Diagnóstico microbiológico

608 CAPÍTULO 10 Legionella

durante 1 año, de tal forma que su presencia no puede utilizarse para el diagnóstico de infección reciente. Como lo documentaron Wilkinson y cols., 168,170 la prueba de AFI en suero mediante antígenos contra Legionella puede causar reacciones cruzadas con el suero de pacientes que tienen algunas otras infecciones. Los sueros de pacientes con infecciones por Mycoplasma pneumoniae relacionadas con brotes y de pacientes con fiebre Q generan reacciones cruzadas con el serogrupo 2 de L. longbeachae y con L. jordanis . Además, se observaron reaccio- nes cruzadas entre sueros de pacientes con tularemia relacionada con brotes ( F. tularensis ) y el antígeno para L. jordanis . También se han observado reacciones falsas positivas en pacientes con Bacteroides fragilis , Proteus vulgaris y especies de Rickettsia y de Citrobacter . 75 Se pueden eliminar algunas reacciones cruzadas mediante absorción de antisueros con Escherichia coli , aunque con cierta disminución en los valores de anti- Legionella . 169 Se pueden eliminar las reacciones cruzadas con las especies de Cam- pylobacter por medio de la absorción de sueros con esa bacteria. 19 El serodiagnóstico de una infección reciente por Legionella requiere la seroconversión (aumento de cuatro veces de los va- lores de anticuerpos) hasta valores recíprocos de 1:128 o ma- yores. Los valores recíprocos altos de forma aislada de 256 o mayores pueden sugerir infección por Legionella durante un brote. Sin embargo, en los casos esporádicos, los valores de 1:256 o mayores no siempre indican una infección reciente, ya que estas cifras altas pueden persistir en personas sanas sin ninguna evidencia clínica simultánea de legionelosis. Como cuestión práctica, es poco probable que el seguimiento necesa- rio para demostrar seroconversión ocurra en la mayoría de los casos esporádicos.

TABLA 10-4  Principales ácidos grasos celulares de algunas especies patógenas de Legionella a

Ácidos grasos celulares b

Especie L. anisa

a-C 1 a-C 1 a-C 1 i-C 1 a-C 1 a-C 1 a-C 1 a-C 1 a-C 1 a-C 1 i-C 1 a-C 1 a-C 1 i-C 1 i-C 1 i-C 1 a-C 1 a-C 1

5:0

L. birminghamensis

5:0, i-C 14h

L. bozemanii

5:0

L. cincinnatiensis

6:0, i-C 16h

L. dumoffii

5:0

L. feeleii

5:0, n-C 1

6:1

L. gormanii L. hackeliae L. jordanis

5:0 5:0 5:0

L. lansingensis L. longbeachae L. maceachernii L. oakridgensis L. pneumophila L. sainthelensi L. tucsonensis L. wadsworthii L. micdadei

7:0, a-C 15h

6:0

5:0 5:0

6:0 6:0 6:0

5:0, n-C 14h

5:0

Estudios de microbiología ambiental Detección molecular de Legionella en muestras ambientales Por lo inadecuado de los métodos tradicionales para obtener le- gionelas, no es sorprendente que se hayan empleado tanto los métodos moleculares. Se han utilizado con éxito para detectar legionelas en diversas muestras ambientales. Lund y cols. 102 uti- lizaron tanto el cultivo como la PCR cuantitativa para detectar especies de Legionella en aguas residuales biológicas. El cultivo reveló una tasa de positividad del 16% (21 de 130 cultivos) para legionelas; en general, el 9% (12 de 130 cultivos) correspondió a L. pneumophila . En cambio, el 99% (433 de 437 análisis) resultó positivo para algunos tipos de legionelas; en general, el 46% (218 de 470 análisis) correspondió a L. pneumophila . Otras personas han cuestionado la utilidad de los métodos de amplificación mo- lecular porque también se pueden detectar ácidos nucleicos a partir de microorganismos muertos. 33 b Los números antes de los dos puntos representan la cantidad de átomos de carbono contenidos en cada uno de los diferentes ácidos grasos; los números después de los dos puntos hacen referencia a la cantidad de enlaces dobles; i indica una rama metilo (-CH 3 ) en el átomo de carbono iso (p. ej., próximo al último átomo de carbono); a indica una rama metilo en el átomo de carbono anteiso (p. ej., segundo desde el último átomo de carbono). Adaptado de la referencia 173. AMPLE Aislamiento o detección de Legionella en muestras ambientales Se ha observado en repetidas ocasiones la presencia cada vez mayor de especies de Legionella en aguas naturales y artificiales en ausencia de pacientes con enfermedad clínica, lo cual argu- menta en contra del cultivo microbiológico rutinario del agua. Por otra parte, se ha acumulado una gran cantidad de evidencia que cita al agua potable como fuente del microorganismo en nu- merosos pacientes que han tenido una infección por L. pneumo- phila . La provisión de agua caliente de las instituciones ha sido Estudios serológicos para Legionella La prueba de anticuerpos fluorescentes indirectos (AFI) se re- comienda como auxiliar para el diagnóstico de legionelosis, so- bre todo para pacientes que no pueden proporcionar muestras respiratorias suficientes (como esputo) para cultivo. La sensibi- lidad de la prueba de AFI es del 75-80% y la especificidad del 100%. 154,168,170 Sin embargo, los médicos deben esperar 2-6 se- manas para que se genere una elevación de cuatro veces en los valores de anticuerpos de los pacientes. Los reactivos para las pruebas de serodiagnóstico para Legionella deben detectar anti- cuerpos de las clases IgG, IgM e IgA. Algunos pacientes pueden presentar una elevación en los valores de IgM sin un aumento detectable en los de IgG o IgA, el cual también puede ocurrir antes en el curso de la enfermedad que un incremento en los valores de IgG. 175 Los anticuerpos IgM pueden persistir hasta a  Se enumeran los principales ácidos grasos celulares (determinados mediante cromatografía gas-líquido) de algunas especies patógenas de Legionella . Estas bacterias son infrecuentes en comparación con las otras gramnegativas debido a sus cantidades relativamente altas de ácidos celulares de cadena ramificada. El ácido más abundante de L. pneumophila y algunas cepas de L. longbeachae es i-C 1 6:0. Sin embargo, las cepas de L. longbeachae pueden tener i-C 1 6:0 o C 1 6:1 como ácido principal, o los dos ácidos pueden estar presentes en canti- dades aproximadamente iguales como los dos ácidos más abundantes. Por otra parte, el principal ácido graso de L. bonzemanii , L. micdadei , L. dumoffii , L. gor- manii , L. jordanis y algunas otras especies es un ácido saturado de 15 carbonos y cadena ramificada (a-C 1 5:0).