütotoksilise küpsete T-rakkude populatsiooni. See ekspresseerub varieeruvalt madalal tasemel NK-rakkudel ja gamma/delta T-rakkudel.

Joonis 15. See CD3 vs. CD56 punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). T-rakud on määratletud CD3 ekspressiooniga, kuna see esineb kõigil küpsetel T-rakkudel ega ole ekspresseerunud teiste põlvnemisliinide rakkudel. NK-rakud ei ekspresseeri määratluse järgi pinna CD3, kuid ekspresseerivad CD56 peamisel alamrühmal (punane, ülal vasakul). Küpsete T-rakkude väikesed alamrühmad ekspresseerivad ka CD56, eriti loomulike tappurrakkudena toimivatel T-rakkudel (NK/T-rakud) ja gamma/delta T-rakkudel.

Joonis 16. See CD5 vs. CD3 punktdiagrammnäitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). CD3 ja CD5 koekspresseeruvad enamikul küpsetel T-rakkudel (rohekassinine), kuigi suure granulaarse lümfotsüütidemorfoloogiaga tsütotoksiliste T-rakkude väikesel alamhulgal on sageli vähenenud kuni puuduv CD5 ekspressioon. CD5 ei ekspresseeru enamikul NK-rakkudel.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

16

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

T-rakkude katsuti

Joonis 18. See CD8 vs. CD4 punktdiagrammnäitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). CD3-positiivsed T-rakud (rohekassinine) sisaldavad CD4-positiivset (abistavat) ja CD8-positiivset (tsütotoksilist) alamrühma. CD4-positiivsete T-rakkude arv ületab tavaliselt CD8-positiivsete T-rakkude arvu, nii et CD4 : CD8 suhe perifeerses veres on 1 : 1 kuni 4 : 1. Esinevad ka juhuslikud CD4 ja CD8 kaksiknegatiivsed või kaksikpositiivsed T-rakud. Kaksiknegatiivsed T-rakud koosnevad peamiselt gamma/delta T-rakkudest. Pange tähele, et CD4-positiivsed, kuid CD3-negatiivsed rakud (punane, keskel vasakul) on lümfotsüütide piiritluses sisalduvad monotsüüdid. See näitab, et CD45 vs. külghajumise piiritlus üksi ei võimalda puhtaid lümfotsüüte tuvastada.

Joonis 17. See CD7 vs. CD2 punktdiagrammnäitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). CD2 ja CD7 koekspresseeruvad suurel enamusel küpsetest T-rakkudest (rohekassinine) ja NK-rakkudest (punane, ülal paremal).

Joonis 19. See CD3 vs. CD4 punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). Kõik CD4-positiivsed T-rakud ekspresseerivad CD3. Monotsüüdid ja plasmatsütoidsed dendriitrakud ekspresseerivad CD4 madalamal tasemel kui CD4- positiivsed T-rakud ja neil puudub CD3 ekspressioon. NK-rakkudel puudub nii CD3 kui ka CD4 ekspressioon.

Joonis 20. See CD3 vs. CD8 punktdiagrammnäitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). Kõik CD8-positiivsed T-rakud ekspresseerivad CD3 (rohekassinine). Väike NK- rakkude alamrühm ekspresseerib ka CD8 (punane, ülal vasakul) ilma CD3-ta.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

17

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

T-rakkude katsuti

Joonis 21. See CD3 vs. TCR γδ punktdiagramm näitab kõiki rakke lümfotsüütide piiritluses (Ly). Väikesel T-rakkude alamrühmal ekspresseerub TCR gamma/delta, mis on CD3-ga koekspresseeritud. CD3 ja TCR-i tugevalt lineaarne seos on tingitud nende esinemisest heterodimeerse kompleksina, mille fikseeritud suhe on 1 : 1, nii et ühe ekspressiooni suurenemine näitab teise ekspressiooni suurenemist.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

18

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M1-rakkude katsuti

Joonis 1. See aja vs. CD45 punktdiagrammon piiritluseta ja näitab kõiki järjest kogutud sündmusi. Diagrammi eesmärk on hinnata vedelikuga seotud tervikhäiret proovi valmendamise ajal. Stabiilset valmendamist tähistab ühtlane sündmustemuster aja jooksul. Stabiilsest mustrist kõrvalekalduvad sündmused võib piiritlusest Time (Aeg) välja arvata.

Joonis 2. See punktdiagramm FS INT vs. FS PEAK näitab sündmusi piiritluses Time (Aeg). Diagrammi eesmärk on välistada rakudublette või -kogumeid. Üksiksündmused näitavad parameetrite INT ja PEAK vahelist lineaarset seost ning on kaasatud piiritlusse Singlets (Üksikud), samas kui dubletid jäävad lineaarsest seosest väljapoole.

Joonis 4. See CD45 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab sündmusi piiritluses Cells (Rakud). Diagrammi eesmärk on tuua esile erinevad leukotsüütide alamrühmad, mis on piiritletud CD45-positiivsetena. CD45 negatiivne populatsioon sisaldab tavaliselt erütrotsüüte, trombotsüütide kogumeid, koejääke või mitte-vereloome rakke.

Joonis 3. See külghajumise vs. pärihajumise punktdiagrammnäitab sündmusi piiritluses Singlets (Üksikud). Diagrammi eesmärk on välistada rakujäägid, millel tavaliselt on pärihajumine vähenenud ja külghajumine suurenenud. Varastel apoptootilistel rakkudel on samuti kergelt suurenenud külghajumine, samas kui hilistel apoptootilistel ja nekrootilistel rakkudel on varieeruvalt vähenenud külghajumine. Elujõulised rakud on kaasatud piiritlusse Cells (Rakud).

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

19

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M1-rakkude katsuti

Joonis5.SeeCD45vs.külghajumisepunktdiagrammnäitabsündmusipiiritlusesCD45+. Punktdiagrammvõimaldab eristadamitut leukotsüütide populatsiooni, mis tavaliselt leiduvad perifeerses vere, luuüdi ja lümfisõlme proovides, kaasa arvatud lümfotsüüdid (piiritlus Ly, punane), monotsüüdid (piiritlus Mo, roheline) ja granulotsüüdid (piiritlus Gr, sinine). CD45dim-piiritlus (lilla) katab ala, mille tavaliselt hõivavad müeloblastid ja ebaküpsed B-rakud. Sellesse alasse võivad langeda ka basofiilid, plasmatsütoidsed dendriitrakud, plasmarakud ja NK-rakud. Iga piiritlusega hõlmatud sündmuste puhul erinevate värvide kasutamisel võib analüüside käigus jälgida erinevaid populatsioone.

Joonis 6. See CD16 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. CD16 ekspresseerub kõrgeimal tasemel küpsetel granulotsüütidel (sinine). Enamik NK- rakke ekspresseerib CD16 (punane, all paremal), nagu ka aktiveerunudmonotsüütide alamrühm (roheline).

Joonis 7. See CD7 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD7 ekspresseerubebaküpsetelT-rakkudelT-rakkudevarajaseimasstaadiumis japüsibkogu T-rakkude küpsemise vältel, ekspresseerudes varieeruvalt küpsetel T-rakkudel (punane, all paremal). See ekspresseerub ka NK-rakkudel ning ebaselgelt plasmatsütoidsete dendriitrakkude alamrühmal ja põlvnemisliiniga seotud eelrakkude alamrühmal.

Joonis 8. See CD10 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD10 ekspresseerub ebaküpsetel B-rakkudel, küpsetel germinaaltsentri B-rakkudel ja küpsetel granulotsüütidel (sinine). Granulotsüütidel on tugev külghajumine erinevalt lümfoidrakkudest, millel on nõrk külghajumine.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

20

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M1-rakkude katsuti

Joonis 9. See CD13 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. CD13 ekspresseerub küpsevatel granulotsüütidel (sinine), küpsetel monotsüütidel (roheline) ja müeloidsetel eelrakkudel (lilla).

Joonis 10. See CD64 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD64 ekspresseerub kõrgeimal tasemel küpsetel monotsüütidel (roheline). CD64 ei ole hästi ekspresseerunud puhkeseisundis küpsetel granulotsüütidel (sinine), kuid ekspressioon suureneb granulotsüütide aktiveerumisel. CD64 ei ekspresseeru lümfotsüütidel (punane) ega enamikul CD34-positiivsetest eelrakkudest. Aktiveeritud küpsed monotsüüdid ekspresseerivad CD64 madalamal tasemel ja neil on väiksem külghajumine.

Joonis 11. See CD34 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD34 on varaste vereloome eelrakkude marker. See ekspresseerub vereloome tüvirakkudel, varastel müeloidsetel eelrakkudel (müeloblastid) ning küpsetel B- ja T-rakkudel (lümfoblastid). Küpsed granulotsüüdid, monotsüüdid ja lümfotsüüdid on CD34 suhtes negatiivsed. CD34-positiivsed eelrakud moodustavad tavaliselt alla 0,01% perifeerse vere leukotsüütidest.

Joonis 12. See CD14 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. CD14 ekspresseerub kõrgel tasemel küpsetel monotsüütidel (roheline) ja madalal tasemel küpsetel granulotsüütidel (sinine). Aktiveeritud küpsedmonotsüüdid ekspresseerivad CD14 madalamal tasemel ja neil on väiksem külghajumine.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

21

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M1-rakkude katsuti

Joonis 13. See HLA-DR vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. HLA-DR ekspresseerub antigeeni esitlevatel rakkudel, kaasa arvatud monotsüüdid (roheline) ja plasmatsütoidsed dendriitrakud. See ekspresseerub ka CD34-positiivsetel eelrakkudel, ebaküpsetel ja küpsetel B-rakkudel ning aktiveerunud T-rakkudel.

Joonis 14. See CD11b vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD11b ekspresseerub granulotsüütidel (sinine) ja monotsüütidel (roheline). CD11b ekspresseerub ka NK-rakkudel ja basofiilidel.

Joonis 16. See CD16 vs. CD13 punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD13 ekspresseerub granulotsüütidel (sinine), monotsüütidel (roheline), basofiilidel ja CD34-positiivsetel eelrakkudel. CD16 ekspresseerub küpsevatel granulotsüütidel (sinine) ning NK-rakkude alamrühmal (punane, all paremal).

Joonis 15. See CD11b vs. CD16 punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD11b ekspresseerub monotsüütidel (roheline), ebaküpsetel ja küpsetel granulotsüütidel (sinine) ning NK-rakkudel (punane). CD16 ekspresseerub ebaküpsetel ja küpsetel granulotsüütidel (sinine) ning NK-rakkude alamrühmal (punane, ülal paremal). Aktiveeritud küpsedmonotsüüdid ekspresseerivad CD16 varieeruval tasemel ja need on CD11b-positiivsed.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

22

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M1-rakkude katsuti

Joonis 17. See CD13 vs. CD34 punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD13 ekspresseerub granulotsüütidel (sinine), monotsüütidel (roheline), basofiilidel ja CD34-positiivsetel eelrakkudel. CD34 ekspresseerub varastel vereloome eelrakkudel. Küpsed granulotsüüdid, monotsüüdid ja lümfotsüüdid on CD34 suhtes negatiivsed.

Joonis 18. See CD14 vs. CD64 punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD64 ekspresseerub kõrgel tasemel monotsüütidel (roheline) ja madalamal tasemel granulotsüütidel (sinine). CD14 ekspresseerub kõrgel tasemel monotsüütidel ja madalamal tasemel granulotsüütidel (sinine). Aktiveeritud küpsed monotsüüdid ekspresseerivad CD14 ja CD64 varieeruvalt madalamal tasemel.

Joonis 20. See HLA-DR vs. CD10 punktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. HLA-DR ekspresseerubmonotsüütidel(roheline),B-rakkudel,plasmatsütoidseteldendriitrakkudel jaCD34-positiivseteleelrakkudel.CD10ekspresseerubküpsetelgranulotsüütidel(sinine).

Joonis 19. See CD14 vs. CD16 punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD14 ekspresseerub kõrgel tasemel monotsüütidel (roheline) ja madalamal tasemel granulotsüütidel (sinine, üleval vasakul). CD16 ekspresseerub granulotsüütidel ning NK-rakkude alamrühmal (punane, keskel vasakul). Aktiveeritud küpsedmonotsüüdid ekspresseerivad CD14 ja CD16 varieeruvalt madalamal tasemel.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

23

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M1-rakkude katsuti

Joonis 21. See CD7 vs. CD13 punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD7 ekspresseerub T-rakkudel ja NK-rakkudel (punane, all paremal). CD13 ekspresseerub granulotsüütidel (sinine), monotsüütidel (roheline), basofiilidel ja CD34-positiivsetel eelrakkudel. CD13 ja CD7 koekspressiooni ei ole üldjuhul näha.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

24

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M2-rakkude katsuti

Joonis 1. See aja vs. CD45 punktdiagrammon piiritluseta ja näitab kõiki järjest kogutud sündmusi. Diagrammi eesmärk on hinnata vedelikuga seotud tervikhäiret proovi valmendamise ajal. Stabiilset valmendamist tähistab ühtlane sündmustemuster aja jooksul. Stabiilsest mustrist kõrvalekalduvad sündmused võib piiritlusest Time (Aeg) välja arvata.

Joonis 2. See punktdiagramm FS INT vs. FS PEAK näitab sündmusi piiritluses Time (Aeg). Diagrammi eesmärk on välistada rakudublette või -kogumeid. Üksiksündmused näitavad parameetrite INT ja PEAK vahelist lineaarset seost ning on kaasatud piiritlusse Singlets (Üksikud), samas kui dubletid jäävad lineaarsest seosest väljapoole.

Joonis 4. See CD45 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab sündmusi piiritluses Cells (Rakud). Diagrammi eesmärk on tuua esile erinevad leukotsüütide alamrühmad, mis on piiritletud CD45-positiivsetena. CD45 negatiivne populatsioon sisaldab tavaliselt erütrotsüüte, trombotsüütide kogumeid, koejääke või mitte-vereloome rakke.

Joonis 3. See külghajumise vs. pärihajumise punktdiagrammnäitab sündmusi piiritluses Singlets (Üksikud). Diagrammi eesmärk on välistada rakujäägid, millel tavaliselt on vähenenudpärihajumine.Varastelapoptootilistelrakkudelonsamutikergeltsuurenenud külghajumine, samas kui hilistel apoptootilistel ja nekrootilistel rakkudel on varieeruvalt vähenenud külghajumine. Elujõulised rakud on kaasatud piiritlusse Cells (Rakud).

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

25

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M2-rakkude katsuti

Joonis5.SeeCD45vs.külghajumisepunktdiagrammnäitabsündmusipiiritlusesCD45+. Punktdiagrammvõimaldab eristadamitut leukotsüütide populatsiooni, mis tavaliselt leiduvad perifeerses vere, luuüdi ja lümfisõlme proovides, kaasa arvatud lümfotsüüdid (piiritlus Ly, punane), monotsüüdid (piiritlus Mo, roheline) ja granulotsüüdid (piiritlus Gr, sinine). CD45dim-piiritlus (lilla) katab ala, mille tavaliselt hõivavad müeloblastid ja ebaküpsed B-rakud. Sellesse alasse võivad langeda ka basofiilid, plasmatsütoidsed dendriitrakud, plasmarakud ja NK-rakud. Iga piiritlusega hõlmatud sündmuste puhul erinevate värvide kasutamisel võib analüüside käigus jälgida erinevaid populatsioone.

Joonis 6. See CD15 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. CD15 ekspresseerubgranulotsüütidel (sinine) jamadalamal tasemel monotsüütidel (roheline).

Joonis 7. SeeCD123 vs. külghajumisepunktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. CD123 ekspresseerub kõrgel tasemel basofiilidel ja plasmatsütoidsetel dendriitrakkudel ning madalaltasemelCD34-positiivsetelmüeloidseteleelrakkudel jamonotsüütidel(roheline).

Joonis 8. See CD117 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD117 ekspresseerub varieeruvalt CD34-positiivsetel müeloidsetel eelrakkudel, varastel promüelotsüütidel ja varastel erütroidsetel prekursoritel ning kõrgel tasemel nuumrakkudel. CD117 ekspresseerub ka reaktiivsete NK-rakkude ja neoplastiliste plasmarakkude alamrühmadel. Küpsed granulotsüüdid, monotsüüdid ja lümfotsüüdid on CD117 suhtes negatiivsed.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

26

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M2-rakkude katsuti

Joonis 9. See CD13 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD13 ekspresseerub granulotsüütidel (sinine) ja küpsetel monotsüütidel (roheline) ning varieeruvalt müeloidsetel eelrakkudel.

Joonis 10. See CD33 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD33 ekspresseerub kõrgel tasemel monotsüütidel (roheline) ja madalamal tasemel granulotsüütidel (sinine). CD33 ekspresseerub ka basofiilidel, NK-rakkude alamrühmal (punane) ja CD34-positiivsete müeloidsete eelrakkude alamrühmal.

Joonis 12. See CD38 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD38 on aktiveerimismarker. See ekspresseerub kõrgeimal tasemel plasmarakkudel, mõõdukal tasemel ebaküpsetel müeloidsetel ja lümfoidsetel eelrakkudel, madalal tasemel monotsüütidel (roheline) ja varieeruvalt madalal tasemel aktiveerunud küpsetel lümfotsüütidel (punane).

Joonis 11. SeeCD34 vs. külghajumise punktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. CD34 on varaste vereloome eelrakkude marker. Tavaliselt ekspresseerub see müeloidsetel blastidel, ebaküpsetel B- ja T-rakkudest (lümfoblastid). Küpsed granulotsüüdid, monotsüüdid ja lümfotsüüdid onCD34 suhtes negatiivsed. CD34-positiivsed eelrakud moodustavad tavaliselt alla 0,01% perifeerse vere leukotsüütidest.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

27

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB

M2-rakkude katsuti

Joonis 13. See HLA-DR vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. HLA-DR ekspresseerub antigeeni esitlevatel rakkudel, kaasa arvatud monotsüüdid (roheline) ja plasmatsütoidsed dendriitrakud. See ekspresseerub ka CD34-positiivsetel eelrakkudel, küpsetel B-rakkudel (punane, all paremal) ning aktiveerunud T-rakkudel.

Joonis 14. See CD19 vs. külghajumise punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD19 ekspresseerub ebaküpsetel ja küpsetel B-rakkudel (punane, all paremal), samuti enamikul plasmarakkudel. Neil rakkudel on tavaliselt nõrk kuni mõõdukas külghajumine.

Joonis 15. See CD34 vs. CD117 punktdiagramm näitab kõiki elujõulisi rakke. CD34 ekspresseerubmüeloidsetel blastidel ja varaste ebaküpsete B-rakkude prekursoritel. CD117 ekspresseerubmüeloidsetel blastidel, promüelotsüütidel ja varaste erütroidide prekursoritel, kuid on negatiivne on varaste B-rakkude prekursoritel. Küpsed granulotsüüdid, monotsüüdid ja lümfotsüüdid on CD34 ja CD117 suhtes negatiivsed. CD34- ja CD117-positiivsed eelrakud moodustavad tavaliselt alla 0,01% perifeerse vere leukotsüütidest.

Joonis 16. SeeCD33 vs. CD13 punktdiagrammnäitab kõiki elujõulisi rakke. CD33 jaCD13 ekspresseeruvadmonotsüütidel(roheline),granulotsüütidel(sinine),basofiilidel jaCD34- positiivsetel eelrakkudel. Lümfotsüüdid (punane) ei ekspresseeri ei CD13 ega CD33.

Sisukord > Immunofenotüüpsed kõrvalekalded puuduvad > 1. juhtum. Normaalne täisveri

Iga sündmus loeb

28

Beckman Coulter • ClearLLab 10C paneelid • C33367 AB