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Dual Lab Validation of a Method for the Determination of Fructans in Infant 

Formula & Adult Nutritionals /        

25 Jul 2016

52 

Table 3  

First dilution of the primary standard for preparing the calibration standards S1, S2  

and S3 

Dilution for preparing 

intermediate 

calibration standard 

Volume primary 

calibration standard 

(ml) 

Volume demineralized 

water (ml) 

(S1) 

0.1

4.9

(S2) 

0.5 

4.5 

(S3) 

2.5 

2.5 

Compose the calibration standards by pipetting according to the scheme in table 4 

Table 4 Pipetting scheme for preparation of the calibration standards 

Calibration 

standard 

Volume 

intermediate 

calibration 

standard 

(ml) 

Volume 

primary 

calibration 

standard 

(ml) 

Volume 

chitobiose 

stock 

solution 

(ml) 

Volume 

demineralized 

water (ml) 

Volume 

20% 

acetonitrile 

solution 

(ml) 

Total 

volume 

(ml) 

S1 

0.8 

0.4 

0.1 

13.2 

14.5 

S2 

0.8 

0.4 

0.1 

13.2 

14.5 

S3 

0.8 

0.4 

0.1 

13.2 

14.5 

S4 

0.8 

0.4

0.1

13.2 

14.5

S5 

1.6 

0.4 

0.1 

12.4 

14.5 

The concentrations of the sugars in the intermediate calibration standards (S1), (S2) and (S3) are 

calculated with the formula: 

The concentration of the secondary standards S1, S2 and S3 is calculated with the formula: 

The concentrations of the secondary calibration standards S4 and S5 are calculated with the formula: 

In which: 

C

stock

 = concentration sugar (mg/l) 

C

interm

 = concentration intermediate calibration standard (mg/l) 

C

stand

 = concentration secondary calibration standard (mg/l) 

V

stock

= volume stock solution in intermediate solution (ml) 

V

interm

= volume intermediate solution in secondary standard solution. 

5.0 = volume intermediate solution (ml) 

14.5 = total volume secondary calibration standard (ml) 

5/)

(

int

stock

stock

erm

C V C

 

5.14/)

(

int

int

tan

erm

erm

d s

C V C

5.14/)

(

tan

stock

stock

d s

C V C

 

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